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餡餅
那天被老媽叮囑去相親。據介紹人講,這個男孩很好,很有出息,很英俊??墒?,天下英俊男生雖然多,我卻還沒墮落到上“非常男生”的地步。剛好頭天買的彩票中了300元,我便直奔那即將到手的300元而去。
車到站,我第一個躥下車,腳剛落地,頭上就被什么東西拍了一記,然后又是一記,剛站好又是一記,嚇得我再也不敢動,而地上正滾著3個漢堡包。
我一直覺得漢堡包是外國人的餡餅,你看吧,中國人長得比較瘦,所以餡餅也薄;外國人粗枝大葉,餡餅也就心寬體胖。我嚷嚷了起來:“誰干的?給我下來!”
我頭上頂著一片餡餅里的圓白菜葉兒,雙層巴士上伸出一個個腦袋,一臉無辜的樣子,接著就是一陣暴笑。
車開走了。這時,耳旁有個小聲音說:“小姐,對不起……”
彩票
是個男生,眼睛眨巴眨巴地:“小姐,我不是故意的,下車時人太擠了,一失手漢堡包掉了……”說著,他伸手要幫我摘掉頭上的菜葉,我一晃頭拒絕了。可是這一晃頭,菜葉又搭到我額頭上了,看上去就像長了碧綠眼珠的二郎神,他忍不住哈哈大笑,說:“你別生氣了,這樣不好?!?/p>
怎么反倒他來安慰我了?明明做壞事的是他,他應該被討伐才對!我就認真地說:“你知道你今天犯了什么錯誤嗎?”
“我不應該砸你?!?/p>
“不對,你主要是破壞了我的心情?!?/p>
“什么心情?”
“我今天本來很高興?!蔽夷贸隽瞬势保翱匆娏藳]有,我中獎了,可是,你破壞了我的心情。我中一次獎容易嗎?”
他笑了,眼睛小燈泡一樣亮起來:“看不出來,你也買彩票啊?!?/p>
那天的結果是,他跟我來到領獎地點,掏出200塊,全部買了和我相關的號碼,比如我注意過的出租車的牌子,我扔掉的車票票根號,我路過的廣告牌上面的電話。他說,“你是個幸運的人,你一出現,天上就掉餡餅。”
但是都沒中。
M記
那片圓白菜葉最后還是被拿掉了,而我也同意由他來彌補錯誤,請我吃一頓豐盛的M記。其實M記有什么好吃的,不過就是漢堡、雞翅、可樂,但是你知道,有時候上M記并不僅僅只是為了吃東西,古人說秀色可餐、說對酒當歌,真的是為了吃和喝嗎?當然不是,古人是為了審美和抒情??!
我觀賞著這位帥哥,他有麥殼色的皮膚、烏漆漆的眉眼,而且還對我百依百順。
“喂,你干嗎一次要買3個漢堡呢?”
他笑呵呵:“一日三餐啊。”
“天天吃漢堡?”
他點頭。
我忽然敬仰他了,一個人天天吃漢堡還能長這么好看,不簡單!“你是干什么的?”
“我啊,沒什么事可做,在家寫寫小說?!?/p>
我暈,遇到作家了。
作家
最怕就是作家了,鄙人認為:“作家一般都有點精神分裂。”所以,那天我和這位名叫李白的作家分手后,就沒再打算和他聯系,雖然他給我留了MSN和QQ號碼。
我回到我的小房子里,這是我的家,也是我的店,畢業后我就一直生活在這里,對面就是我讀了4年書的大學。我姐出國后,爸媽就搬到她的高樓大廈里去了,我正好盤踞了老巢,索性把一樓改成了店面,專門賣鞋子。
鞋子由本人設計,請清芬路的老鞋匠手工制作,每做一雙我給他50元手工費,其余的由我來搞定,進貨、交稅、宣傳,種種下來,如果每雙鞋子賣到300塊的話,我就可以賺80塊,真是爽歪歪。
我這人沒什么大志向,每天吃得飽,睡得好,買彩票,過得快活就可以了,我爸媽終于承認他們的女兒也就是個小老板的命。他們就說:“唉,由她去吧?!?/p>
但有件事他們一直沒有放松過,那就是相親,三天兩頭,我就要被拉出去相一次親,我就像是化學試驗品,他們不停地把各種男生扔到我的實驗皿里,看會不會發生爆炸、火花或者產生氣體什么的。
比如今天,我去見的是一位大相撲,爸媽也真夠狠心的,竟然想把他們的女兒嫁給一頭“大象”,就不怕他一巴掌像拍蚊子一樣把我拍死?我扭頭就走,不行,我要斷了爸媽給我相親的念想。
我就想起李白。我想起他是有原因的:第一,他是新人,不像我那幫狐朋狗友,個個臉熟,一看就知道是托兒;第二,他有實力,人長得順眼,表情也陽光,是招人疼的典型。
金城武
第二天是周末,下午兩點李白準時出現在我的小店門口,還穿了一雙锃亮的大黑皮鞋。
我們步行到爸媽家,快進小區時我挎著他的胳膊,極其恩愛的模樣。事如所愿,爸媽眉開眼笑,連我自己也很有成就感。
走出小區,禁不住呼了口長氣,我不用再挎著他胳膊了,他卻開始一瘸一拐起來。我說,你怎么啦?他指指他的腳,我的天,細皮一雙腳,硬是給新皮鞋磨出一個大血泡!
“你何苦穿這個啊,真笨哎你?!?/p>
“我這不是為了裝得像一點啊。”他委屈地瞪我。
正巧到了我的店,順手給了他一雙麂皮拖鞋,總體算下來,還賺了。
第二天,李白又來了,手里提著個口袋,裝著那雙麂皮鞋。他說:“謝謝,我來還給你。”
我一拍桌子:“呸,真有你的!”他嚇得一哆嗦,連忙改口:“我買,我買下來還不行嗎?”
他用220塊人民幣買下那雙麂皮拖鞋,走了。其實他不知道,這雙鞋已經在我的櫥窗里陳列很久很久了,從來沒有人來買它,因為它的顏色太特別了,款式太簡單了,樣子太不討好了。
但是李白穿它就很好看,你看他懶洋洋,一身棉布衣褲,配著這雙模樣奇特的鞋,很像T臺上走過來的小男模,不,金城武,他像金城武!
麂皮鞋子
有了麂皮鞋的李白總是時不時地跑來溜一圈,顯得挺牛。這樣一來,我店里的女顧客開始激增,多是對面大學里的女孩子。唉,美色當前,誰不惻隱?我看著這個年輕的男孩,想,如果很久以后,我要找一位愛人,我希望像李白再長大一點的樣子,他也要穿著舊舊的麂皮鞋,懶洋洋地在陽光里走,他也要有這樣的眼睛這樣的笑容……
“喂,你想什么呢?”李白把臉湊過來,看著我。
我們臉對臉,眼對眼,這已經是晚上9點半,店里要打烊了。他這么看著我,我一時有點發暈,隨口說:“李白,你多大?”
“干嗎?要和我相親啊?”
“算了,懶得理你?!?/p>
“我29歲,射手座,和處女座最配了,未婚?!彼谋砬楹鋈缓茑嵵?。
“你發傻?”
他坐在我的桌子上,垂著的腳上,掛著我設計的麂皮鞋。他說:“告訴我,你是不是灰姑娘?”
