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關(guān)鍵詞: 高職教育改革 動(dòng)物微生物及免疫 實(shí)訓(xùn)技能教學(xué)
高等職業(yè)教育的培養(yǎng)目標(biāo)是培養(yǎng)不需太多理論知識(shí)而主要依靠動(dòng)作技能和經(jīng)驗(yàn)技藝在生產(chǎn)、服務(wù)第一線從事現(xiàn)場(chǎng)工作的直接操作者。但是,目前的高等職業(yè)教育存在著學(xué)生培養(yǎng)效果與企業(yè)要求不相符合的狀況,為達(dá)到“以服務(wù)為宗旨、以就業(yè)為導(dǎo)向”的高等職業(yè)教育目標(biāo),需要進(jìn)行適應(yīng)企業(yè)要求、適應(yīng)學(xué)生特點(diǎn)的職業(yè)教育課程改革[1]。開發(fā)以企業(yè)工作過程為課程設(shè)計(jì)基礎(chǔ)的教學(xué)內(nèi)容,實(shí)施以真實(shí)工作任務(wù)為載體的教學(xué)方法;從職業(yè)工作出發(fā)選擇課程內(nèi)容并安排教學(xué)順序[2]。
動(dòng)物微生物及免疫作為畜牧獸醫(yī)專業(yè)必修的一門專業(yè)基礎(chǔ)課,它是通過綜合運(yùn)用動(dòng)物微生物學(xué)、免疫學(xué)和病毒學(xué)等基礎(chǔ)知識(shí)來分析和解決農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)中各種問題的基礎(chǔ)學(xué)科[3]。動(dòng)物微生物及免疫理論課包括微生物基本知識(shí)與檢驗(yàn)技術(shù)、免疫學(xué)基礎(chǔ)及應(yīng)用、主要病原微生物及檢驗(yàn)和微生物在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用四個(gè)篇章,該課程與生產(chǎn)實(shí)踐聯(lián)系十分緊密,起到由理論到實(shí)踐、由基礎(chǔ)到專業(yè)的橋梁作用。然而傳統(tǒng)教學(xué)中存在教學(xué)方法落后、知識(shí)陳舊、與生產(chǎn)實(shí)踐脫節(jié)等問題[4]。目前,筆者所在的江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院正在進(jìn)行國(guó)家示范性(骨干)高職院校建設(shè),涉及課程體系與教學(xué)內(nèi)容改革,包括拓寬學(xué)生的專業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)面、開闊學(xué)生視野的教學(xué)改革,以及動(dòng)物微生物與免疫的實(shí)訓(xùn)技能教學(xué)適應(yīng)高職特點(diǎn)的改革與探索等。
為了滿足就業(yè)崗位要求,要合理地設(shè)計(jì)、選擇實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。動(dòng)物微生物及免疫實(shí)訓(xùn)技能教學(xué)是對(duì)理論課的延伸與運(yùn)用,為了使學(xué)生能夠系統(tǒng)學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)操作技術(shù),避免實(shí)驗(yàn)課依附于理論課的問題,根據(jù)崗位要求整合課程教學(xué)內(nèi)容,并按科研項(xiàng)目方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)順序調(diào)整。高職高專畜牧獸醫(yī)專業(yè)畢業(yè)生大多從事畜禽疾病診斷與防治、動(dòng)物檢疫、畜禽生產(chǎn)、飼料與獸藥售后服務(wù),以及畜牧獸醫(yī)綜合服務(wù)等崗位專業(yè)技術(shù)應(yīng)用與推廣工作。這不但要求畢業(yè)生具有扎實(shí)的動(dòng)物疾病防治知識(shí),更要求他們掌握消毒與滅菌技術(shù)、病原微生物診斷技術(shù)、免疫原理及其應(yīng)用技術(shù)等。首先,要求教師針對(duì)學(xué)生就業(yè)崗位所需要的知識(shí)、能力和素質(zhì)的要求,在充分了解和調(diào)查學(xué)生就業(yè)崗位后對(duì)動(dòng)物微生物與免疫實(shí)訓(xùn)技能教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行整合。其次,按照病原微生物實(shí)驗(yàn)室診斷的程序,開設(shè)綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。由于實(shí)驗(yàn)使用未知菌種或是發(fā)病動(dòng)物的病料,因此要求學(xué)生在器皿寫上學(xué)號(hào),并始終使用自己分離到的菌種進(jìn)行一系列實(shí)驗(yàn)。這樣學(xué)生就會(huì)一絲不茍地做好每一步實(shí)驗(yàn),詳細(xì)觀察并記錄每次實(shí)驗(yàn)結(jié)果,使他們?cè)趯?shí)驗(yàn)中步步深入,從而大大提高學(xué)習(xí)主動(dòng)性。
為了取得預(yù)期的實(shí)驗(yàn)效果,教師先進(jìn)行演示,注重培養(yǎng)規(guī)范意識(shí)。首先,要求學(xué)生必須嚴(yán)格遵守遵守實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)規(guī)章制度和操作規(guī)程,認(rèn)真進(jìn)行操作,否則極有可能造成實(shí)驗(yàn)室污染和實(shí)驗(yàn)人員的感染,甚至?xí)蛲馍⒉ゲ≡F浯危瑢?shí)驗(yàn)過程中老師可邊示范實(shí)驗(yàn)步驟邊講解要注意的細(xì)節(jié),操作要求規(guī)范、速度適中,然后要求學(xué)生嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書的內(nèi)容、步驟、方法進(jìn)行操作。
為了鍛煉學(xué)生解決實(shí)際問題的能力,讓學(xué)生參與實(shí)驗(yàn)教學(xué)全過程。比如,新城疫的抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn),筆者提前兩周布置給學(xué)生,要求學(xué)生熟悉教學(xué)目的意義(免疫監(jiān)測(cè)、診斷疾病和流行病學(xué)調(diào)查)、教學(xué)要求和教學(xué)內(nèi)容。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,學(xué)生要做如下幾方面的工作。
(1)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案,提前一周交與教師查看。
(2)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn),包括實(shí)驗(yàn)相關(guān)儀器準(zhǔn)備(96孔v型底微量反應(yīng)板、微量加樣器、離心機(jī)、離心管、微量振蕩器、電熱恒溫培養(yǎng)箱等)、試劑準(zhǔn)備(3.8%檸櫞酸鈉抗凝劑、生理鹽水、1%雞紅細(xì)胞、雞新城疫抗原、雞新城疫血清)、無特定病原體種蛋的孵化(提前9~10天)、雞場(chǎng)血液采集及血清制備等。
