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得到駁殼槍后,豬娃可沒少下工夫,經(jīng)常去龍王寺中悄悄練槍,雖然還無法百發(fā)百中,但眼急手快開槍殺人還是做得相當(dāng)?shù)轿?。你知道有哪些百發(fā)百中的可以知道摘抄的好句子呢?這里給大家分享一些關(guān)于百發(fā)百中的造句，供大家參考。
一、百發(fā)百中含義百：形容多;發(fā)：發(fā)射，也指射箭;中：正對上，恰恰合上。形容射箭或射擊非常準(zhǔn)，每次都命中目標(biāo)。也比喻做事有充分把握，辦事成功，決不落空。
二、百發(fā)百中典故蘇厲是戰(zhàn)國時期從事政治外交活動的謀士。有一次，他聽說秦國大將白起將要帶兵攻打魏國都城大梁，而大梁一旦被秦占領(lǐng)，附近的西周王室就有危險(xiǎn)。于是，蘇厲對周王說：“白起這幾年打敗過韓、趙等國，奪取了許多土地。現(xiàn)在他將要帶兵攻打大梁，大梁一旦被白起攻下，周王室就危險(xiǎn)了!您應(yīng)當(dāng)想辦法阻止白起出兵?！庇谑侵芡跖商K厲前往秦國。
蘇厲對白起說：“從前，楚國有一個人名叫養(yǎng)由基，是一個射箭能手，他距離柳樹一百步放箭射擊，每箭都射中柳葉的中心，百發(fā)百中，左右看的人都說射得很好，可是一個過路的人卻說：“這個人，可以教他該怎樣射了?！别B(yǎng)由基聽了這話，心里很不舒服，就說：“大家都說我射得好，你竟說可以教我射了，你為什么不來替我射那柳葉呢!”那個人說：“我不能教你伸直左臂持弓，彎曲右臂引弓持箭，不過你有沒有想過，你射柳葉百發(fā)百中，但是卻不善于調(diào)養(yǎng)氣息，等一會疲倦了，一箭射不中，就會前功盡棄。”
講完這段故事，蘇厲把話題拉回來說：“你已經(jīng)打敗了韓、趙等國，取得了許多土地，功勞很大?，F(xiàn)在，又要派你帶兵出關(guān)，經(jīng)過西周王室的所在地去進(jìn)攻大梁，如果這一仗不能取勝，就會前功盡棄。你不如說自己生病，不要出兵為好?！卑灼鹇犃?，笑著說：“我所向披靡， 百戰(zhàn)百勝，怎么會不能取勝呢?”于是，他沒有被蘇厲說動，率兵攻打魏國，果然又大獲全勝，奪取了魏國的幾十座城池。
三、百發(fā)百中造句1.林強(qiáng)是校籃球隊(duì)隊(duì)長，他投籃幾乎是百發(fā)百中。
2.連長刻苦訓(xùn)練,練就了百發(fā)百中的好槍法。
3.他是我軍有名的神,在戰(zhàn)場百發(fā)百中,彈無虛發(fā)。
4.她手持雙槍，左右開弓，百發(fā)百中，人稱神。
5.喝蜂蜜浸泡蘿卜的汁來治咳嗽，聽說有百發(fā)百中的效果。
6.上帝，愿我們百發(fā)百中防守緊密無縫。
7.他偷偷學(xué)習(xí)射箭，終于練成了百發(fā)百中的神箭手。
8.在奧運(yùn)會的射箭比賽中，一位中國選手百發(fā)百中，成績遙遙領(lǐng)先。
9.古時候魏國有個著名的射手叫更羸，他射箭百發(fā)百中，大家都管他叫"神箭手"。
10.如果把射箭練到熟能生巧的程度，那你射箭準(zhǔn)是百發(fā)百中。
11.我參加了射箭比賽，我聚精會神地瞄準(zhǔn)箭靶，結(jié)果百發(fā)百中。
12.包你百用百靈，百發(fā)百中。
13.我急了，拿出小時候的本領(lǐng)，用石頭打小五弟，我還是百發(fā)百中，打的他上竄下跳的。
14.他屢獲射擊金牌，是個百發(fā)百中的神。
15.他料事如神，經(jīng)常是百發(fā)百中。
16.鼠標(biāo)操作，光頭警官，可是百發(fā)百中的神，現(xiàn)在由你來冒充他，看你夠格嗎?
17.只見他反身跳投，又進(jìn)了，真是百發(fā)百中!
18.他能有百發(fā)百中的功夫，是靠他每天練投一千次籃得來的。
19.他是個百發(fā)百中的神。
20.喬丹投籃百發(fā)百中，真令人叫絕。
21.百發(fā)百中：他打靶百發(fā)百中，贏得了大家的喝彩。
22.要想在奧運(yùn)拿射箭金牌，非得練成百發(fā)百中的功夫不可。
23.當(dāng)兩位情場高手遇上，要一決高下，之前本是百發(fā)百中的追女捕男本領(lǐng)，現(xiàn)在都未必夠用，究竟民俊與之愿，誰能首先戰(zhàn)勝心魔，成為情場至尊?