“灰姑娘?不不不,灰姑娘有水晶鞋,我只有麂皮鞋。”
“是一樣的,你的麂皮鞋也會幫你找到你想找的人?!彼跗鹞业哪?,煞有介事地說。
在我和李白戀愛以后,我才知道,被砸了3個漢堡的那一天,不僅僅是我的相親日,我的男朋友李白亦是如此。
“你挑的是哪家姑娘?不會是我吧……”我心虛地問。
“很有可能。”他很臭屁地說。
作為新時代的生存方式,網絡生活正變得普及,它讓我們置身于信息的海洋,隨時參與社會的變遷。而作為時代的驕子,未來社會的主人,大學生是如何運用網絡,如何在寒假這段時間享受網絡生活的呢?這兩種新勢力的碰撞又將給我們的社會帶來怎樣的希望與擔憂呢?了解大學生的網絡生活狀況對于更加準確的把握時代前進的方向十分重要,所以我們在此將其列為實踐報告的主題,調查了寒假期間部分大學生的上網情況?,F將此次實踐活動的有關情況報告如下:
一,關于上網頻率和用途的調查
調查顯示,大多數大學生在寒假期間都會上網。上網頻率一般以幾天上一次網居多。上網的時間一般控制在2-5小時??葱侣劇⒉樾畔?、收發郵件、下載軟件或資料、制作主頁、跟帖灌水、交友聊天和娛樂休閑等為大學生進行的常規上網任務。據有關資料顯示:前三者的比率較高,分別占到66%、67%和68%;上網目的只為完成上述內容的某個單項或雙項者占24%,76%的人上網為完成上述3項以上的多重任務。人均電子郵箱2.46個,每周人均收發郵件3.34封。做過版主和建有個人主頁者的比率分別為10%和15%。而在調查的大學生中,男女生的上網情況又有所不同,以下是詳細數據:
男生女生上網人數情況百分率差異表
上網頻率(天/次) 用途
0 1 2-6 7 30 30以上 了解信息 娛樂 學習 聯絡
男生 0.00% 17.65% 43.14% 23.53% 1.96% 0.00% 68.63% 80.39% 13.73% 49.02%
女生 0.00% 5.80% 47.10% 42.75% 10.14% 3.62% 68.12% 87.68% 28.99% 74.01%
平均 0.00% 8.99% 46.03% 37.57% 7.94% 2.65% 68.25% 85.71% 24.87% 64.55%
從表中我們可以看出,男生上網的頻率普遍比女生頻繁,大都集中在1-7天一次。而在用途方面,了解信息兩者大體相同,雖然女生在娛樂方面比男生還多1.29%,但在學習方面卻比男生高15.26%,這似乎體現了女生的自律性更高些,而在聯絡方面,女生的``愛嚼舌頭’’與``重感情’’是眾所周知的,因此,百分率比男生高24.99%也在意料之中。此外,調查顯示男生和女生中從未上過網的概率是零,而經常接觸網絡的占半數以上。這說明網絡生活在大學生中已經得到相當的普及。
縱觀平均百分率,在用途方面,據首位的不是獲取信息,也不是學習,而是娛樂。這也難怪,在這個充斥著誘惑的花花世界里,有太多太多吸引人的東西,作為新一代的我們,還未經歷人生百態,世事滄桑,我們所擁有的閱歷還不能夠使我們在誘惑面前有張有弛,有時寧愿選擇娛樂,滿足一時的身心放松。但這也不是說我們對娛樂的態度應該一見就嗤之以鼻,適當的娛樂是必要的,畢竟娛樂能放松一個人的身心,它的作用不是其他東西輕易能替代的。但世事萬物都遵循著一條不變的道理,那就是過猶不及,娛樂不應該占主導,這就像網絡并不是單單為娛樂而發明的,我們始終都得記住網絡存在的意義是為了方便生活,方便信息交流。
二,關于網上聯絡的調查
網友個數 少于5 6到10 11到20 20以上
42% 24% 14% 21%
其中16%的人交有同性網友,交異性網友者多達65%;有大齡網友者僅占4%,而同齡網友比率高達79%
聊天工具 qq 聊天室 bbs 其他工具
70% 40% 40% 8%
交流思想感情和相關信息是網聊的經常性話題,分別占到63%和53%,同時也有少量的胡扯和對罵現象,分別為17%和5%
看來上網聊天已成為現代大學生與人交流的重要方式,網絡交友已經被大多數人所接受。調查顯示半數以上大學生有6個以上的網友,而有兩成被調查者有多達20以上的網友,可以稱這些被調查者已經在網絡這個虛擬社會建立了一個不簡單的人際網絡。大家似乎對交異性同齡網友情有獨鐘,而大齡網友只占4%,非常的稀少。總體上網聊的話題與實際生活中相似,但也存在胡扯與對罵等不文明現象,雖然它們所占比例較少,但反映的問題仍不可被忽視。
三,關于網游態度的調查
1上網與學習 耽誤學習 促進學習 不促進學習但增加綜合素質
6% 18% 81%
2 網絡信息可信度 較高 一般 較底
11% 73% 16%
3 網絡黑客 崇拜 明確反對 有機會也想嘗試
29% 27% 44%
4 網戀 支持 反對 既不提倡也不反對
11% 13% 77%
網絡是一把雙刃劍,它在給大家提供方便的同時,也可能在我們周圍埋下隱患。以上數據表明,大部分大學生是贊成網游的,積極肯定上網對于提高綜合素質的作用。或可欣慰的是,這些調查結果意味著網絡信息的可信度有所提高,整治網絡的工作取得了一定的成效。但這不意味著可以放松警惕,畢竟網絡是存在風險的。
由于大部分大學生不反對網絡黑客,這讓人對于網絡安全性不免產生擔憂。眾所周知,電腦一旦感染病毒就不能正常運行,里面的重要資料信息可能被盜取,如遇到病毒泛濫,整個感染的局部網絡都有癱瘓的危險,而由此帶來的經濟損失將無法估量。
另外,大學生對待網戀的態度比較成熟,只有11%的人相信網戀,多數人持觀望態度。
一些看法與思考
通過此次調查,我們對信息時代這個大潮流下大學生的網絡生活作了初步了解。這其中有意料之外的結果,也有情理之中的答案;有令人擔憂的滯后,也有使人欣慰的進展。總體來說,網絡生活之于大學生利大于弊,大學生對待網絡生活的態度積極向上。網絡還在繼續的發展與完善,就像當代大學生還在不斷的學習和進取。雖然他們都還不夠成熟,但他們都在走向成熟?;蛟S現在還看不到他們開出嬌艷的花朵,但不久后一定能品嘗到他們結出的飽滿果實。
有人曾這樣反駁那些害怕甚至敵視飛行的人,“不是人人都會碰上空難,乘坐飛機比大多數運動更為安全,汽車和火車也并不是你想象的那么安全,而是常常只有空難才能‘榮登’媒體的頭條”,于是說乘坐飛機其實很安全,那么我至少可以在這里肯定上網比乘飛機更加的安全!調查的結果應該也說服了不少網絡者,此次的調查如果能增加大家對于網絡的信心,也是我們所樂于看到的。
(一)中學生及其家長對網絡的態度和相關行為的情況
1.中學生上網率極高,上網時間長,多數家長卻從未上過網,大部分教師上網經驗不夠豐富