(3)部分學(xué)生參與預(yù)實(shí)驗(yàn),通過預(yù)實(shí)驗(yàn)可以檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)前的工作是否充分,以確保每次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
(4)學(xué)生親自操作實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)動(dòng)手操作意識(shí)。老師檢查結(jié)果,合格后才能離開,凡沒有結(jié)果或結(jié)果不理想的,老師和學(xué)生一起分析原因后馬上重做,直到得出滿意結(jié)果為止,從而培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)風(fēng)和科學(xué)的態(tài)度。
(5)實(shí)驗(yàn)的善后,對(duì)所用物品、培養(yǎng)物進(jìn)行無害化處理,實(shí)驗(yàn)器皿清洗等。要求通過老師的引導(dǎo)作用,鼓勵(lì)學(xué)生發(fā)揮主觀能動(dòng)性,使學(xué)生真正成為教學(xué)的主體。
另外,筆者通過開放實(shí)驗(yàn)室,避免了受實(shí)訓(xùn)技能教學(xué)課時(shí)的限制、教師準(zhǔn)備過多的弊端,鼓勵(lì)學(xué)生或部分學(xué)生利用課余時(shí)間加強(qiáng)基本實(shí)驗(yàn)技能訓(xùn)練,在一定程度上調(diào)動(dòng)了學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性,增加了學(xué)生動(dòng)手操作機(jī)會(huì),有利于實(shí)驗(yàn)的良好開展和學(xué)生技能的提高。
為了培養(yǎng)實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度,讓學(xué)生互相監(jiān)督。在實(shí)驗(yàn)中有些學(xué)生由于實(shí)驗(yàn)操作不規(guī)范,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,他們便擅自更改或抄襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為了避免這種情況的發(fā)生,采取展示實(shí)驗(yàn)結(jié)果和教師現(xiàn)場(chǎng)逐一打分的做法。一方面讓學(xué)生自己發(fā)現(xiàn)存在的問題并討論解決,有利于培養(yǎng)學(xué)生分析、解決實(shí)際問題的能力,從而提高教學(xué)效率。另一方面使學(xué)生充分認(rèn)識(shí)到實(shí)驗(yàn)本身的嚴(yán)肅性,從而有助于培養(yǎng)學(xué)生實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度。
將操作能力培養(yǎng)貫穿始終,考核方式多樣化。動(dòng)物微生物與免疫實(shí)訓(xùn)技能教學(xué)的目的是使學(xué)生掌握一系列基本技能,包括使用實(shí)驗(yàn)儀器觀察微生物和研究微生物的技能,采集、培養(yǎng)和處理實(shí)驗(yàn)材料的技能,獨(dú)立進(jìn)行觀察和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的能力,以及團(tuán)隊(duì)合作能力等。為了真正提高學(xué)生的實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力,真正掌握實(shí)驗(yàn)技能,我們將實(shí)訓(xùn)技能教學(xué)的考核方式多樣化。實(shí)訓(xùn)課程考核平時(shí)成績(jī)包括課堂提問、實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)報(bào)告、分析問題和解決問題的能力、學(xué)習(xí)態(tài)度、紀(jì)律和團(tuán)隊(duì)協(xié)作精神等。在實(shí)訓(xùn)技能教學(xué)的最后一天進(jìn)行終末考核,采用當(dāng)場(chǎng)考核、當(dāng)場(chǎng)打分的方式。上午對(duì)學(xué)生進(jìn)行逐一考核,考核內(nèi)容分為理論題和操作題兩部分。下午采用隨機(jī)抽查的方式,抽考比例為學(xué)生總數(shù)的20%,因?yàn)榭己饲皩W(xué)生并不知道自己會(huì)抽中哪一項(xiàng)考核項(xiàng)目,必然會(huì)使學(xué)生關(guān)注教學(xué)目標(biāo)中要求學(xué)生掌握的全部基本操作技能。讓學(xué)生將已經(jīng)做過的實(shí)驗(yàn)再重復(fù)操作或觀察一次,將會(huì)進(jìn)一步加深他們對(duì)實(shí)驗(yàn)的理解,其中的重點(diǎn)、難點(diǎn)也更易掌握。教師根據(jù)學(xué)生的技能掌握情況、操作的熟練程度,以及回答問題的情況綜合給出學(xué)生的總成績(jī)。最后,教師借助考核反饋的信息,發(fā)現(xiàn)教學(xué)中可能存在的教學(xué)問題,提出解決方案,提升實(shí)訓(xùn)技能教學(xué)質(zhì)量。
高等職業(yè)教育改革的成功一方面需要每一位教師真正地參與進(jìn)去,提高自己的綜合素質(zhì),另一方面需要學(xué)生真正成為教學(xué)的主體。動(dòng)物微生物和免疫是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的課程,實(shí)訓(xùn)技能教學(xué)改革與創(chuàng)新是多方面的,充分樹立學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中的主體地位,根據(jù)崗位要求合理地設(shè)計(jì)、選擇實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,用科學(xué)的方法對(duì)學(xué)生進(jìn)行考核,充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的積極性和創(chuàng)造性,培養(yǎng)學(xué)生實(shí)事求是、嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的科學(xué)態(tài)度和良好習(xí)慣,提高學(xué)生的綜合素質(zhì)。
參考文獻(xiàn):
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[2]王金合.《動(dòng)物微生物學(xué)》適應(yīng)崗位需求的教學(xué)改革與創(chuàng)新[J].安徽農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2009,15(5):196-197.