24.他射箭百發(fā)百中!每一次開槍都打中了匪徒。
25.軍師妙計(jì)向來百發(fā)百中，不必懷疑。
26.看這些高手射飛鏢，幾乎都是百發(fā)百中，真令人佩服。
27.我射箭百發(fā)百中，經(jīng)常一箭雙雕。
28.他的射箭技術(shù)一流，百發(fā)百中。
29.他打槍百發(fā)百中,這說明他很行.
30.屢試屢驗(yàn),百發(fā)百中,愿以此法,共諸同人。
31.二龍劍——廣寒仙子:二龍纏繞,投擲攻擊,百發(fā)百中。
32.青蛙不光吃蚊子、蒼蠅和水里的孑孓，還大量捕食蛾子、稻飛虱等農(nóng)業(yè)害蟲。
只要一遇見害蟲，青蛙的舌頭就迅速翻射出口外，粘住小蟲，卷入口中，常常是百發(fā)百中，它是有名的捉蟲能手。
33.在此次專訪中，杰克師兄除了侃侃而談自己對靈修的認(rèn)識與體悟之外，并與大家分享箭無虛發(fā)百發(fā)百中的秘訣。
34.他一只手背在后面都能把任何人打倒。
他要是拿起那把紫杉木弓，一英里半開外就能射中一角錢的分幣，百發(fā)百中。
35.沒過幾天小朋友們就都嘗到了滋味兒，他們還是打完我就跑，可我用石頭想砸他們哪就砸哪，因?yàn)樗麄兣艿臅r候有聲音，只要能聽到聲音，我就能百發(fā)百中。
36.我不能把實(shí)情告訴姥姥，我想她肯定不會答應(yīng)我這么做。
真是功夫不負(fù)有心人，我終于練就了百發(fā)百中。
2、將線一頭長一頭短的對折
3、用針的針眼這頭插入對折的圈里拉緊。
4、拉緊的針和線保持住放在兩個手指頭中間捏緊，手指頭不要松開抽出針。
5、小小的張開兩個捏緊的手指頭看一下線在什么位置，將針眼對著線，手指頭再捏緊，把針穿下去。
6、張開手指頭，拉著穿出來的一頭把線短的那頭完全拉出就好了。
1、白芨的種植，南方地區(qū)可以在收獲種子后進(jìn)行，北方地區(qū)要等到來年溫度回升后進(jìn)行。
2、種植要提前進(jìn)行整地，除草、翻整、開溝、除蟲、施肥。
3、在種植后需要加強(qiáng)管理，確保種子萌發(fā)，日常養(yǎng)護(hù)的時候要保證光照，并控制好環(huán)境溫度，肥水適宜。
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中學(xué)生美白牙齒的方法
1、酵母美白牙齒
有些美眉會通過醫(yī)學(xué)美容的手法來達(dá)到美白牙齒的目的，但是，通過醫(yī)學(xué)美容手法來美白牙齒并非是所有的美眉都能夠接受的，還是從日常的生活中來尋找合適的方法吧!酵母是我們生活中非常常見的一種食物，通常我們要吃面食都會用到它，酵母中含有蛋白質(zhì)，且有分解的作用，美眉們可以在刷牙的時候，在牙刷上擠上牙膏之后，再沾一點(diǎn)酵母粉，再進(jìn)行刷牙，這樣長期檢查，會有令牙齒變白的效果。
2、小蘇打美白牙齒
用小蘇打來美白牙齒是美眉們常用的一種方法，在牙刷上沾上一點(diǎn)小蘇打，然后再正常的進(jìn)行刷牙，堅(jiān)持使用，會讓牙齒變得潔白光亮。為什么很多美眉說用小蘇打刷牙來美白牙齒并沒有理想中的效果呢，那就因?yàn)槟銢]有堅(jiān)持，想要令牙齒由黃變白，不是一朝一夕的，需要長期堅(jiān)持哦!
3、食醋美白牙齒
食醋也可以幫助美眉們來美白牙齒，如何使用呢?首先在刷牙之前做好準(zhǔn)備，先用食醋來漱漱口，讓食醋在牙齒的部位停留一兩分鐘的時間，然后將食醋吐出來，再繼續(xù)刷牙，你便會發(fā)現(xiàn)堅(jiān)持一段時間，牙齒自然就變白了。雖然食醋漱口之后，再來刷牙能夠有效美白牙齒，但是此方法不宜長時間使用，否則牙齦會感覺非常不舒服，偶爾試一次還是不錯的哦!