2.多數中學生對在校上網的條件不滿意,家長、教師呼吁改善條件
3.多數家長既贊成子女上網,又擔心子女上網影響學業
(二)網絡環境對中學生的影響
1.網絡環境對中學生的積極影響
(1)中學生使用互聯網有助于形成全球意識,強化對國家對民族的責任感。透過網絡的窗口,他們關注家事、國事、天下事,使視野空前開闊起來。全球意識的增強,適應了中國加入wto的新形勢,對于中學生們今后走入日趨一體化的世界,顯然是大有好處的。
(2)互聯網為中學生學習提供了有利條件,拓寬了他們的視野。網絡資源在一定程度上滿足了中學生們進行探究性學習、研究性學習的需要。
(3)中學生使用網絡有助于擴大交往的范圍,促進青春期心理的健康發展。網絡上,電子郵件、oicq、聊天室、bbs等把天涯海角、素不相識的人拉到零距離,在相互咨詢、交談、討論、傾訴、請教的過程中,極大地滿足了中學生們旺盛的表達欲、表現欲和社交欲。這對于舒解壓力,保持青春期的心理健康有一定的好處。
(4)中學生常上網,激發了對英語和現代科學技術的學習熱情。
2.網絡對中學生的負面影響
(1)網上信息垃圾使中學生深受其害。
(2)中學生迷戀網絡對學業產生沖擊。
(3)網上聊天引發網戀,調查顯示,6.7%的中學生坦言自己有過網戀行為(實際比例會更多)。網戀中存在許多情感陷阱,中學生往往是受害者。
(4)網絡不良文化弱化了中學生的道德意識。
(5)網吧管理問題依然嚴重,給中學生造成諸多問題。
(三)對策與建議
網絡環境對中學德育工作提出了新的挑戰,同時也提供了許多機遇。xx同志在中央思想政治工作會議上強調指出:對于信息網絡化問題,我們的基本方針是積極發展,加強管理,趨利避害,為我所用,努力在全球信息網絡化的發展中,占據主動地位。這是我們進行網絡德育工作的指導思想。我們建議:
1.更新教育觀念,推進學校網絡德育工作的開展
第一,通過宣傳和學習,使全體德育工作者轉換觀念,統一思想認識,拋棄網絡有害論,消除網絡恐慌癥,充分認識到網絡德育的重要性和網絡在中學生成長過程中的重要作用。
第二,重新定位學校德育的目標,把青少年兒童的道德成熟度作為網絡德育的首要目標,著力培養學生正確的道德價值觀、判斷力和自制力。
第三,重新設計學校德育的內容,在原有德育內容的基礎上突出價值觀教育,增強識別評價和選擇道德信息的能力;注重道德意志力的訓練,使學生的道德認識與行為實踐統一起來;開設網絡德育課程,強化學生的網絡道德意識和網絡責任感。
第四,利用計算機和網絡技術,拓展德育的時間和空間。
2.培養網絡德育隊伍,增強網絡德育力量
其一,通過各種形式的培訓、講座和考核,使各級教育管理者、德育工作者以及全體教師掌握網絡基本知識、技能,并熟悉網絡德育的運作方式和手段,學會常見的德育課件開發工具(如authware、director、flash等)。在講求實效的前提下,改進和充實目前實施的沙河市中小學教師計算機考核的方式與內容,如增加教師利用網絡開展道德工作的考核內容。
其二,選拔并培訓一批思想政治素質高,網上溝通技巧好,具有豐富的網絡經驗和技能的專兼職網絡德育工作者,由他們提供在線指導,幫助上網中學生解決各種心理、思想、學習等問題;同時,注意在網上收集整理有代表性的德育問題,向有關職能部門反饋,以加強德育工作的針對性。
3.加強對中學生進行網絡道德和網絡行為規范教育,自覺筑起心靈的長城
一是加強以理想信念為主題的思想品質教育,用正確的人生觀、世界觀和價值觀筑起心靈的長城,抵制網上各種不良思潮和有害信息的侵蝕。
徐東商圈位于長江二橋徐東區域,近年來已躍升為武漢五大商圈之一,商業基礎雄厚,區位優勢明顯,發展后勁充足,擁有銷品茂、歐亞達、??兔?、新世界百貨等大型零售賣場,以及華電、省電、湖北能源、光明萬麗等電力、金融、證券、酒店類企業1000余家。商圈周圍交通發達,十分鐘內即達漢口、青山、洪山等地區;商圈內高端住宅林立,擁有近80萬人口,輻射人口近200萬。目前,徐東商圈已經形成了企業總部、金融服務、商貿流通、家具建材、生活休閑等業態,商圈日平均人流量110萬,日平均車流量130萬,“大徐東”的概念深入人心。
二、發展現狀
1.商業形態成熟化
徐東商圈經過十幾年的積蓄和發展,已經成為武漢商業形態最集中、最多樣化的商圈之一,涵蓋大型百貨、購物中心、專業賣場、大型超市、星級酒店及臨街店鋪等多種業態形式,商業氣息濃厚。
⑴大型百貨。新世界百貨(3.2 萬方)、中商百貨(2 萬方)、徐東平價(2.4 萬方)等區域影響力較大的百貨商場。
⑵購物中心。銷品茂(11萬方)、福客茂(3.7萬方)、凱旋門購物廣場及即將完工的華中首創生態劇場式購物中心—群星城(10萬方)。
⑶專業賣場。歐亞達國際家具博覽中心(8萬方)、工貿家電及徐東古玩城(2萬方)。
⑷大型超市。沃爾瑪、麥德龍、新一佳、中百倉儲等。
⑸其他。光明萬麗酒店(五星級)、華天大酒店(五星級)、金逸影城、銀星菲林國際影城、萬達影城、歡樂空間KTV、火車頭體育館、肯德基、麥當勞、必勝客等。
2.總部經濟高端化
由于地理環境優越,商圈人流繁華,沿徐東大街一帶成長起來的總部經濟已經呈現出高端發展趨勢。目前區域類已擁有華電大廈、省電大廈、中鐵科工大廈、湖北能源大廈等企業總部大樓,福星惠譽國際城、中力企業大廈、水岸國際等高端寫字樓,以及在建的綠地國際金融城、匯通工貿總部大廈、江尚天地、菩提金國際金融中心等國際5A甲級寫字樓。隨著濱江文化商務區的建設不斷推進,未來的徐東將會是高端商業和大型總部經濟的聚集地。
3.高端住宅聚集化
徐東商圈地處武昌、青山、漢口、洪山等區域交界之處,輻射沙湖、毗鄰東湖,區域內高端樓盤林立,目前已有華電社區、省電社區、省直公務員小區、水岸星城、水岸國際、都市經典、國際城、世紀花園等高端小區40多個,另有東原時光道、江尚天地、都市經典二期、航天首府等20多個在建項目。目前商圈3公里范圍內居住著80萬人,輻射人口達200萬,中高層消費群體比例達50%,整體具有較強購買力。
4.休閑購物一體化
徐東商圈除擁有大型購物中心、百貨及商業辦公樓宇之外,還具備大量娛樂休閑設施。餐飲方面,實現高中低端消費群全覆蓋,并有沙湖路飲食一條街等特色餐飲聚集地;運動健身方面,有火車頭體育館、空中健身會所等;娛樂方面,有法老王國際會所、羅馬之夜國際俱樂部、歡樂空間KTV、百樂天KTV等;休閑方面,有武漢最大的城中湖公園沙湖公園、全國最大的城中湖東(部分區域)湖、獨處幽靜的公園四美塘等。至此,徐東商圈已基本能解決各類人群在衣、食、住、行、樂等方面的需求,形成休閑購物一體化的商業模式。