【摘要】教師在教學(xué)過程中,以往偏重于老師的主體角色,忽視學(xué)生學(xué)習(xí)主觀能動(dòng)性的發(fā)揮,為了適應(yīng)新時(shí)期崗位對(duì)人才需求的特點(diǎn),筆者認(rèn)為,對(duì)于中職學(xué)生的培養(yǎng)在如何充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的主觀能動(dòng)性應(yīng)該有所突破,本文就《病原生物與免疫學(xué)基礎(chǔ)》教學(xué)中培養(yǎng)學(xué)生學(xué)習(xí)的主觀能動(dòng)性進(jìn)行淺析
【關(guān)鍵詞】《病原生物與免疫學(xué)基礎(chǔ)》教學(xué),學(xué)生,主觀能動(dòng)性,培養(yǎng)
病原生物與免疫學(xué)基礎(chǔ)是一門醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課,是聯(lián)系基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)的橋梁。該學(xué)科的特點(diǎn)是:病原生物部分知識(shí)點(diǎn)多,難記;免疫學(xué)部分理論性強(qiáng),抽象難懂。而中職衛(wèi)校的學(xué)生年齡較小,文化基礎(chǔ)薄弱,思維活躍,好奇心強(qiáng)。實(shí)踐證明,在病原生物與免疫學(xué)教學(xué)中因材施教,根據(jù)不同教學(xué)內(nèi)容采取不同教學(xué)法,或多種教學(xué)法充分調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的主觀能動(dòng)性。培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考問題和解決問題的能力,以便學(xué)生能滿足工作崗位的需要。
1 通過問題教學(xué)發(fā)調(diào)動(dòng)學(xué)生的主觀能動(dòng)性
學(xué)源于思,思源于疑,學(xué)習(xí)本身就是一個(gè)設(shè)疑、質(zhì)疑、釋疑的過程。提問式教學(xué)法分成授課前、授課中和授課后提問3 個(gè)階段。有些問題先提出來,再讓學(xué)生回答;有些問題提出來是為了引起學(xué)生注意;有些問題教師可自問自答;通過對(duì)授課過程中的每個(gè)問題進(jìn)行論述,使教學(xué)內(nèi)容相聯(lián)系,促使學(xué)生將所學(xué)內(nèi)容融會(huì)貫通。這種教學(xué)法有利于引導(dǎo)學(xué)生主動(dòng)思考,提高學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性,使學(xué)生由學(xué)會(huì)變?yōu)闀?huì)學(xué)。
例如:在講解微生物的概念時(shí),采用以下開場(chǎng)白:微生物從字面上看即微小的生物,那么蒼蠅、蚊子也很小,它們是不是我們要研究的微生物呢?不是。同學(xué)們知道什么是微生物嗎?有的學(xué)生回答是細(xì)菌、病毒,從而引出微生物是肉眼不能直接看見的,必須借助顯微鏡才能觀察到的微小生物。講解結(jié)核分枝桿菌時(shí),提出問題:同學(xué)們知道林黛玉、茶花女,還有林徽因死于何種疾病么?由此介紹結(jié)核病及其病原體,指出結(jié)核病為傳染病的第一殺手。在講授抗原時(shí),提出問題:卡介苗、麻疹疫苗、流感疫苗等為什么能分別預(yù)防結(jié)核、麻疹、流感?由答案引出抗原的概念及其相關(guān)內(nèi)容。講解超敏反應(yīng)時(shí),提出問題:青霉素過敏是怎樣發(fā)生的?為什么有的人吃魚、蝦、蛋、奶等食物會(huì)過敏?使學(xué)生帶著問題學(xué)習(xí),引發(fā)其學(xué)習(xí)興趣。
2 通過引導(dǎo)教學(xué)法調(diào)動(dòng)學(xué)生的主觀能動(dòng)性
寄生蟲各論的教學(xué)內(nèi)容可采用以學(xué)生自學(xué)為主,教師作必要指導(dǎo)為輔的學(xué)導(dǎo)式教學(xué)法。其基本步驟為:教師列出自學(xué)提綱;學(xué)生按照提綱自學(xué),教師不斷巡視,啟發(fā)并答疑;最后教師進(jìn)行總結(jié)。該教學(xué)法有利于提高學(xué)生的自學(xué)能力。如豬帶絳蟲的學(xué)習(xí)提綱為:(1)豬帶絳蟲的的形態(tài);(2)生活史要點(diǎn)(寄生部位、感染階段、感染方式、中間宿主、終宿主、壽命;(3)所致疾病;(4)防治方法
3 通過討論教學(xué)法調(diào)動(dòng)學(xué)生的主觀能動(dòng)性
針對(duì)學(xué)生在細(xì)菌各論學(xué)習(xí)中出現(xiàn)記不住、理不清、易混淆、枯燥乏味、缺乏興趣的情況,在教學(xué)中可采取在教師指導(dǎo)下,組織學(xué)生討論的教學(xué)法。首先選擇針對(duì)性強(qiáng)且簡(jiǎn)單的臨床病例進(jìn)行講解,如破傷風(fēng)病例。然后確定討論范圍,提出問題并圍繞問題組織學(xué)生進(jìn)行課堂討論。最后教師針對(duì)重點(diǎn)問題進(jìn)行小結(jié)。小結(jié)主要是歸納總結(jié)討論要點(diǎn),回答學(xué)生提出的傾向性問題。對(duì)2007 級(jí)護(hù)理專業(yè)學(xué)生的抽樣調(diào)查結(jié)果顯示,94.52%的學(xué)生反映該教學(xué)法很好,充分發(fā)揮了他們的主體作用,使課堂氣氛活躍,提高了自學(xué)能力和綜合分析、解決問題的能力。
4 通過多媒體課件激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)的主觀能動(dòng)性
微生物看不見、摸不著的獨(dú)特之處,使得微生物學(xué)教學(xué)變得抽象、難以理解。因此,在教學(xué)過程中應(yīng)用多媒體技術(shù),對(duì)課堂教學(xué)可以起到良好的輔助作用。通過生動(dòng)、形象、直觀的圖像展示,可以激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣。同時(shí),多媒體技術(shù)信息量大、重現(xiàn)性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)可以緩解教學(xué)內(nèi)容多、課時(shí)少的矛盾。
5 通過實(shí)驗(yàn)課調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的主觀能動(dòng)性
5.1任務(wù)驅(qū)動(dòng),培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)造性以及解決實(shí)際問題的能力教師往往低估學(xué)生的能力,總習(xí)慣不停的指導(dǎo),長(zhǎng)此以往扼殺了學(xué)生的創(chuàng)造性和解決實(shí)際問題的能力。在教學(xué)過程中,教師應(yīng)充分相信自己的學(xué)生,給他們更多自由發(fā)揮的空間,擺脫以往的模式化教學(xué)。通過理論與醫(yī)學(xué)實(shí)踐的結(jié)合,有效提高了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,提高了動(dòng)手能力,加強(qiáng)了職業(yè)技能培養(yǎng)。例如,在微生物分布實(shí)驗(yàn)時(shí),空氣中微生物分布檢測(cè),以往總是每組均測(cè)試實(shí)驗(yàn)室內(nèi)、外的空氣中微生物_為了充分調(diào)動(dòng)學(xué)生積極參與實(shí)驗(yàn),我們?cè)诮虒W(xué)過程中要求學(xué)生以小組(共10組)為單位自主設(shè)計(jì)本次試驗(yàn),各組間盡量不重復(fù),并且要求分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。最后要求以班級(jí)為單位將本班各組的測(cè)試結(jié)果匯總,提交一份簡(jiǎn)單的分析報(bào)告。學(xué)生在任務(wù)驅(qū)動(dòng)下,充分發(fā)揮能動(dòng)性,培養(yǎng)了科學(xué)精神,科研意識(shí)和能力,培養(yǎng)了分析解決實(shí)際問題的能力,提高了學(xué)習(xí)效果,達(dá)到了本次實(shí)驗(yàn)的教學(xué)目的。空氣中有微生物的存在,并且不同地點(diǎn)微生物分布不同,空氣中微生物的分布受諸多因素的影響。通過任務(wù)驅(qū)動(dòng)教學(xué)實(shí)現(xiàn)了進(jìn)一步提高學(xué)生的動(dòng)手能力,引導(dǎo)學(xué)生知識(shí)、能力和素質(zhì)綜合發(fā)展的目的。