4、花生米美白牙齒
還有一種方法可以美白牙齒，那就是利用花生米，美眉們可以拿四五?；ㄉ瑢⒒ㄉ囁槌伤槟睿旌先肷倭康氖雏}，然后充當(dāng)牙膏來刷牙，過不了多長時間，你便會發(fā)現(xiàn)你對大黃牙變得潔白了哦!有些美眉也會試著用花生米攪碎在嘴巴里，然后立刻刷牙，為什么這樣的方式不能夠充分起到美白牙齒的效果呢?原因在于花生并沒有完全地?cái)囁椋瑧?yīng)該把花生攪碎成末狀，讓花生中的美白成分充分接觸牙齒，這樣使用起來，美白牙齒的效果會更加明顯哦!同時，配合少量的食鹽，可以有效幫助牙齒的牙縫中消炎殺菌，令牙齒更加健康。
有助于中學(xué)生美白牙齒的蔬菜水果
1、草莓。堅(jiān)固牙齒,并且其中還含有漂白和清潔牙齒的成分,對于除掉牙齒表面的茶垢和咖啡污垢十分有用。因此,飯后不要忘了吃些草莓?；ú?。它可以作為“磨砂膏”,美白牙齒。同時,花菜可以刺激唾液的產(chǎn)生,有助于阻止牙斑的形成。
2、兩杯西瓜汁可以補(bǔ)充人體每天所需維生素C的25%。維生素C對于牙齒和牙齦健康非常關(guān)鍵,它有助于鐵元素的吸收,還具有抗氧化功效,防止“自由基”分子氧化導(dǎo)致的牙齒老化。而且維c也是美白的一個要點(diǎn)3、橙子中的維生素C同樣會促進(jìn)牙齒和牙齦健康,其中的纖維還可以使牙斑脫落。
4、嚼蘋果可以刺激口腔分泌唾液,清理和堅(jiān)固牙齒,還可以減少身體對糖的吸收。
5、深色蔬菜,暗綠色葉子的蔬菜富含胡蘿卜素,它可以轉(zhuǎn)化成維生素A,有助于保持牙床堅(jiān)固。
6、奶制品,酸奶中的蛋白質(zhì)可以附著在牙齒上,從而保護(hù)其免受有害酸性物質(zhì)的侵襲,增強(qiáng)牙齒健康。另外,咀嚼較硬的干酪可以促進(jìn)唾液產(chǎn)生,從而去除食物殘?jiān)?/p>
7、水可以減少口腔中的污垢,讓人免受牙齒腐蝕的痛苦,使得牙齒長期堅(jiān)固。平時要做到,飯間抿少量的水,飯后漱口。
8、葡萄中的清潔酶——蘋果酸,會使牙齒亮白。
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長命百歲 十種養(yǎng)生大法
上海中醫(yī)藥大學(xué)教授 李其忠
隨著人們自我保健意識的不斷加強(qiáng)，養(yǎng)生已成為當(dāng)下最熱門的話題。什么是養(yǎng)生？如何養(yǎng)生，才能長命百歲呢？所謂養(yǎng)生，是指根據(jù)人體生命規(guī)律所進(jìn)行的一切物質(zhì)上的或精神上的心身護(hù)養(yǎng)活動。由此而言，養(yǎng)生實(shí)際上是一種健康理念，甚至是一種生活方式。養(yǎng)生之道，無處不在。下面，推薦10種養(yǎng)生大法，希望大家能夠科學(xué)養(yǎng)生，長命百歲。
一法 養(yǎng)性調(diào)神 可得天年
養(yǎng)生首先要養(yǎng)神，通過主動的修德、調(diào)志、節(jié)欲等多種途徑，保全精神健康，達(dá)到形神共養(yǎng)。①修德以怡神。注重修德之人，行事光明磊落，性格豁達(dá)開朗，如此則情志怡然安寧，氣血和調(diào)，臟腑功能平穩(wěn)，形與神俱，可得天年。②調(diào)志以攝神。通過主動地控制和調(diào)節(jié)情志活動，可以達(dá)到寧心攝神、健康長壽的目的。③節(jié)欲以安神。人生在世，孰能無欲。但人之欲望，永無滿足。要想清心寡欲、靜養(yǎng)心神，就應(yīng)自覺地、盡力地做到薄名利、禁聲色、廉貨財(cái)、損滋味、除妄想、去妒忌。養(yǎng)生保健必須保持樂觀的處世態(tài)度和豁達(dá)的心理狀態(tài)。
二法 心態(tài)年輕 老而不衰
經(jīng)驗(yàn)告訴我們，一個人的生命活力不僅要看生理年齡，更要看心理年齡。觀察周圍，不難看到，有些人年齡不大，卻心態(tài)消沉，由此而損及健康；有些人年齡雖大，卻心態(tài)年輕，由此而有助健康。因此，中老年人要保持年輕心態(tài)，平時要注重精神享受。交誼舞會、茶室聊天、逛街購物、老年大學(xué)、老年KTV等，中老年人都可以根據(jù)自身喜好不時而為。當(dāng)然，如果經(jīng)濟(jì)條件允許，也可以經(jīng)常外出游玩，既得到身體上的鍛煉，又得到心理上的愉悅。若能長期堅(jiān)持，永不服老的心態(tài)極有利于身心健康。
三法 勤用腦 防衰老
現(xiàn)今社會，生活節(jié)奏快，工作壓力大，很多人容易出現(xiàn)記憶力衰退，失眠多夢，理解能力差等表現(xiàn)。在中老年人則多表現(xiàn)為近期記憶力減退，本來很熟悉的人名、路名、電話號碼等往往一時想不起來，這些都是大腦衰老的表現(xiàn)。如何延緩和改善大腦功能？目前認(rèn)為，積極用腦，維持必要的學(xué)習(xí)、交流、參與力所能及的公眾活動，是延緩腦衰老的好方法。平時，中老年人要勤用腦，勤思考，看一些有趣的腦筋急轉(zhuǎn)彎，猜一些小謎語，或者玩一些益智腦力小游戲，不排除作為娛樂活動的打牌、麻將等，不僅可以增添生活樂趣，還能有效防止大腦“生銹”。