三、競爭優勢
1.區位優勢明顯
徐東商圈地處武漢三鎮核心區域,位于武漢內環線主干道,是長江二橋和長江隧道的出入口所在地。商圈核心區域位于友誼大道和徐東大街交匯區域,以徐東大街、友誼大道為主軸向四周輻射,并經由中北路連接中南商圈。友誼大道南接中山大道,北抵武鋼集團,是武昌的經濟大動脈之一,同時也是連接武昌、青山、洪山的主干道,能夠為徐東商圈帶來源源不斷的人流。徐東大街往東直通東湖,往西直達長江二橋,是連接武昌和漢口的主通道之一。商圈30分鐘車程內居住著武漢市50%的人口,其輻射范圍南至司門口、中南商圈,北至整個青山區,擁有武鋼、中電、華電等大量消費人群。
2.區域交通便捷
徐東商圈位于武漢、武昌、漢口三大火車站的中心區域,已經建成的地鐵2、4號線經過商圈次核心區域,正在建設的地鐵7、8號線以及規劃中的5號線將全部經過商圈核心區域,加之商圈內有公交線路40余條,能夠通達武漢三鎮,基本形成了30分鐘遍達武漢主城區、1小時內遍達武漢城市圈的交通出行格局。
3.商業形態多樣
縱觀武漢各大商圈,武廣商圈依靠江漢路步行街帶來巨大人流量以維持自身繁榮發展,光谷商圈依靠光谷步行街和周邊強大高校資源日益發展壯大,中南商圈則以中商集團中商廣場和武商集團亞貿廣場為核心,主打高端百貨業,主體業態較為單一,因此在地鐵2號線開通后,該商圈受到了明顯沖擊。盡管徐東商圈同樣缺乏步行街強大人流帶動,但因其商業形態多樣,對周邊人群吸附力強,依然能夠保持快速發展。
目前徐東商圈已形成高端百貨、大型購物中心、專業家具建材賣場、特色街區、大型超市、沿街鋪面等多種商業形態,即將開業的華中首創生態劇場式購物中心群星城,以及規劃中集高檔商業、寫字樓、酒店、居住、休閑、旅游等業態于一體的萬噸冷庫城市綜合體項目,將進一步強化商圈發展的自我“造血”功能。
四、存在不足
1.周邊環境和配套設施不完善
⑴配套交通有待優化。雖然商圈內主干道交通發達,但是高峰時期擁堵現象依然嚴重,特別是在徐東大街和友誼大道相交的十字路口區域,上下班期間車行尤為緩慢。此外,商圈微循環道路明顯欠缺,微循環道路破損以及占道經營、占道停車現象較為嚴重,容易形成交通“腸梗阻”,給車輛出入商圈造成不便。
⑵周邊環境不夠美觀。由于商圈區域內部分路段沿線房屋劃入拆遷范圍,道路和房屋陳舊,臟亂差現象突出,加之流動攤販帶來生活餐飲垃圾,嚴重影響了商圈的整體形象。
⑶配套公共設施不足。涼亭、垃圾桶、休閑椅等配套設施數量不足,大型休閑樂園和游樂場所欠缺開發等,使得消費體驗不夠完美。
2.商業特色和商圈人氣不理想
一方面,徐東片區的城中村改造工程不斷推進,大量居民外遷,其中相當一部分居民因限于還建房建設進度暫時無法回遷,導致周邊居住人群大幅減少;另一方面,商圈特色尚不鮮明,對遠離商圈輻射范圍的人群無法形成足夠的吸引力,導致商圈人氣尚不理想。
3.整體運作和經營模式不創新
徐東商圈缺乏整體運作規劃,個體經營模式單一、缺乏創新,同時絕大多數商戶的全過程服務意識不強,僅靠商品自身品牌效應吸引客源。
4.整體規劃和商圈定位不明晰
徐東商圈橫跨武昌、洪山兩大行政區域,行政協調和政策扶持存在一定差異性,其中徐東大街洪山區域主要以總部經濟大樓建設為主,而徐東大街武昌區域則主要以寫字樓和商業購物中心為主。此外,由于徐東商圈核心區域并未進入濱江文化商務區戰略范圍之內,其發展主要依靠自身地理和區位優勢,在市場機制的作用下野蠻生長,商圈定位模糊不清,整體特色不明顯。
5.零售百貨和商業街區不連續
徐東商圈以徐東大街和友誼大道為主線向四周輻射,輻射范圍內零售百貨和商業網點星羅棋布,但多為分段式分布,例如近年來發展迅猛、但與商圈核心區域無明顯商業街區連接的岳家嘴片區等,使得商圈發展不均衡、不連貫。
6.周邊生態環境優勢未利用
徐東商圈周邊風景名勝尤多,其中東湖作為全國最大的城中湖,有穩定的客流量;沙湖公園作為全市最大的城中湖濕地公園,擁有良好人文地理環境;四美塘毗鄰長江,地處幽靜。商圈的消費者和以上區域的旅游者可互相轉換休閑方式,如消費者可在購物之余前往公園娛樂休憩,但由于地理阻隔,東湖、沙湖公園和四美塘公園與商圈核心區域未能實現很好對接,使得周邊生態環境優勢未能充分利用。
五、相關建議
1.完善周邊環境和配套設施
⑴完善商圈交通。加大主干道交通疏導,強化上下班時期擁堵路段的交通指揮和車輛引導,對車輛進出商圈區域設置合理指示牌;加大商圈區域內微循環道路建設力度,重點清理宏祥路、宏茂巷、團結路、團結新村路等路段破損路面情況并進行路面美化,盡快啟動沙湖環湖路與徐東大街的對接工作,保障沙湖周邊交通暢通。
⑵完善周邊環境。重點整治友誼大道、徐東大街等主干道,以及沙湖路、宏昌路、宏祥路等微循環道路的占道經營、占道停車及臟亂差現象,確保責任到人、定期檢查、整治效果及時公布。同時加強對微循環道路的燈光照明和景觀裝飾,如設置特色盆景或文化雕塑,增添商圈人文氣息。
⑶完善配套設施。在商圈沿途添置休息凳、垃圾桶、自動販售機等,同時加大急救醫療服務點、停車點等指示牌和商圈布局圖的分布密度,為消費者提供精細化服務。
2.凸顯商圈特色及其差異化
⑴挖掘現有商業體及街區特色。引進一些特色小眾品牌和行業領軍企業門店,進一步提升銷品茂、福客茂的整體運營水平;以歐亞達家居和居然之家為引領,打造徐東家居建材特色市場;鼓勵徐東古玩城升級改造,進一步擴大經營面積和影響力;支持沙湖路餐飲一條街建設,引導其提升飲食特色、消費環境和服務水平。
⑵加快推進規劃或建設中的特色商業體項目。加快群星城及東原錦悅配套兒童主題特色街區等項目建設,豐富徐東商圈業態;著力推進萬噸冷庫城市綜合體的招商引資工作,促使這一集高檔商業、寫字樓、酒店、居住、休閑、旅游等功能于一體的高端城市綜合體項目盡快落成;完善綠地國際金融城環境配套,助力提升徐東商圈消費吞吐量。
⑶積極謀劃一批新的特色街區。如將沙湖公園打造為雅文化聚集地,吸引文學愛好者、藝術家等定期在此聚會研討;引進類如車庫咖啡、3W咖啡等主打草根創業者交流平臺的創意類商業主題,擴大穩定型消費群體種類;建立電子商務聚集地,彌補徐東商圈業務空白等。
3.創新整體運作和經營模式
一方面鼓勵各商家加強合作,跨越商業形態,開展以節慶為主題的大數據庫營銷活動,活躍商圈氛圍,實現共同發展,同時針對客戶消費習慣建立檔案,定期了解客戶需求、獲取反饋,實現深度情感溝通,培養穩定客源;另一方面引導商家充分利用微信、微博、團購網站等多種營銷載體,如將產品優惠信息以手機短信的形式發送給路過此地的潛在客戶,從而突破地域限制,吸引傳統經營模式難以觸及的客戶群前來消費。