5.2 做好實(shí)驗(yàn)課預(yù)習(xí),提高實(shí)驗(yàn)課質(zhì)量傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)認(rèn)為實(shí)驗(yàn)課的目的是驗(yàn)證課堂講授的理論內(nèi)容,因此,傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)存在諸多不足,如學(xué)生實(shí)驗(yàn)興趣低下、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容陳舊、驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)過多等12,二為了給學(xué)生更多的動(dòng)手機(jī)會(huì),避免示教內(nèi)容較多,改變學(xué)生處于被動(dòng)學(xué)習(xí)狀態(tài)。我們鼓勵(lì)學(xué)生實(shí)驗(yàn)前做好預(yù)習(xí),教師提前布置實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)要求,學(xué)生上實(shí)驗(yàn)課時(shí)已經(jīng)明白實(shí)驗(yàn)原理、試驗(yàn)方法,教師主要是指導(dǎo)作用〔這樣就節(jié)省了實(shí)驗(yàn)課上教師講授實(shí)驗(yàn)原理的時(shí)間,又避免了學(xué)生被動(dòng)聽的局面。更多的時(shí)間留給學(xué)生朵手操作,大大提高了實(shí)驗(yàn)技能。
免疫學(xué)是生命科學(xué)的前沿性基礎(chǔ)學(xué)科,也是醫(yī)學(xué)生的必修課程。免疫學(xué)是實(shí)踐性較強(qiáng)的學(xué)科,實(shí)驗(yàn)課在免疫學(xué)教學(xué)中占有非常重要的地位。針對(duì)不同專業(yè)醫(yī)學(xué)生的培養(yǎng)目標(biāo),結(jié)合專業(yè)特點(diǎn),有的放矢地設(shè)計(jì)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)方案,具有非常重要的意義。免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課不同專業(yè)醫(yī)學(xué)生免疫學(xué)是醫(yī)學(xué)科學(xué)的前沿學(xué)科,是醫(yī)學(xué)教育的重要組成部分,是高等醫(yī)學(xué)院校的重要基礎(chǔ)課程,其涉及基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。免疫學(xué)知識(shí)更新快,技術(shù)發(fā)展快,涉及學(xué)科廣,是推動(dòng)現(xiàn)代生命科學(xué)的支柱性學(xué)科,并且是醫(yī)學(xué)院校不同專業(yè)醫(yī)學(xué)生的必修課程,學(xué)習(xí)并掌握好免疫學(xué)的相關(guān)知識(shí),對(duì)以后的專業(yè)課學(xué)習(xí)以及臨床實(shí)踐具有重要的作用。免疫學(xué)屬于實(shí)踐性較強(qiáng)的學(xué)科,實(shí)驗(yàn)課是免疫學(xué)教學(xué)的重要組成部分,合理的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課的開展能很好的調(diào)動(dòng)起學(xué)生對(duì)免疫學(xué)的學(xué)習(xí)興趣,有助于學(xué)生理解理論課的相關(guān)知識(shí)。因此,開展并安排好免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課,對(duì)提高免疫學(xué)教學(xué)質(zhì)量意義重大。現(xiàn)階段免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容相對(duì)單一,主要是一些經(jīng)典的驗(yàn)證性免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。各專業(yè)學(xué)生均采用統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)課教材,缺乏對(duì)醫(yī)學(xué)生專業(yè)不同的針對(duì)性實(shí)驗(yàn)課設(shè)置,無法很好的調(diào)動(dòng)起各專業(yè)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,限制了學(xué)生對(duì)知識(shí)的掌握和靈活運(yùn)用,導(dǎo)致了免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)與將來的實(shí)際運(yùn)用嚴(yán)重脫節(jié)。因此免疫學(xué)教學(xué)迫切需要對(duì)實(shí)驗(yàn)課進(jìn)行教學(xué)改革,針對(duì)不同專業(yè)學(xué)生的特點(diǎn)有針對(duì)性地調(diào)整實(shí)驗(yàn)課方案,以提高實(shí)驗(yàn)課教學(xué)質(zhì)量,讓各專業(yè)醫(yī)學(xué)生都能學(xué)到“有用”的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。為了有針對(duì)性地進(jìn)行免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課調(diào)整,可以將實(shí)驗(yàn)課的內(nèi)容分為兩部分,課時(shí)的1/3用來安排經(jīng)過精心挑選的具有代表性的經(jīng)典免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),使新學(xué)者對(duì)免疫學(xué)的經(jīng)典理論有個(gè)初步的了解和認(rèn)識(shí),掌握實(shí)驗(yàn)的基本技能,為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)課打下扎實(shí)的基礎(chǔ)。另外2/3的課時(shí)根據(jù)不同的醫(yī)學(xué)專業(yè)特點(diǎn)開展有針對(duì)性的實(shí)驗(yàn),使不同醫(yī)學(xué)專業(yè)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課的側(cè)重點(diǎn)各不相同,這樣不但可以調(diào)動(dòng)各專業(yè)學(xué)生對(duì)免疫學(xué)的學(xué)習(xí)興趣,更會(huì)為學(xué)生將來的發(fā)展打下良好的基礎(chǔ)!下面針對(duì)不同專業(yè)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課程設(shè)計(jì)進(jìn)行探討。一、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)專業(yè)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)專業(yè)的學(xué)生是科研隊(duì)伍的后備力量,是未來的科研工作者,因此要尤其重視對(duì)其科研創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。針對(duì)本專業(yè)的學(xué)生特點(diǎn),免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課應(yīng)多設(shè)計(jì)完整的系統(tǒng)性的實(shí)驗(yàn),讓學(xué)生參與或者獨(dú)立開展一個(gè)小的研究課題,使學(xué)生熟悉并了解實(shí)驗(yàn)的延續(xù)性和完整性。