四法 午時小憩 子時入眠
人之一生，三分之一的時間在睡眠中度過，這既是生理的需要，也是健康的保證、養(yǎng)生的途徑。子時，是指晚上11時至次日1時；午時，是指上午11時至下午1時。子午之時均為陰陽之氣交換之際，睡好子午覺具有重要的養(yǎng)生意義。午時小憩，對上班族而言，有助于消除上午工作的疲勞，也為下午高效工作積蓄精力。老年人午睡時間不宜過長，以半小時至一小時為宜。子時入眠，晚上11點(diǎn)至早晨6點(diǎn)為睡眠黃金時間，容易進(jìn)入深睡眠狀態(tài)。有些年輕人平時睡得很晚，有的甚至出現(xiàn)“晚睡強(qiáng)迫癥”，長此以往，必然會影響身心健康。
五法 吃好早餐 節(jié)制晚餐
一日三餐，合理安排，是飲食養(yǎng)生的重要內(nèi)容。現(xiàn)代研究認(rèn)為，科學(xué)合理的膳食方式應(yīng)是吃好早餐，滿足午餐，節(jié)制晚餐，并強(qiáng)調(diào)三餐之中，早餐最重要。早餐不僅要吃飽，而且要吃好。早餐食品既要有豐富的蛋白質(zhì)，又要有足夠的碳水化合物。若有條件，早餐要有菜、有飯、有牛奶（或豆?jié){）。午餐要吃飽，品種要豐富。晚餐則以少而精為善，不宜過多攝入蛋白質(zhì)和脂肪，以免肥胖，影響健康。研究證實(shí)，城市高血脂癥患者比例大幅度上升，與晚餐吃得過飽、過好有關(guān)。此外，不可嗜食油炸類、燒烤類等“垃圾”食品。
六法 清淡為主 葷素搭配
飲食搭配的總原則應(yīng)該是葷素搭配，粗細(xì)混吃，菜譜寬廣，營養(yǎng)全面。膳食有辛、甘、酸、苦、咸之異。中醫(yī)養(yǎng)生理論認(rèn)為，“謹(jǐn)和五味”是益壽延年的基本飲食原則。所謂“謹(jǐn)和五味”即是依據(jù)人體生理需要，合理調(diào)配，適度攝取膳食營養(yǎng)，以滋養(yǎng)人體臟腑氣血?，F(xiàn)代研究認(rèn)為，許多疾病的產(chǎn)生與不良的飲食習(xí)慣有關(guān)。偏嗜甜食，易致糖尿病、肥胖癥等；偏嗜咸味，易致高血壓、動脈硬化，或加劇水腫等；偏嗜辛辣，易致便秘、痔瘡，加劇潰瘍病等；偏嗜酸味，對于平素胃酸偏多、胃脘嘈雜吞酸的人，尤為不宜。對于陽氣不足、脾胃虛弱的人來說，更不可偏嗜苦味，因?yàn)榭辔抖嗪嗪讉枤狻?/p>
七法 動靜結(jié)合 以靜為主
動者屬陽，靜者屬陰，動靜相宜，陰陽協(xié)調(diào)，是生命變化的內(nèi)在依據(jù)。中醫(yī)學(xué)基于對動靜的哲學(xué)認(rèn)識，賦予其在生命科學(xué)中的具體內(nèi)涵。動以靜為前提，動以靜為基礎(chǔ)。運(yùn)動容易，寧靜尤難。若肢體運(yùn)動，心中躁動，不如不動。任何體育運(yùn)動、養(yǎng)生功法都需要調(diào)節(jié)呼吸，排除雜念，意守一處，最終達(dá)到寧靜狀態(tài)，這是所有養(yǎng)生功法的基本要求和最高境界。就運(yùn)動強(qiáng)度而言，運(yùn)動后，最高脈率每分鐘應(yīng)該不超過220次減去年齡。體弱者及老年人，不適于劇烈運(yùn)動者，建議運(yùn)動后最高脈率控制在每分鐘190次減去年齡以內(nèi)?？芍^動靜結(jié)合，以靜為主。
八法 戒煙無早晚 飲酒莫過量
吸煙的危害眾所周知，故戒煙無早晚，能戒則戒。一時尚未戒煙者，抽煙時最好將后三分之一的香煙掐掉，因?yàn)樵酵蟪?，焦油含量越高，對身體損害越大。此外，酒為百藥之王，不少中藥需用酒來炮制，有些處方煎煮時尚須加入適量的酒。適量飲酒，有助于溫通經(jīng)脈，暢行氣血，消除疲勞，促進(jìn)睡眠。平素聚會，酒又是營造氣氛的調(diào)節(jié)劑，不可缺少。但飲酒切忌過量，過量則傷身，過量則亂性，過量則損壽，這是需要大家牢記的。
九法 善于食補(bǔ) 科學(xué)養(yǎng)生
食療、食養(yǎng)，對于科學(xué)養(yǎng)生很重要。各類人群，如兒童、老人、孕婦；各類體質(zhì)，如偏寒性體質(zhì)、偏熱性體質(zhì)；各類病證，如腎病、肝病，飲食調(diào)補(bǔ)各有宜忌。因此，食療、食養(yǎng)時，需根據(jù)食品的調(diào)補(bǔ)作用合理選用。①大蒜、韭菜、雞肝、蝦、海參等，具有一定的補(bǔ)氣溫陽作用；②、枸杞、白蘿卜、龜板、鱉甲等，具有滋陰降火作用；③大麥、酸牛奶、蘋果、西紅柿、白菜等，具有健脾開胃作用；④蜂蜜、核桃仁、香蕉、蘋果及富含粗纖維的蔬菜，具有潤腸通便作用；⑤牛奶、蜂蜜、獼猴桃、燕窩、哈士蟆油等，具有潤膚養(yǎng)顏?zhàn)饔谩?/p>
竹柏種子一周左右會發(fā)芽。竹柏別稱：椰樹、羅漢柴、欏樹、山杉、糖雞子、船家樹、寶芳、鐵甲樹、豬肝樹、大果竹柏，羅漢松科竹柏屬的喬木，高達(dá)20米，葉對生，革質(zhì)，有多數(shù)并列的細(xì)脈，無中脈，種子圓球形，花期3-4月，種子10月成熟。