4.加強整體規劃和區域定位
⑴加強與洪山區的協調合作。洪山以總部經濟建設為主,武昌則主打商業購物中心和寫字樓,鑒于徐東商圈處于紐帶地位,兩區應加強協調合作,實現在商圈招商引資、城市管理等方面的優勢互補,同時嚴格控制徐東大街沿街地塊住宅開發,合理布局商業形態。
⑵加快與濱江文化商務區的融合發展。徐東商圈部分區域位于濱江文化商務區范圍,在謀劃其發展定位時,應注重與濱江文化商務區的對接,提供相適應的購物休閑和生活娛樂配套,從而借力我區“三區融合,兩翼展飛”發展戰略,帶動商圈整體提檔升級。
⑶加速商圈沿片舊城改造。針對團結路與宏祥路沿線房屋破舊、年久失修的問題,加快推動這一片區的舊城改造工程,并將該片區域兩家危險因素較高的公司(占地面積17畝的武漢漢石石油運輸有限公司和占地面積30畝的武煤百江燃氣有限公司)協調搬出商圈中心地帶。同時,穩步推進岳家嘴漬水區改造,減小季節性水淹的發生頻率和負面影響,煥新商圈形象。
[關鍵詞]來華留學生;漢語電商平臺;使用意愿;問卷調查;實證分析
1引言
隨著電子商務和互聯網金融的發展,目前中國的網絡購物正步入快速成長期,針對各種目標人群的電商網絡平臺呈現井噴式增長,在深化對外開放的背景下,中國的電子商務也在走出國門,走向世界,電子商務的蓬勃發展吸引更多不同層次不同背景的用戶加入,來華留學生就是其中的一個目標人群,據統計,目前在華外籍人士數量已經超過200 萬,而在華留學生的人數也高達40 萬左右,伴隨著在華留學生人數的增加,留學生已經成為一個令人矚目的網絡購物消費市場。他們熟悉網絡環境,并且對網上購物也有一定的經驗。但在跨文化交際的背景之下,由于存在著文化認同、消費習慣、漢語水平等影響因素,留學生的網購行為卻不同于中國人,所以以留學生為主體,針對其特殊性,對他們使用漢語電商平臺意愿的影響因素進行調查研究,把握在華留學生網購行為的特點,對于啟發企業針對其影響因素制定營銷策略,開發電商平臺,促進中國的電子商務為國外用戶提供一個友好的交易界面,擴大網購群體,促進互聯網經濟的發展,是非常必要的。
2文獻綜述
對于網購行為的影響因素的研究,一直是國內外的研究熱點,并且已經有大量的研究成果。Ahasanul Haque(2009)等人運用因素分析和多元線性回歸分析,得出結論認為影響消費者網絡購物意向的主要因素包括:網絡購物環境、產品特點、網絡熟悉程度和信任、網絡促銷行為。朱東紅(2007)以沒有過網上購物經歷的消費者為研究對象,探討影響他們未在網上購物的因素。影響因素對初始購物者無網上購物意向的影響力排序為:個人信息安全;交易可靠;有用、方便;購物感覺。人口統計因素的影響:性別、年齡、教育程度、收入。從文化影響的角度看,Singh(2006)等使用計劃行為理論(TPB)對比三個國家,德國、印度和中國提供了實證證據說明本地消費者是傾向于文化適應性較強的網站還是傾向于標準化的網站。文化因素影響到消費者的信念、態度和網上購買意圖。Feng(2008)通過深入訪談的方法,以在英國的中國留學生為對象,進行了相關研究,發現自我概念、生活過渡、年齡、文化、同級和地點停留的預期時間影響留學生的消費行為。在中國,張慧玲(2011)以TAM技術接受模型為理論基礎,研究了感知網上購物有用、感知網上購物易用、感知網上購物風險、感知網上購物信任這四個因子對于網購意愿的影響。梁正模(2014)認為影響電子商務的滿意度的變量有便利性、網站品質、感知風險、配送服務這四個,并從這些角度調查了留學生在華網購的滿意度。
3問題提出與研究假設
總體上看,關于留學生消費的研究在數量上并不充分,同時涉及的內容比較有限,大多是針對留學生旅游個別方面的小范圍研究。目前基本沒有專門針對在華留學生網上購物行為的研究?;谏鲜龅奈墨I回顧,我們可以認為,留學生在本國已經有網購的體驗,在眾多影響一般消費者網購意愿的因素中,筆者認為“網站便利性”“網站品質”“交易風險”“物流風險”這四個影響因素對于留學生的網購行為有著較大程度的影響。與此同時,基于大多數在華留學生漢語交際能力不足的特殊性,語言水平同上述四個因素一樣,會對留學生使用漢語電商平臺的意愿產生影響,而在跨文化交際的背景下,文化差異的因素同樣不能忽視,這五種因素對使用意愿的影響在來自不同文化圈的留學生身上一定會有不同的體現。因此,我們以這些因素為研究基礎,構建如下框架圖。
網絡電商平臺的使用便利性包含的范圍非常廣,比如:如果外國留學生在使用漢語電商網絡平臺時感覺網站的設計很好,網站導航的購買程序非常清晰,并且非常容易就掌握網購所需的技能,在網速較快的情況下,提高了購買的效率,消費者能夠很快地找到自己想要購買的物品。此外,進入網站的方便可行性、網頁下載的速度都將影響網絡用戶停留網頁時間的長短,網站專業性網站的設計也一定程度上促使顧客認可網站的完整真實及服務的專業能力,消費者認為使用漢語電商平臺的便利性越強,那留學生的使用意愿也會越強。
根據消費者行為特點分析得出,商品價格仍然是消費者購買行為的決定性因素。由于網上商家眾多,產品供應渠道來源廣泛,商品的價格質量也各不相同,不少網絡消費者認為在價格可以接受的情況下會選擇評價更高、質量更好的產品,即性價比高的商品。漢語電商網絡平臺中出售的商品或服務種類越多,質量越好,產品或服務的描述越詳細,并且與實際情況越吻合,網站的品牌信譽和安全性越高,留學生對于電子商務平臺質量越認可,使用意愿就越強。
留學生在使用漢語電商平臺網購時,如果認為自己在交易過程中的風險越大,比如自己的賬號密碼可能會泄露,銷售商會濫用自己的私人信息,給自己帶來不必要的麻煩,甚至增大金融風險,帶來損失,則他們的使用意愿會較低。
網購物流配送服務的交付速度,及時性、便利性、完整性和穩定性都顯著影響著客戶滿意度。貨物延誤,丟失,錯誤,損壞都會增加消費者的不滿。所以如果消費者在網購過后擔心送達時間會很長,或者擔心商品暴力打包甚至包裹丟失,那他們的使用意愿就越低。
來華留學生中很大一部分都是來學習漢語的,所以剛剛來華的留學生由于漢語水平不高,使用漢語瀏覽網頁,描述,搜索和查找商品信息等交際的能力不強,他們會傾向于避免瀏覽漢語電商網絡平臺,漢語水平在一定程度上會影響他們使用漢語電商網絡平臺的意愿程度。
綜上所述:本文提出以下假設是以這些因素為研究基礎。
假設1:漢語電子商務平臺使用越便利,留學生的使用意愿越強。