老師可以根據(jù)實(shí)際情況提出幾個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),讓學(xué)生通過查詢文獻(xiàn)資料,和老師進(jìn)行探討,選擇幾個(gè)可行性方案,并分成不同的小組進(jìn)行實(shí)驗(yàn),用不同的方法來共同解決同一個(gè)科學(xué)問題。例如,可以設(shè)計(jì)抗體的制備實(shí)驗(yàn)。第一步,選擇佐劑開始,就可以有多種不同的選擇。比如,可以選擇弗氏完全佐劑(CFA),鋁劑,蛋白佐劑等;第二步,動(dòng)物的免疫,可以選擇小鼠,大鼠,兔子等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物;第三步,血液的采集,可以有尾靜脈取血法,眼外眶采備血法;第四步,血清的分離;第五步,抗體的檢測(cè),可以通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)抗體的滴度和抗體的親和力等。最后,讓學(xué)生比較不同組之間獲得的結(jié)果,從而更加深入地理解抗體的制備原理和特點(diǎn)。二、臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)培養(yǎng)的是救死扶傷的醫(yī)務(wù)工作者,如何將免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)與疾病的發(fā)病機(jī)制和診斷治療相關(guān)聯(lián),對(duì)他們而言比單純掌握一種實(shí)驗(yàn)技能更有意義。實(shí)驗(yàn)教學(xué)中應(yīng)以具體的臨床疾病或相應(yīng)的動(dòng)物模型為例開展,不但能將理論知識(shí)和實(shí)際臨床疾病相結(jié)合,更重要的是可以培養(yǎng)學(xué)生的臨床思維能力和綜合運(yùn)用知識(shí)的能力。超敏反應(yīng)是臨床上的常見免疫系統(tǒng)疾病,可以對(duì)本專業(yè)學(xué)生針對(duì)性地設(shè)計(jì)建立遲發(fā)型超敏反應(yīng)(DTH)小鼠模型的實(shí)驗(yàn)。以鑰孔血藍(lán)蛋白(KLH)為致敏原,首先皮下免疫刺激機(jī)體淋巴細(xì)胞產(chǎn)生初次免疫應(yīng)答,7天后,在小鼠腳掌以KLH沖擊免疫,通過測(cè)量小鼠腳掌厚度來檢測(cè)小鼠二次免疫應(yīng)答引起的超敏反應(yīng)的強(qiáng)度。以此為例,不僅能讓學(xué)生掌握相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)技能,又可以讓學(xué)生加深對(duì)超敏反應(yīng)原理的理解。三、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)近年來,醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)發(fā)展迅速,新的檢驗(yàn)技術(shù)和自動(dòng)化儀器廣泛應(yīng)用于臨床,在很大程度上推動(dòng)了人們對(duì)疾病的認(rèn)識(shí)以及對(duì)臨床疾病診斷和監(jiān)測(cè)的準(zhǔn)確性,但另一方面也在一定程度上加重了臨床醫(yī)生對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的依賴性。因此,檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)的學(xué)生應(yīng)著重培養(yǎng)其實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力及對(duì)實(shí)驗(yàn)中各種影響因素的綜合分析和評(píng)價(jià)能力,以期為臨床醫(yī)生提供更可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。可以設(shè)計(jì)臨床上最常用到的乙肝表面抗原的檢測(cè)實(shí)驗(yàn),讓學(xué)生綜合采用ELISA,金標(biāo)免疫層析法和化學(xué)發(fā)光法來檢測(cè)陰性標(biāo)本和不同數(shù)量級(jí)的陽性標(biāo)本。由于不同檢測(cè)方法得到的結(jié)果并不完全相同,這就需要學(xué)生自主查閱資料,分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,并比較不同檢測(cè)方法的的異同。這樣不僅可以讓學(xué)生掌握不同檢測(cè)方法的原理和影響因素,同時(shí)還了解了各種方法的靈敏度和特異性,為將來的臨床工作打下基礎(chǔ)。四、預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)預(yù)防醫(yī)學(xué)是醫(yī)學(xué)的一門應(yīng)用學(xué)科,它以個(gè)體和確定的群體為對(duì)象,目的是保護(hù)、促進(jìn)和維護(hù)健康,預(yù)防疾病、失能和夭折。因此,本專業(yè)的學(xué)生實(shí)驗(yàn)課程的重點(diǎn)應(yīng)該安排在如何預(yù)防疾病方面。預(yù)防疾病尤其是傳染病最好的方法就是使用疫苗。因此,疫苗的研發(fā)和制備應(yīng)該在本專業(yè)學(xué)生免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課程中占有絕對(duì)的分量。可以設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)疫苗的原核重組表達(dá)、純化與免疫效果分析實(shí)驗(yàn)。讓學(xué)生從引物的設(shè)計(jì)開始,到原核表達(dá)載體的構(gòu)建、轉(zhuǎn)化,蛋白質(zhì)誘導(dǎo)表達(dá)與純化,進(jìn)而免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以檢測(cè)蛋白疫苗的效果。考慮到實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)所帶來的具體實(shí)施上的問題,可以根據(jù)課時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)課方案進(jìn)行調(diào)整,先讓學(xué)生了解整體的實(shí)驗(yàn)線路,再對(duì)其中的具體的幾個(gè)關(guān)鍵步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。五、藥學(xué)專業(yè)隨著基因工程技術(shù)和分子免疫學(xué)等學(xué)科的迅猛發(fā)展,以基因工程制藥為主的生物制藥已成為最活躍、發(fā)展最快的醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)。生物制藥產(chǎn)業(yè)包括基因工程藥物、生物疫苗和生物診斷試劑三大類,藥學(xué)專業(yè)學(xué)生正是從事生物制藥行業(yè)的主力軍,因此免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課設(shè)置可以將重點(diǎn)放在細(xì)胞因子、單克隆抗體、基因工程抗體等方面。實(shí)驗(yàn)課是免疫學(xué)教學(xué)中不可缺少的部分,傳統(tǒng)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容相對(duì)單一,不同專業(yè)之間沒有區(qū)別,達(dá)不到因材施教,針對(duì)性教學(xué)的要求。針對(duì)不同專業(yè)的培養(yǎng)目標(biāo),畢業(yè)后實(shí)際工作的需要,有的放矢地設(shè)計(jì)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容,不斷更新完善實(shí)驗(yàn)教學(xué)方案,不但可以調(diào)動(dòng)各專業(yè)學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性,排除他們的畏難情緒,同時(shí),也為他們今后職業(yè)生涯中免疫學(xué)知識(shí)的靈活運(yùn)用打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)!