竹柏為古老的裸子植物，起源距今約1億5500萬年前的中生代白堊紀(jì)，被人們稱為活化石，是中國國家二級保護(hù)植物。中國浙江、福建、江西、湖南、廣東、廣西、四川等地區(qū)均有栽培，也分布于日本。
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基因提取及擴(kuò)增方法
1單個核細(xì)胞（MNC）的分離
在無菌條件下采集骨髓液2mL，EDTA抗凝，用Ficoii淋巴細(xì)胞分離液（相對密度1．077）分離MNC，用1×PBS洗滌2～3次。－80℃凍存?zhèn)溆没蛑苯犹崛NA。
2總RNA的提取
用原平皓（天津）生物技術(shù)有限公司提供的RNApure超純總RNA離心柱式試劑盒提取RNA。經(jīng)紫外線分光光度計(jì)測定RNA純度（A260／A280＞1．6），同時進(jìn)行RNA定量測定。在15g／L瓊脂糖凝膠上電泳可見3條清晰亮帶，說明所提取RNA完整。
3cDNA合成
應(yīng)用M－MVL逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（Fermentas公司）合成cDNA。逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系20mL，包括總RNA1μg，0．5g／L的OLigo（dT）primer1μL，使用DEPC水補(bǔ)充至12μL。快速瞬時離心，置65℃孵育5min，立即置于冰上；然后依次加入55×緩沖液4μL，RNase抑制劑1μL，10mmoL／LdNTPMix2μL，混勻，42℃2min；再加入逆轉(zhuǎn)錄酶（M－MLV）1μL，42℃反應(yīng)30min，70℃下放置10min，冰上5min。
4PCR反應(yīng)
PCR反應(yīng)體系包括逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物4μL，20μmol／L的FAK正、反義鏈引物各1μL，2×PCRMix10μL（其中包括10mmol／L的dNTPs、10×緩沖液、TaqDNA聚合酶），其余以DEPC水補(bǔ)足至20μL。所用引物根據(jù)GenBank提供的FAKmRNA序列，由上海生工公司設(shè)計(jì)合成。
FAK正義鏈為5′－TATTGGACCTGCGAGGGAT－TGG－3′，反義鏈為5′－GAGGCGGTTTCTTTGGT－GGAGC－3′，目的基因長度為255bp。β－actin正義鏈為5′－AAACACCCCAGCCATGTACGT－3′反義鏈為5′－GTGGTGGTGAAGCTGTAGC－3′，目的基因長度為228bp。內(nèi)參照與目的基因分別擴(kuò)增，PCR條件：94℃預(yù)變性2min；94℃變性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，40個循環(huán)；72℃再延伸5min。
5PCR產(chǎn)物分析
取PCR產(chǎn)物10μL與LoadingBuffer2μL混合，在15g／L瓊脂糖凝膠中電泳，80V恒壓電泳25min，EB染色。陽性結(jié)果可見228、255bp處各有一條亮帶，分別為β－actin和FAK。紫外線透射儀觀察并照相，照片經(jīng)Meta－morphImagingSight軟件進(jìn)行分析并讀取吸光度值，取FAK與β－actin曲線下面積的比值作為FAKmRNA的相對含量。
染色體的制備及R顯帶和核型分析
1染色體的制備將白血病病人骨髓細(xì)胞按（1～2）×109／L的密度接種于RPMI1640培養(yǎng)基中，培養(yǎng)24h，加入0．05mg／L秋水酰胺，37℃孵育1h。1000r／min離心10min，棄上清液，加入預(yù)溫至37℃的0．075mol／LKCl溶液8mL，37℃孵育30min進(jìn)行低滲。加入1mL固定液（甲酸∶乙醇＝3∶1）輕輕混勻進(jìn)行預(yù)固定，離心后再進(jìn)行3次固定，將最后一次固定的標(biāo)本以1000r／min離心10min，棄上清液，加入適量固定液配成細(xì)胞懸液，備用。
2染色體R顯帶采用氣干法制片，將制備好的片子晾干，放入R顯帶液中，87．5℃水浴70～80min。取出片子水洗，晾干，再加Giemsa液染色15min，水洗，干后鏡檢。
3染色體核型分析每例病人分析10～20個分裂中期細(xì)胞，觀察有無染色體異常。
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
應(yīng)用SPSS11．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩組率比較用χ2檢驗(yàn)和精確概率檢驗(yàn)；計(jì)量數(shù)據(jù)以x珚±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。