假設2:漢語電子商務平臺的品質越好,留學生的使用意愿越強。
假設3:留學生在使用漢語電商網絡平臺時如果感知到的交易風險越大,使用意愿越低。
假設4:留學生感知到的漢語電商平臺配套服務的物流風險越大,使用意愿越低。
假設5:留學生的漢語水平越高,使用漢語電商網絡平臺的意愿越強。
4問卷設計與實際調查
在研究假設的基礎之上,我們設計了《來華留學生使用漢語電商網絡平臺情況的調查問卷》(問卷見附件),問卷分為兩部分,第一部分是留學生的基本信息,包括國籍、性別、年齡、來華時間、消費水平、漢語水平等;第二部分根據研究假設和相關理論設置18個問題,采用李克特式5度量表法,從1~5分別表示非常不同意、不同意、不確定、同意和非常同意。問卷發放采取現場發放紙質問卷的形式,問卷發放的對象是南京大學海外教育學院和南京師范大學國際文化交流學院的留學生,共發放問卷180份,剔除無效問卷后,有效問卷156份,有效問卷回收率為86.7%。本文采用SPSS19.0對調查數據進行分析處理。
5數據的實證分析
5.1因子分析
通過SPSS19.0分析,KMO的值為0.735,大于0.7,Bartlett的球形度檢驗統計量的近似卡方為738.332,自由度為136,Bartlett球形檢驗的Sig.的取值是0.000,小于0.01,達到顯著水平,總體的相關矩陣之間有共同因子存在,并且所有變量的MSA值都大于0.5,表明數據之間存在一定的相關關系,滿足因子分析的前提條件。通過對數據進行因子分析,排除錯誤的載荷,最后從17個成分項目中抽取出網站便利性、網站品質、感知風險、物流配送和漢語水平5個特征值大于1的因子作為主成分,累計可以解釋62.3%的變異。因子分析通過正交旋轉和主成分分析進行。
5.2信度分析
本研究運用Cronbachs Alpha 值對信度進行了檢驗,通過SPSS19.0分析18個變量,全部樣本的Cronbachs Alpha 值達到0.714,每一項的Cronbachs Alpha 值都達到0.65以上,說明本次調查問卷的數據信度較高,各個問卷的信度基本上可以接受。
5.3相關分析
5.3.1Pearson相關分析
本研究采用相關分析分析網購便利性,電商平臺品質、交易風險、物流服務和漢語水平與網購意愿之間的相關關系,與本研究的研究假設進行初步的檢驗。根據下表的相關分析可以看出,在0.01的水平下,網購的便利性、電商平臺的品質、漢語能力的相關系數分別為0.317、0.290、0.250均為正數且大于0.05,顯著性P值小于要求,具有顯著性。說明網購便利性、電商平臺的品質、漢語能力這三個因子和使用意愿之間有顯著的正相關性,但是物流風險和交易風險這兩個因子的相關系數為負,所以兩者與消費者的使用意愿呈微弱負相關,并且顯著性P值大于0.05,不具有顯著性。詳見表1。
5.3.2偏相關分析
根據偏相關分析的結果,在控制其他四個因子的偏相關分析中,我們可以看到,網購便利性、電商平臺的品質、漢語水平這三個因子的相關系數為0.349、0.322、0.281,滿足顯著性差異。物流服務的相關系數為-0.179,在偏相關分析下,物流配送服務顯著性P值小于0.05,滿足顯著性差異,因此我們可以認為,擔憂物流配送服務質量會對使用意愿有顯著的負面影響,但是因子“交易風險”與使用意愿之間始終是微弱的負相關關系,并且不具備顯著性。
5.4回歸分析
用于對相關分析的結果進行驗證,說明自變量和因變量之間的關系,寫出回歸方程。把網購便利性、電商平臺品質、物流風險和漢語水平作為自變量,把使用意愿作為因變量,通過SPSS19.0做多元回歸分析,得到回歸分析結果。
結果顯示,自變量(網購便利性、電商平臺品質、物流服務和漢語水平)分別在0.000、0.000、0.027、0.000顯著性水平下,對應的回歸系數分別是0.307、0.281、-0.150、0.242,交易風險的顯著性不明顯,這也就是說,交易風險與使用意愿的相關性是不顯著的。驗證數據詳見表2、表3和表4。
由此可知,除了物流風險負向影響使用意愿以外,其他因素對使用意愿產生顯著的正向影響。根據回歸分析結果,可以建立消費者移動電子商務使用意愿影響因素的多元線性回歸方程:
使用意愿=3.526+0.307(網購便利性)+0.281(電商平臺品質)-0.150(物流風險)+0.242(漢語能力)
5.5假設檢驗結果
根據以上的數據分析,可以得到表5的結果。
6結論
根據研究假設的結論部分,我們從電子商務的平臺開發運營與電子商務平臺配套服務給出了建議,希望可以促進電子商務的更好發展以及留學生在華生活更加便利和豐富。
研究結果顯示,漢語電子商務平臺使用的便利性,平臺的品質都與留學生使用漢語電商網絡平臺的意愿呈顯著的正相關。即留學生認為電商平臺的便利性和品質是影響他們是否選擇網購這一消費方式非常重要的因素。留學生初來中國,面對異質文化符號和生活環境的沖擊,必定需要時間來適應和自我調節,在這個過程中也需要外界為其提供一個友好便利的環境。網絡電商的開發者和運營者需要考慮留學生對電商平臺的心理需求,在網站導航、購買程序等方面提供更加詳細的指導,要對網站提供的商品和服務的質量嚴格把關,保持良好的信譽,對于產品描述、產品分類做到更加完善,更加細致。在宣傳和營銷策略中,電商平臺要把留學生的需求納入其中,增強他們的認同感和適應力。
在物流方面,留學生非常注重商品的完好性和及時性,對于物流過程中的風險表現出明顯的厭惡。快遞公司在商品郵寄和派送時要避免暴力打包和商品無故丟失的現象,要保持物流追蹤信息的對稱和準確。
除此之外,留學生的漢語水平和能力與他們使用漢語電商網絡平臺的意愿顯著正相關,這也說明,留學生可能因為不能讀懂電商平臺界面的內容從而拒絕使用,而是選擇更為直接、更加簡單易懂的實體店購物,所以以留學生為消費主體的電子商務在開發和運營中,在話語體系的選擇和建立中需要考慮留學生的漢語水平,避免使用難度等級較高的詞匯和用法,以保證雙方順暢的交流。也可以考慮開發幫助留學生漢語學習的購物平臺,在購物的同時學習漢語,具備實用性和趣味性,留學生必定非常感興趣購買意愿會大大提升。在電商平臺的宣傳當中也要考慮到留學生的漢語水平、文化習慣和信息接收渠道,做到簡明、包容和多樣。
參考文獻:
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[2]梁正模.中國網絡購物消費者滿意度影響因素研究――以中國國內生活的外國留學生為例[D].杭州:浙江大學,2013.