參考文獻(xiàn):
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關(guān)鍵詞:病原生物學(xué)與免疫學(xué) 教學(xué)改革
中圖分類號(hào):G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:C DOI:10.3969/j.issn.1672-8181.2014.04.044
病原生物學(xué)與免疫學(xué)是由醫(yī)學(xué)微生物學(xué)、人體寄生蟲學(xué)和醫(yī)學(xué)免疫學(xué)這三門學(xué)科整合的一門重要的醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程,與臨床課程關(guān)系密切。為了達(dá)到高職高專培養(yǎng)高素質(zhì)實(shí)用型人才培養(yǎng)目標(biāo),結(jié)合本校實(shí)際情況,對(duì)這門課程的教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法及教學(xué)手段進(jìn)行了如下的改革和探討。
1 合理安排教學(xué)內(nèi)容
《病原生物學(xué)與免疫學(xué)》這門課程內(nèi)容繁多并且復(fù)雜,特別是醫(yī)學(xué)免疫學(xué)這部分內(nèi)容比較抽象而枯燥,學(xué)生較難理解,如果要讓學(xué)生在這有限的幾十個(gè)學(xué)時(shí)內(nèi)把這些內(nèi)容融會(huì)貫通,就必須對(duì)該課程的教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行優(yōu)化整合。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)這部分內(nèi)容,因?yàn)檫@些微生物個(gè)體微小、種類繁多、結(jié)構(gòu)比較簡(jiǎn)單,我們?nèi)庋劭床坏剑裕瑢W(xué)生對(duì)它們?nèi)鄙俑杏^認(rèn)識(shí),再加上知識(shí)點(diǎn)比較零散,使學(xué)生在學(xué)習(xí)過程中感到枯燥無味[1]。根據(jù)這種情況,調(diào)整了教學(xué)內(nèi)容順序,如微生物各論教學(xué):以往是按照細(xì)菌、真菌、病毒這個(gè)順序依次講授各個(gè)病原體,但是目前我們是根據(jù)病原體的傳播途徑為主線進(jìn)行講授,如經(jīng)消化道傳播的病原體,經(jīng)呼吸道傳播的病原體、經(jīng)節(jié)肢動(dòng)物傳播的病原體、經(jīng)接觸傳播的病原體等。這樣瑣碎內(nèi)容系統(tǒng)化,學(xué)生樂于接受且記得牢固[2]。人體寄生蟲學(xué)這部分內(nèi)容的重點(diǎn)是醫(yī)學(xué)蠕蟲學(xué)和醫(yī)學(xué)原蟲學(xué),醫(yī)學(xué)節(jié)肢動(dòng)物學(xué)稍加了解,講授的重點(diǎn)是介紹寄生蟲的形態(tài)特征、生活史特點(diǎn)及其致病性等方面,至于其流行特點(diǎn)和防治原則了解一點(diǎn)則可,這樣,教學(xué)重點(diǎn)突出了,學(xué)生感到清楚明白。醫(yī)學(xué)免疫學(xué)這部分內(nèi)容,由于免疫學(xué)這些年飛速發(fā)展,并滲透到在生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,應(yīng)用及其廣泛。可是大部分學(xué)生反應(yīng)免疫學(xué)抽象難懂,根據(jù)這種現(xiàn)象,我們?cè)诮虒W(xué)中,免疫學(xué)基礎(chǔ)只重點(diǎn)介紹免疫學(xué)的一些基本概念,如抗原、免疫球蛋白與抗體、補(bǔ)體等。這些內(nèi)容簡(jiǎn)單,但卻是臨床免疫學(xué)的基礎(chǔ),臨床免疫部分重點(diǎn)介紹一些與臨床關(guān)系密切的內(nèi)容如超敏反應(yīng)、免疫缺陷病、自身免疫病及免疫學(xué)防治和診斷等。
2 改進(jìn)教學(xué)方法
2.1 對(duì)比講解式教學(xué)法
本門課程中醫(yī)學(xué)微生物學(xué)部分細(xì)菌、病毒的種類繁多、特點(diǎn)復(fù)雜,學(xué)生易懂但是難記,容易混淆,如果教師按照教材內(nèi)容依次講解每種細(xì)菌或病毒的生物學(xué)特點(diǎn)、致病性與免疫性、微生物學(xué)檢查和防治原則,教學(xué)內(nèi)容就會(huì)顯得單調(diào)、貧乏,學(xué)生會(huì)覺得無趣,這樣不利于學(xué)生理解和記憶,教學(xué)效果也不能令人滿意。所以在教學(xué)過程中我們可以采用對(duì)比講解法,如針對(duì)細(xì)菌的形態(tài)染色、培養(yǎng)特性、抗原結(jié)構(gòu)、抵抗力、致病物質(zhì)、所致疾病、免疫性等方面進(jìn)行對(duì)比講解。這樣加深了學(xué)生的記憶,使復(fù)雜問題簡(jiǎn)單化了,知識(shí)點(diǎn)也掌握好了,教學(xué)效果也提高了。
2.2 啟發(fā)式教學(xué)法
傳統(tǒng)填鴨式和滿堂灌的教學(xué)方法枯燥,不能調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性,只注重了知識(shí)的傳授,不注重學(xué)生能力的培養(yǎng)[3],這就需要采用啟發(fā)式教學(xué)方法。現(xiàn)在使用比較多的啟發(fā)式教學(xué)法主要有PBL法等,把問題或病例討論作為開啟學(xué)生思維器官的鑰匙[4],增強(qiáng)了學(xué)生自主學(xué)習(xí)的興趣,使學(xué)生的求知欲進(jìn)入活躍狀態(tài)。如在講授超敏反應(yīng)時(shí)可以提出為什么病人在醫(yī)院注射青霉素前需要做皮試?為什么注射青霉素后需要在醫(yī)院觀察15-20分鐘才能離開?再根據(jù)這些問題引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行下一步的學(xué)習(xí),這樣不僅能將學(xué)生的注意力、學(xué)習(xí)興趣吸引到學(xué)習(xí)上,而且學(xué)生對(duì)知識(shí)點(diǎn)理解快,記得牢。如在講解狂犬病病毒時(shí),可先讓學(xué)生觀看狂犬病病人發(fā)病時(shí)候的臨床表現(xiàn),讓學(xué)生對(duì)狂犬病病人有個(gè)大體了解,然后提出問題如人被狗咬了一定會(huì)得狂犬病嗎?被瘋狗咬傷后該如何處理?這樣學(xué)生為了解問題的答案,就會(huì)主動(dòng)進(jìn)入這一章節(jié)的學(xué)習(xí)中來,提高了學(xué)習(xí)興趣,化被動(dòng)學(xué)習(xí)為主動(dòng)學(xué)習(xí),學(xué)習(xí)效果大大提高。
3 采用現(xiàn)代化教學(xué)手段