結(jié)果
1FAKmRNA在AL病人骨髓MNC中的表達(dá)
AL病人FAKmRNA陽性表達(dá)率為66．0％，與正常對照組（20．0％）比較差異有顯著意義（χ2＝5．49，P＜0．05）。其中ALL和ANLL病人陽性表達(dá)率分別為71．4％和63．9％，二者差異無顯著意義（P＞0．05），但兩者均高于正常對照組（P＝0．04；χ2＝4．44，P＜0．05）。ALL和ANLL病人FAKmRNA的表達(dá)水平分別為0．75±0．12和0．65±0．17，二者差異無顯著性（P＞0．05），但與正常對照組（0．31±0．15）比較，差異有顯著意義（t＝7．98、5．60，P＜0．05）。部分病人電泳結(jié)果見圖1。
2FAKmRNA在不同時期AL病人的表達(dá)
初診組和復(fù)發(fā)組AL病人白血病細(xì)胞FAKmRNA的陽性表達(dá)率分別為80．0％、85．7％，兩組比較差異無顯著性（P＞0．05），但均高于正常對照組（χ2＝9．38，P＜0．05；P＝0．02）。初診組和復(fù)發(fā)組AL病人白血病細(xì)胞FAKmRNA表達(dá)水平分別為0．72±0．12、0．87±0．15，兩組比較差異無顯著意義（P＞0．05），但均高于正常對照組（t＝8．79、7．58，P＜0．05）。緩解組病人FAKmRNA的陽性表達(dá)率為23．1％，均明顯低于初診組和復(fù)發(fā)組，差異均有顯著意義（χ2＝10．26，P＜0．05；P＝0．02）；與正常對照組比較差異無顯著性（P＞0．05）。緩解組病人FAKmRNA表達(dá)水平為0．27±0．17，明顯低于初診組和復(fù)發(fā)組（t＝4．44、7．82，P＜0．05），與正常對照組比較差異無顯著性（P＞0．05）。
3FAKmRNA的表達(dá)與骨髓細(xì)胞染色體核型的關(guān)系
AL病人骨髓細(xì)胞染色體異常核型的檢出率為64．0％（32／50）。FAKmRNA在異常核型組的陽性表達(dá)率為78．1％，明顯高于異常核型未檢出組的44．4％（χ2＝5．82，P＜0．05）；FAKmRNA在異常核型組的表達(dá)水平為0．75±1．17，明顯高于異常核型未檢出組的0．45±0．11（t＝6．72，P＜0．05）。
討論
FAK是SCHALLER等于1992年發(fā)現(xiàn)的能使Src內(nèi)源性蛋白酪氨酸激酶激活的主要底物，在絲氨酸轉(zhuǎn)化細(xì)胞的磷酸化蛋白中發(fā)現(xiàn)。FAK廣泛分布于成纖維細(xì)胞、血小板、表皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、TC、BC、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和滋養(yǎng)層細(xì)胞等的細(xì)胞質(zhì)中。已知FAK有6個可以被磷酸化的酪氨酸位點(diǎn)，F(xiàn)AK主要通過這些位點(diǎn)的磷酸化并與含有SH2或SH3結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)相結(jié)合，通過整合素、FAK／Src／Pl30CAS／JNK、FAK／PI3激酶以及FAK－ROCK／RhoA等多條信號通路參與細(xì)胞多種生物學(xué)過程，并參與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、侵襲與轉(zhuǎn)移。
白血病是遺傳學(xué)和表型上異質(zhì)性疾病，為多種癌基因、抑癌基因結(jié)構(gòu)或表達(dá)異常及細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路調(diào)節(jié)失衡等協(xié)同作用的結(jié)果。迄今，有關(guān)FAK與白血病相關(guān)性研究報(bào)道較少。
2004年RECHER等報(bào)道，在AML中發(fā)現(xiàn)有FAK蛋白的高表達(dá)和過度激活，并提示FAK的高表達(dá)與白血病細(xì)胞的遷移、預(yù)后及耐藥性有關(guān)系。
本研究結(jié)果顯示，AL病人FAK基因的表達(dá)率、表達(dá)水平均明顯升高，其升高的具體機(jī)制不是十分清楚。先前有研究結(jié)果表明，F(xiàn)AK的磷酸化受到整合素、細(xì)胞因子、致癌基因和酪氨酸激酶受體的調(diào)節(jié)。異常整合素或細(xì)胞因子的信號通路以及Ras等致癌基因產(chǎn)物的表達(dá)均可以導(dǎo)致AML細(xì)胞中FAK的磷酸化，從而進(jìn)一步導(dǎo)致下游一系列信號通路的持續(xù)激活。另外有研究結(jié)果顯示，在AML細(xì)胞中20％的病人有8q22－8q24染色體區(qū)域擴(kuò)增，而這個區(qū)域正是FAK基因所在，因此，8q的擴(kuò)增可能與FAK在ANLL細(xì)胞異常表達(dá)有關(guān)系。