[3]張慧玲.在華留學生網上購物意向因素的實證研究――以廈門大學留學生為研究對象[D].廈門:廈門大學,2013.
[4]Ahasanul Haque,Ali Khatibi.Factors Determinate Customer Shopping Behavior Through Internet: the Malaysian Case[J].Australian Journal of Basic and Applied Sciences,2009,3(4):3452-3463.
[5]Delafrooz Narges,Paim Laily H.,Khatibi Ali.Students Online Shopping Behaviors An Empirical Study[J].Journal of American Science,2009,5(8):40-49.
[6]Feng Rulian.How Life Transition has Affected the Consumer Behavior of Chinese International Students in the UK:A General Perspective[M].Nottingham:University of Nottingham,2008.
因工作需要,商調貴處___(檔案號:___)等___名同志到我公司工作,如蒙應允,請將其人事檔案轉遞至我部,待研究后函告。
多謝合作
___公司人事部(公章)
年 月 日
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________:
因工作需要,商調貴處___(檔案號:___)等___名同志到我公司工作,如蒙應允,請將其人事檔案轉遞至我部,待研究后函告。
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___________:
___________同學已被(在)我院___________專業錄取(就讀),根據我院《學生檔案管理辦法》,請貴處將該同學的檔案轉至我院招生就業處。
xxx師范學院招生就業處
年 月 日
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________大學:
您單位___________同學報考我校____年碩士研究生,現已擬錄取,請將該生人事檔案于__月__日前(開學前),寄至:___________大學___________學院學生工作辦公室(郵編___________)。以便我們審查,審查合格檔案不再退回;如按期檔案未到,不予錄取,后果自負。
多謝合作!
___________大學___________學院
______年__月__日
調檔函大概流程
一般程序是這樣的:
1.各系上報錄取名單,最后由錄取學校招生辦先發出調檔函,發往你在報名時所填寫的檔案所在地上面的地址,若你寫的是個人,那就是個人收到后自行辦理,然后寄回錄取學校;
2.如果是寫某單位人事處收,那就直接發到人事處,你再去人事處協助調檔,按照人事處對你提的要求補全各種手續。
3.若你的檔案寄存在某人才交流中心,那你也得去那自行辦理或協助辦理。
4.檔案調回后,學校就會根據原單位的各種材料進行政審,一般不會有問題。最后發出通知書。
二、關于縣內農村學校之間教師調動問題。教師在縣內農村學校之間調動執行服務期并堅持順向流動的原則。近年分配上崗的教師按照簽約規定,服務期滿3年后方可申請調動;鼓勵教師向缺編學校、邊遠學校流動;對要求調入超編學校的,原則上不予考慮。
三、關于農村教師進城問題。為調動優秀教師工作積極性,教師進城繼續實行“逢進必考”的原則,并加強對進城教師教學成績和師德水平的考核??h局將按照城區中小學學科教師缺編情況,擬定進人計劃和條件,經縣編委批準后,實行公開選聘(具體辦法另行公布)。
四、關于外市縣(區)教師調入問題。對外地教師調入我縣遵照照顧實際困難、骨干教師優先的原則。因夫妻分居或父母年事已高、身邊無子女需要照顧要求調入我縣農村學校的,按規定程序進行聯系、報批;對縣以上學科帶頭人、骨干教師、緊缺學科教師要求調入我縣農村學校的,優先予以考慮。
五、調動工作程序
1、教師調出我縣,由個人提出申請、填寫《申請調動報告表》并提交相關材料,經所在學校、中心校和縣教育局、人事局同意后,向擬調入單位發出商調函,待接收方明確接收意見后,由縣教育局和人事局辦理相關手續。
2、農村中心校之間調動,由個人提出申請并填寫《申請調動報告表》,經所在學校、中心校和擬調入中心校簽署意見后報縣教育局,縣教育局根據各中心校編制和申請調動理由等情況研定。
3、農村完職中之間調動,由個人提出申請并填寫《申請調動報告表》,經所在學校和擬調入學校簽署意見后報縣教育局,縣教育局根據各校學科配套和編制余缺情況,結合申請調動理由研定。
4、初中教師調入農村完職中,必須具有本科及以上學歷且為緊缺學科,經由個人提出申請并填寫《申請調動報告表》同時提交本科以上畢業證書,所在學校、中心校和擬調入學校簽署意見后報縣教育局,縣教育局根據完職中編制和學科配套情況,研究初步意見,試用一年,考核合格后辦理正式調入手續。
5、外地教師調入我縣,由調出方教育和人事部門發出商調函,經接收學校(農村學校)、縣教育局研定同意后,報縣編委審批,縣人事局發出調檔函,并辦理相關調入手續。
六、調動辦理時間
為維護學校正常教育教學秩序,教師調動堅持一年一辦,于暑假期間集中辦理。辦理時,以調出學校(完職中或中心校)為單位,填寫《申請調動人員登記表》并連同申請調動人員的《申請調動報告表》,于20*年6月15日前集中上報縣教育局人事股,縣教育局研定后于秋季開學前對批準調動的教師開出調動介紹信。
七、幾點要求
1、教師調動應立足于照顧有困難教師和均衡配置教師資源,促進教育教學質量提高。各中小學校要從學校教學工作實際需要出發,考慮接收或放行。
2、人事調動直接涉及教師切身利益,關系到學校穩定,各校要加強宣傳教育,認真做好教師的思想工作,穩定農村學校教師隊伍。
關鍵詞:地黃飲子;腦脊液;PC12細胞;細胞凋亡
中圖分類號:R285.5 文獻標識碼:A 文章編號:1673-7717(2007)09-1770-04
1 材 料
1.1 細胞及動物PC12細胞購自中科院上海生物細胞研究所。大耳白家兔,由黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供。
1.2 藥物組成:地黃飲子由熟地、山萸肉、肉蓯蓉、石斛、麥冬、五味子、石菖蒲、遠志、茯苓、肉桂、炮附子、巴戟天、薄荷等組成。(由哈爾濱市松茂藥行提供)
1.3 主要藥品及試劑:Aβ25-35(sigma),DMEM培養基、胰蛋白酶(Hyclone),5%胎牛血清(杭州四季青生物制品有限公司),VitE(大連南美制藥有限公司),引物、DNAmarcker(大連寶生物),中藥飲片由黑龍江中醫藥大學提供。