多媒體教學(xué)是一種全新的教學(xué)手段,融合了文字、圖像、動(dòng)畫等,避免了傳統(tǒng)教學(xué)不能激發(fā)學(xué)生的形象思維和感知興趣的缺點(diǎn)[5]。人體寄生蟲學(xué)部分是經(jīng)典形態(tài)學(xué)科,主要研究寄生蟲的形態(tài)、生活史、致病及實(shí)驗(yàn)診斷、流行特點(diǎn)等,傳統(tǒng)寄生蟲學(xué)授課模式是以教師在黑板寫字、繪圖并配以掛圖為主,由于直觀性差,缺少鮮明生動(dòng)的動(dòng)態(tài)效果,并且教學(xué)信息量少,進(jìn)度慢,學(xué)生難教難學(xué),不利于學(xué)生對(duì)知識(shí)的消化吸收。多媒體教學(xué)所提供的寄生蟲圖像真實(shí),又配以動(dòng)畫及合適的音樂,在教學(xué)過程中使學(xué)生能視覺、聽覺并用,其效果遠(yuǎn)比掛圖要好,并且教學(xué)信息量大大增加,豐富了學(xué)生的知識(shí)面,加深了學(xué)生對(duì)知識(shí)的理解,調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)部分也有許多形態(tài)學(xué)內(nèi)容,多媒體教學(xué)可利用其形象、直觀的特點(diǎn),使學(xué)生更容易掌握各種病原體的生物學(xué)特性。免疫學(xué)部分中補(bǔ)體的三條激活途徑是較為抽象的知識(shí)點(diǎn),同時(shí)又是重點(diǎn)內(nèi)容,在多媒體教學(xué)時(shí),可運(yùn)用示意圖并配以簡(jiǎn)易動(dòng)畫來展示每條途徑,直觀形象,使學(xué)生能輕松掌握其內(nèi)容。多媒體技術(shù)在教學(xué)中的應(yīng)用,圖文并茂、動(dòng)靜結(jié)合,使抽象的問題具體化,復(fù)雜的問題簡(jiǎn)單化,為教學(xué)提供了逼真的效果,使知識(shí)獲得全面表達(dá),加深了學(xué)生對(duì)課題知識(shí)的理解,提高了課堂教學(xué)效果,達(dá)到教學(xué)最優(yōu)化的目的[6]。
總之,在實(shí)際的教學(xué)過程中,只有按照高素質(zhì),實(shí)用型人才培養(yǎng)目標(biāo),對(duì)教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行優(yōu)化整合,對(duì)教學(xué)方法和教學(xué)手段進(jìn)行改革,才能提高學(xué)生學(xué)習(xí)效果,促使學(xué)生從知識(shí)型向能力型轉(zhuǎn)變。
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【關(guān)鍵詞】變態(tài)反應(yīng)和免疫學(xué);教育改革;專業(yè),醫(yī)學(xué)病原
生物學(xué)與免疫學(xué)是醫(yī)學(xué)類高等職業(yè)教育的重要醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課,對(duì)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)起到橋梁銜接作用,這門課為免疫系統(tǒng)疾病、感染性疾病的診斷、預(yù)防和治療提供理論依據(jù),也為學(xué)習(xí)其他醫(yī)學(xué)課程打下基礎(chǔ)。病原生物學(xué)與免疫學(xué)在本校開設(shè)于第一學(xué)年第二學(xué)期,這個(gè)階段的學(xué)生基礎(chǔ)知識(shí)不扎實(shí)、自學(xué)能力較差、還沒有學(xué)過臨床課,面對(duì)病原生物學(xué)與免疫學(xué)這門課,普遍反映知識(shí)量大,內(nèi)容繁雜,理論抽象,難以掌握。為了讓學(xué)生更好地掌握病原生物學(xué)與免疫學(xué),使病原生物學(xué)與免疫學(xué)的教學(xué)能更好地滿足臨床專業(yè)人才培養(yǎng)目標(biāo)的要求,本教研室從病原生物學(xué)與免疫學(xué)課程的教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法、實(shí)驗(yàn)教學(xué)等幾個(gè)方面對(duì)臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)病原生物學(xué)與免疫學(xué)課程教學(xué)改革進(jìn)行了探索與實(shí)踐。作者總結(jié)對(duì)臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)病原生物學(xué)與免疫學(xué)課程中教學(xué)的一些思考和建議。
1根據(jù)專業(yè)需要安排教學(xué)內(nèi)容
病原生物學(xué)與免疫學(xué)理論性與實(shí)踐性都很強(qiáng),但是教學(xué)大綱的模式化,加之教材的滯后性,導(dǎo)致教學(xué)內(nèi)容與實(shí)踐脫節(jié)[1]。同時(shí),近年來,隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展,病原生物學(xué)與免疫學(xué)成為研究熱點(diǎn),有非常多的新進(jìn)展,病原生物學(xué)與免疫學(xué)在臨床應(yīng)用方面變化較大,使得既有教材更加跟不上臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展[2-3]。根據(jù)這種情況,本教研室擬定以下措施:1.1深入醫(yī)院調(diào)研調(diào)研內(nèi)容有:臨床常見的免疫學(xué)應(yīng)用,如感染性疾病的臨床診療過程,診療的手段、方法與防治原則;預(yù)防接種的意義及應(yīng)用;最常見免疫病,如青霉素過敏、花粉過敏、急性腎小球腎炎等的診療過程、方法及防治原則。1.2以臨床診療過程組織教學(xué)內(nèi)容把原有的免疫系統(tǒng)組成、主要免疫分子的作用、免疫應(yīng)答的發(fā)生發(fā)展過程等教學(xué)內(nèi)容組織形式,改為機(jī)體在遭遇感染或免疫異常時(shí)的病理變化及后果、免疫病發(fā)生和防治原則等重新組織教學(xué)內(nèi)容,對(duì)于與臨床應(yīng)用關(guān)系較少的內(nèi)容進(jìn)行刪減,增加與疾病診治關(guān)系密切的教學(xué)內(nèi)容。這樣以疾病為中心,診療過程為主線的模式,將病原生物學(xué)和免疫學(xué)與臨床實(shí)際緊密聯(lián)系起來,調(diào)動(dòng)學(xué)生對(duì)課程的學(xué)習(xí)積極性,幫助學(xué)生更好地掌握抽象難懂的病原生物學(xué)與免疫學(xué)。
2改革教學(xué)方法,培養(yǎng)學(xué)生自主學(xué)習(xí)
學(xué)生是教學(xué)的主體,學(xué)生對(duì)知識(shí)熟練掌握應(yīng)用是教學(xué)的唯一目的。但是在傳統(tǒng)的教學(xué)模式中,往往以教師為主體,學(xué)生處于被動(dòng)接受知識(shí)的地位,學(xué)習(xí)機(jī)械,知識(shí)面狹窄,難以適應(yīng)臨床課要求[4]。在本教研室的教學(xué)改革中,應(yīng)用“以疾病為中心,診療過程為主線”的模式,除了調(diào)動(dòng)起學(xué)生對(duì)病原生物學(xué)和免疫學(xué)的學(xué)習(xí)積極性,還可以鼓勵(lì)學(xué)生主動(dòng)去尋找相關(guān)學(xué)習(xí)內(nèi)容的資料,對(duì)臨床問題多思考、多分析,與教師、同學(xué)多交流討論,培養(yǎng)學(xué)生自主學(xué)習(xí)的興趣與積極性。此外,由于學(xué)習(xí)本門課時(shí),學(xué)生處于第一學(xué)年,在自主學(xué)習(xí)的方式與技巧上還比較欠缺,因此,在課前應(yīng)組織對(duì)之前學(xué)習(xí)內(nèi)容的溫習(xí),課程結(jié)束時(shí)應(yīng)組織總結(jié)。對(duì)一些相關(guān)性較大的內(nèi)容,指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行總結(jié)、歸納和對(duì)比。讓學(xué)生對(duì)平時(shí)強(qiáng)調(diào)的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行橫向、縱向比較,有意識(shí)地指引他們自己去歸納常見的知識(shí)要點(diǎn)。這樣既培養(yǎng)了學(xué)生自主學(xué)習(xí)的興趣和積極性,又培養(yǎng)了學(xué)生自主學(xué)習(xí)的方式與技巧,強(qiáng)化了知識(shí)的掌握和應(yīng)用。
3改革實(shí)驗(yàn)教學(xué),培養(yǎng)學(xué)生的臨床意識(shí)、操作動(dòng)手能力和創(chuàng)新能力