FAK與血液系統(tǒng)中B細(xì)胞成熟過程也有關(guān)系，LE等研究顯示，F(xiàn)AK是CXCL12－CXCR4軸的下游信號分子，并介導(dǎo)細(xì)胞的黏附作用。CXCL12誘導(dǎo)未成熟B細(xì)胞FAK蛋白磷酸化，通過PKC等信號共同調(diào)控細(xì)胞的成熟與運(yùn)動。有關(guān)FAK基因在ALL表達(dá)增高的具體機(jī)制仍需進(jìn)一步探討。
本研究結(jié)果還顯示，初診組和復(fù)發(fā)組病人白血病細(xì)胞FAK基因的表達(dá)率和表達(dá)水平較正常對照組明顯升高，而緩解組則明顯降低，推測FAK基因表達(dá)與白血病的病情進(jìn)展有關(guān)，是預(yù)后不良的因素之一。TARDY等最近研究顯示，AML病人白血病細(xì)胞中FAK蛋白高表達(dá)則其預(yù)后相對較差。本文結(jié)果與TARDY等的研究結(jié)果一致，說明FAK是影響白血病病人生存率的重要因素之一。
LE等采用BCR－ABL－BaF3細(xì)胞系（一種BCR－ABL基因轉(zhuǎn)染的前B淋巴細(xì)胞）研究顯示，F(xiàn)AK基因沉默技術(shù)使細(xì)胞的增殖和克隆形成均減少，中位生存期延長，且伊馬替尼對BCR－ABL細(xì)胞的療效增加。這表明FAK對ALL的進(jìn)展具有一定的促進(jìn)作用。FAK的高表達(dá)抑制腫瘤細(xì)胞失去細(xì)胞黏附后的失巢凋亡，導(dǎo)致癌細(xì)胞以非錨定生長方式不斷增殖，這有助于腫瘤細(xì)胞的存活和侵襲轉(zhuǎn)移。
同一個素材不同效果
這里有三個文件,第一個是《城市》的原文件;第二個是《好學(xué)生》;第三個是《第一消費(fèi)》。這三個文件,我們可以先看一下視頻(附在本期的光盤中),下圖是三個文件的截圖:
這三個片頭看完后,會覺得《好學(xué)生》和原文件很接近,只是文件中的英文更換成了中文,增加了個人的照片,文件中順序也就是鏡頭的順序進(jìn)行了更改;再看片頭《第一消費(fèi)》和原文件的區(qū)別,我們看了這兩個片頭會覺得基本沒有什么一樣的元素,但是又覺得有些相同,其實(shí)這個片頭和原文件差別大些,一個是黑白的,一個是彩色的,但是仔細(xì)分析,你會發(fā)現(xiàn)相似處,就是鏡頭的運(yùn)動和一些小的元素是相同的,但《第一消費(fèi)》的片頭確實(shí)也是根據(jù)原文件更改和替換而來。
實(shí)用的替換和更改方法
我們從簡單的更改和替換文件中的元素,把別人現(xiàn)有的工程文件改為自己能夠使用的文件。
我們先打開一個工程文件包――《城市》。
我們在_MAIN_ANIMATION層看到這個合成文件,這個文件是HDTV1080×29.97寬為1920像素,高1080像素。我們通常使用的DV的大小為720×576像素。高清文件在生成時會慢很多,而現(xiàn)在改大小會影響到層中間的攝像機(jī)鏡頭等文件的元素,改起來也會比較麻煩,既然是省力,索性就找個“最省”的方法――先改元素最后改整個文件的大小。
可以看到在項(xiàng)目窗口中的文件,整理得非常整齊,從上到下:
_MAIN_ANIMATION前面的標(biāo)志是膠片,這是個合成層,并且是最后的一個主要動畫合成層。
Custom Footage 自定義的素材文件夾里是一張做好的有文字的圖。
Footage文件夾是一些我們找到的圖,其中有一張已經(jīng)在PS中做好,我們這個片頭基本是在這張PS圖中進(jìn)行運(yùn)動制作而成的。
Precomps 合成層中是制作的每一個鏡頭的合成層,我們把它們分別保存在這里。
有些朋友做AE時不會把這些進(jìn)行細(xì)分類管理,實(shí)際上進(jìn)行這樣的分類管理有助于快速尋找相關(guān)的素材,并且稍花些時間在分類上,實(shí)際在制作中也能提高工作效率。
在合成層中PIC TAKE 01―06SUB PIC TAKE 03 A-D是“圖片和視頻替換在這里”的圖片,主要是給文字的這張圖加了遮罩和浮雕的框。
在項(xiàng)目窗口中,新建個“照片”文件夾。把我們需要的照片放在這個文件夾中。
現(xiàn)在開始對“照片”文件夾中要修改的部分做一些改動。例如前面提到的PIC TAKE 01中的“圖片和視頻替換在這里”這個字的圖進(jìn)行替換。我找了張明星照(你也可以找和內(nèi)容相關(guān)的圖片來替換)。
TAKE2 你可以從_MAIN_ANIMATION主要動畫合成層中雙擊進(jìn)入,也可以從項(xiàng)目窗口中的Precomps 合成層下的TAKE2雙擊進(jìn)入這個層。進(jìn)入后可看到整個層里的情況。
調(diào)整文字到前面來。
對所加的英文字母設(shè)置動畫關(guān)鍵幀。簡單的辦法是把原有字母層的動畫復(fù)制過來,把時間指針放在相同的位置,展開圖層前面的三角,你可以看到時間線上的這兩個關(guān)鍵幀。