1.4 主要實驗儀器:穩壓穩流電泳儀:DYY-8,上海琪特分析儀器有限公司。紫外凝膠成像系統:Labworks 4.5UVP Ltd. Cambridge,UK。PCR擴增儀:Apllied Biosysems2700 PE,Singatpore。
2 方 法
2.1 PC12細胞的培養方法,PC12細胞培養于含10%胎牛血清(56℃滅活30 min)DMEM的培養液中,并加入100U/mL鏈霉素,100U/mL青霉素。細胞接種于培養瓶中,在37℃,5%CO2/95%空氣,飽和濕度的培養箱中培養。2天換液1次,三四天傳代1次,取對數生長期細胞用于實驗。
2.2 中藥腦脊液的提取方法:2kg重大耳白家兔,適應性喂養3天,灌胃給服地黃飲子水煎劑、VitE(0.21g/mL,吐溫80助溶于蒸餾水中)水溶液,灌服藥量均按成人量10倍給藥,空白組給服等體積的蒸餾水。灌胃后1h,戊巴比妥鈉靜脈麻醉,于無菌條件下在枕骨大孔處垂直進針,抽取200μL腦脊液,并補充等量等生理鹽水,以上步驟連續3天,把3天獲得的同一家兔的腦脊液混合,-70℃凍存備用。
2.3 實驗分組及AD細胞模型的建立,離體培養進入對數生長期的PC12細胞分為6組:空白對照組(簡稱空白組)、模型對照組(簡稱模型組)、VitE組(簡稱西對組)、地黃飲子低劑量組(簡稱中低組)、地黃飲子中劑量組(簡稱中中組)、地黃飲子高劑量組(簡稱中高組)。待24h細胞貼壁后吸去培養液,分別加入空白培養液10%、正常腦脊液10%、VitE腦脊液10%、中藥腦脊液低劑量5%、中劑量10%、高劑量20%。加培養液補至等量,37℃孵育2h。然后除空白組之外的各組加入經老化處理的AB25-35(終濃度為101μmol/L),建立AD細胞模型。空白組加入等量的培養液,繼續孵育24h后將細胞吹打至懸浮狀,離心收集細胞,提取總RNA。
2.4 RT-PCR檢測bax bel-2和caspase-3基因的表達
采用Trizol提取RNA。逆轉錄體系參照RT-PCR二步法(Advantage?RT-for-PCR Kit,Clontech)。引物設計由美國NCBl數據庫提供RNA全序列,用primer3引物設計軟件設計。
Rat bax:left primer:5`GGCGATGAACTGGACAAC 3`,right primer:5`CCGAAGTAGGAAAGGAGGC 3`(產物為299bp);
Rat Bcl-2 left primer: 5`GGCATCTTCTCCTTCCAG3`,right primer:5`CATCCCAGCCTCCGTTAT 3`(產物為442bp);
Rat Caspase-3:left primer:5`CTGGACTGCGGTATTGAG 3`,right primer:5`GGAACATCGGATTTGATT 3`(產物為489bp);
β-actm:left pnmer:5`TGTGATGGTGGGTATGGG 3`,right pnmer:5`TAGAAGCATITGCGGTGC 3`(產物為500bp)。
聚合酶鏈式反應(PCR)條件:cDNA 2.0μL,dNTP 2.0μL,10×RT buffer2.5μL,上下游引物(20μmol/L)各0.5μL,Taq酶0.25μL,加去離子水至25μL。反應參數:95℃2min;94℃1min,55℃45S,72℃45S,25個循環;74℃延伸10 min。β-aetin的反應參數為95℃5min;94℃1 min,55℃1min,74℃min,25個循環;74℃延伸10min。PCR產物用1.5%瓊脂糖凝膠電泳下分離檢測。凝膠成像分析系統進行拍照和分析擴增產物電泳強度,以上實驗重復3次。
3 結 果
(1)地黃飲子含藥腦脊液對PC12細胞bax基因表達的調控作用。
(2)地黃飲子含藥腦脊液對PC12細胞bcl-2基因表達的調控作用。
(3)地黃飲子含藥腦脊液對PC12細胞csapase-3基因表達的調控作用。
4 討 論
老年性癡呆(簡稱AD)是發生于老年期和老年前期的一種以進行性癡呆為特征的腦慢性退行性疾病,臨床主要變現為記憶力減退、智能障礙及行為情緒等的異常改變。其發生機制的細胞凋亡學說研究中,細胞培養,動物模型以及患者的尸均證實了AD病機中的細胞凋亡。自由基.基因突變,鈣穩態失衡尤其是Aβ的神經毒性都可能觸發神經細胞的調亡。
PC12細胞(Pheochromocytoma cells)為大鼠腎上腺髓質嗜鉻細胞瘤克隆化的細胞株,系神經峭源性。具有較典型的神經內分泌細胞特性,而且易培養,可傳代。已廣泛用
作神經細胞體外模型。用于研究神經細胞分化發育、離子通道、受體、遞質及神經藥理、毒理及多種神經系統疾病如AD、帕金森病(PD)等。因而用Aβ25-35誘導的PC12細胞是一個比較理想的AD模型。
細胞凋亡(apoptosis)又謂細胞程序化死亡(programmedcell death,PCD),是一種參與了生物體許多過程的細胞去除機制,是由基因編程調控的細胞主動自殺過程。細胞凋亡的過程非常復雜,與此有關的兩大家族即bcl-2、caspase,對細胞凋亡的調控起著舉足輕重的作用。細胞增殖可以啟動PCD,在一定條件下,bax能加速細胞周期進程。
bcl-2家族是編碼同源蛋白的一個大基因家族,決定著細胞是否進入凋亡通路。bcl-2造成的生長抑制與阻礙轉錄因子NFZF(Nucleaar Factor Assocciate Transcription)激活相關。bcl-2基因的作用是促進細胞的生存。它可抑制細胞的凋亡,是一個公認的凋亡抑制基因。bcl-2表達于多種組織內,包括神經系統。在神經發生完成后及AD變性的神經元內,其表達明顯減少。bcl-2的基因產物能阻止凋亡,促進神經元存活。bcl-2(包括bcl-2、bax和bh3三個亞族)與ICE存在某種聯系,當bcl-2活化時,可直接或間接地抑制IGE功能,此時細胞存活;當bcl-2失活時,他對ICE的抑制功能被解除,使IGE活化,細胞進入凋亡過程,IGE在哺乳動物細胞凋亡中作為一個新的凋亡因子起著很重要的作用。bcl-2的基因產物能阻止凋亡,促進神經元存活,在變性神經元中,bcl-2表達明顯減少。
box是bcl-2家族與bcl-2功能相反的一個基因,bax的基因產物能加速細胞凋亡。bcl-2與bax組成一個平衡體系,bax過度表達細胞凋亡加速,而bcl-2過度表達則細胞凋亡被抑制。bcl-2/bax的比值的降低使線粒體外膜形成離子通道,促進細胞色素C釋放,細胞色素C能活化。bcl-2/bax的值決定細胞凋亡是否發生。Paradis等(1996)的研究表明,bd-2在AD腦中呈高表達,通過抗氧化作用對細胞起保護作用。由此可見,bcl-2家族決定著細胞是否進入凋亡通路。此外,bcl-2除能抑制神經細胞的凋亡,還能抑制自由基的產生,抑制自由基引起的腦衰老作用。Wiedau Pazos等發現表達hcl-2的GTl~7神經細胞系羥基自由基的含量明顯較對照組低,但bcl-2抑制自由基產生的機制不清楚。