改完了圖片,再來看這個TAKE2層,它是用圖片組成的一個長長的都市景觀,是我們攝像機(jī)要運(yùn)行的一個大環(huán)境。這樣的環(huán)境在片頭中就是鏡頭的組成部分。
在這個環(huán)境中可以看到我用同樣的方法,替換的另一個圖片是顛倒的。原因是在替換時是按照文字的方向調(diào)整,而它卻是故意把這個圖放成豎幅的?；氐降诙€圖的位置,對這個圖像進(jìn)行必要的調(diào)整。這個圖層是PIC TAKE 02。
進(jìn)入PIC TAKE 02對圖進(jìn)行調(diào)整,把圖改為旋轉(zhuǎn)-90度。圖選擇得比較大,我可以把比例改得大些,改為160。
回TAKE2層,看上去舒服多了。我們還可以再重新對所做的文字進(jìn)行調(diào)整,我這次又添加了人名。我們來調(diào)整PIC TAKE 04、PIC TAKE 05和PIC TAKE 06層同上面的方法相同,將需要的視頻或者圖像拖入時間線,關(guān)閉原有的圖層可視性,這樣就替換成需要的素材了。
打開文件TAKE04就會發(fā)現(xiàn)這個城市中的高樓實(shí)際是利用AE的三維圖層自建,通過一個個的面建立起像盒子一樣的高樓。我們現(xiàn)在要換掉墻上的英文字母,改為所需的文字,文字還是根據(jù)需要而定。
我們來調(diào)整視頻SUB PIC TAKE 03 A-D。打開這幾個文件,會發(fā)現(xiàn)這幾個文件是相同的,它其實(shí)是PIC TAKE 03文件在做運(yùn)動。 SUB PIC TAKE 03 A-D這四個文件只要把它們改成相同的圖像就可以了。這時回到PIC TAKE 03里可以看到改后的情況。
改完了這些再次回到_MAIN_ANIMATION層看效果,拉動時間指針,可以看到變化的圖像,再次回到需要該字幕的圖層TAKE06層。
對TAKE06層的文字進(jìn)行調(diào)整,TAKE06層1秒鐘的地方看11層和是要修改的文字層。我們要在TAKE06和_MAIN_ANIMATION層之間反復(fù)多看,回到TAKE06層進(jìn)行調(diào)整直到合適為止。
我在另一個Adobe軟件illustrator中把字進(jìn)行了排列,并且對有些筆畫進(jìn)行了拉長的變形,這個軟件在做這些時比較方便,并且做出后其他的Adobe軟件也都兼容能用,并且MAYA、3DMAX也兼容并認(rèn)識它的路徑,使用比較方便。
在Photoshop中,我對文字加了浮雕效果和陰影處理,這是處理后的效果。白色的底不是特別的明顯,這個文件要加通道,在使用時才會沒有遮擋。
現(xiàn)在要做的就是把一直沒有動,也沒有替換的TAKE01、TAKE03、TAKE05、TAKE07中的文字元素替換成我們的文字:非同凡響。
可以把圖切換為4視圖,學(xué)會使用這四個視圖進(jìn)行調(diào)整。文字的出入方式有很多,但是因?yàn)槲覀兪钦{(diào)入的圖片,所以可以根據(jù)自己的情況添加效果。我添加了一個模糊與銳化―快速模糊―橫向1000值到0。
其他就是細(xì)調(diào)整,調(diào)整中發(fā)現(xiàn)影片的定版字不明顯,我給加了效果―色彩校正―淺色調(diào),對這個字進(jìn)行染色。
調(diào)整完成后,最后生成。為了避免不必要的麻煩,我們生成TGA序列。高清文件有時會讓我們在使用時產(chǎn)生不便,因?yàn)槲募^大,TGA序列的優(yōu)勢是文件沒有損失,清晰度不受影響,而我們一般情況生成DV720×576大小就可以了。
把生成的序列調(diào)入新的工程內(nèi),工程建為720×576,我們生成的TGA序列縮小,改為合適的大小,找音樂調(diào)入,再次生成。
整個工程結(jié)束,會發(fā)現(xiàn)原來的文件_MAIN_ANIMATION層是HDTV寬為1920像素,高1080像素1080×29.97幀速率,導(dǎo)入后原來的片頭長度是50秒,因?yàn)楝F(xiàn)在的幀速率是25秒,每秒多了5幀,共多出250幀多出10秒,長度由原來的50秒變成60秒才是完整的,你如果覺得長可以改得稍短。
縮小生成的TGA序列時,你的文件是上下有遮幅的,原因是HDTV寬為1920像素,高1080像素不是4∶3的比例是16∶9的寬銀幕的原因。
選地，選擇的田土要沒有污染，不可以受到重金屬污染，要選擇朝陽的方向，土壤排水性要好，土質(zhì)要肥沃且疏松，透氣性好。
品種，選擇品種要依照具體種植的時間而定，三月底之前種植就選擇晚熟的種子，三月底之后種植就選擇早中熟種子。
肥料，種小白菜的時候要給植株撒有機(jī)肥水，如果有混土的農(nóng)家肥可以在晴天給小白菜施一些。
蟲害，要勤除田間的雜草，可以在植株苗上撒上一些草木灰防治蟲害，也可以用滅蟲燈誘殺害蟲。
2、種植時間
不同的品種種植時間也有差異，秋天和冬天的白菜可以在八月份和十月份中期可以播種。