病原生物學(xué)與免疫學(xué)傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)課往往是講完—個(gè)章節(jié)的理論,之后安排一次實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)均為驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)內(nèi)容零散,各實(shí)驗(yàn)之間缺乏聯(lián)系,以學(xué)生重復(fù)教師演示實(shí)驗(yàn)或教師講學(xué)生作為模式[5-6],這樣的實(shí)驗(yàn)難以引起學(xué)生的興趣,也難以激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情。鑒于此,教師嘗試用綜合性實(shí)驗(yàn)取代原來的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)。如本年度開展的新型實(shí)驗(yàn)課,讓學(xué)生自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)過程,首先分離培養(yǎng)菌株,進(jìn)行染色觀察后接種到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身上,再?gòu)膶?shí)驗(yàn)動(dòng)物身上觀察感染該細(xì)菌后的局部或全身表現(xiàn)。這樣的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容延續(xù)性強(qiáng),知識(shí)成體系,既注重基本技能的訓(xùn)練,又鼓勵(lì)學(xué)生的創(chuàng)新思維,鼓勵(lì)學(xué)生大膽動(dòng)手操作,不但溫習(xí)鞏固了理論課知識(shí),還可提高學(xué)生的技術(shù)應(yīng)用能力,在學(xué)生中獲得廣泛好評(píng)。
4建立網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái),讓學(xué)生多接觸本課程的最新進(jìn)展
當(dāng)代病原生物學(xué)與免疫學(xué)具有極快的發(fā)展性,因此,需要對(duì)其新進(jìn)展、新技術(shù)、新知識(shí)不斷地學(xué)習(xí),這不僅僅是對(duì)教師的要求,還是學(xué)生的學(xué)習(xí)需要,但是往往教材跟不上技術(shù)發(fā)展更新速度。本校正在建設(shè)的網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái),可以讓學(xué)生除了教材上的基礎(chǔ)知識(shí)外,多接觸和學(xué)習(xí)病原生物學(xué)與免疫學(xué)的新知識(shí)、新進(jìn)展,并且對(duì)目前國(guó)內(nèi)的免疫病、感染性疾病流行病學(xué)情況進(jìn)行學(xué)習(xí)了解。同時(shí),本校建設(shè)的網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái)還有豐富的圖片、視頻等資料,可以更為直觀、生動(dòng)地為學(xué)生介紹病原生物學(xué)與免疫學(xué)相關(guān)的臨床知識(shí)。此外,教師還考慮在網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)上設(shè)立自考自查的模塊,讓學(xué)生在學(xué)習(xí)完理論知識(shí)后對(duì)自己的知識(shí)學(xué)習(xí)和掌握情況有充分的了解和認(rèn)識(shí),能及時(shí)查漏補(bǔ)缺,完善自己的學(xué)習(xí)。
5注重在教學(xué)同時(shí)對(duì)學(xué)生進(jìn)行人文道德教育
醫(yī)學(xué)生是未來戰(zhàn)斗在醫(yī)療第一線的醫(yī)務(wù)工作者,對(duì)學(xué)生的人文道德教育,不僅僅是教育學(xué)生如何為人,更重要的是在教學(xué)過程中培養(yǎng)學(xué)生的愛國(guó)熱情和職業(yè)道德[7]。近年來,臨床一線醫(yī)療糾紛頻繁,甚至還有一些影響大并且非常惡劣的醫(yī)療糾紛,在教學(xué)過程中穿插對(duì)學(xué)生的愛國(guó)熱情和職業(yè)道德的教育是相當(dāng)必要的。但是,在這里的人文道德教育如何插入,并且保證不能喧賓奪主影響理論教學(xué),需要長(zhǎng)期探討、反復(fù)實(shí)踐。在此僅以作者經(jīng)驗(yàn)為例:在免疫學(xué)預(yù)防的教學(xué)中,介紹中國(guó)古代接種牛痘預(yù)防天花的歷史,不但可以激發(fā)學(xué)生的興趣,還能激發(fā)學(xué)生的民族自豪感和愛國(guó)熱情;在介紹金黃色葡萄球菌等細(xì)菌耐藥情況時(shí),穿插臨床抗生素合理使用的必要性教育、臨床操作規(guī)范教育等,可以培養(yǎng)學(xué)生的職業(yè)道德和職業(yè)素養(yǎng);在介紹病毒性肝炎、艾滋病等疾病時(shí),穿插醫(yī)療人文關(guān)懷、保護(hù)患者隱私等道德教育,幫助學(xué)生正確理解和處理醫(yī)患關(guān)系,培養(yǎng)職業(yè)道德。總之,只有醫(yī)術(shù),沒有道德素養(yǎng)的醫(yī)學(xué)生是社會(huì)危險(xiǎn)品,必須讓學(xué)生在學(xué)習(xí)醫(yī)學(xué)知識(shí)的同時(shí),多進(jìn)行人文道德學(xué)習(xí),了解醫(yī)學(xué)職業(yè)的特殊性,及早培養(yǎng)起職業(yè)道德和人文素養(yǎng)。這樣才能讓教師培養(yǎng)的學(xué)生真正成為為社會(huì)服務(wù)的醫(yī)學(xué)人才。
6加強(qiáng)教師自身學(xué)習(xí)和素養(yǎng),配合教學(xué)改革發(fā)展
現(xiàn)代醫(yī)藥的發(fā)展和社會(huì)發(fā)展需要高素質(zhì)的高校教師[5]。教師要多形式、多渠道的提高自身的素養(yǎng),同時(shí)通過課堂教學(xué)將綜合素質(zhì)教育思想融入專業(yè)教學(xué)。作為教師應(yīng)當(dāng)時(shí)刻關(guān)注學(xué)科發(fā)展情況、多參加學(xué)科年會(huì)報(bào)告學(xué)習(xí)、多參加各類繼續(xù)教育學(xué)習(xí),盡快學(xué)習(xí)掌握新知識(shí)、新技能,保持自己在知識(shí)和道德素養(yǎng)上的先進(jìn)性,以此更好地教育學(xué)生。總之,病原生物學(xué)與免疫學(xué)的教學(xué)應(yīng)堅(jiān)持學(xué)生發(fā)展為本,以學(xué)生為主體、教師為主導(dǎo)的教育理念,多開展師生交流互動(dòng),采用多種教學(xué)手段、教學(xué)形式和教學(xué)方法,在各種教學(xué)組合的優(yōu)勢(shì)下,發(fā)揮每位教師的教學(xué)特色,更好地教育、教導(dǎo)學(xué)生,讓學(xué)生更好地掌握理論知識(shí)和操作技能,為后面的臨床課程學(xué)習(xí)和臨床工作打好基礎(chǔ)。
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【關(guān)鍵詞】 抗血清 短程免疫 標(biāo)本制備 免疫學(xué)試驗(yàn) 效價(jià)
Abstract:Objective: To explore the methods of producing immune serum and its effect on short-term immunization, in order to meet its experimental teaching needs. Methods: By the means of short-term immunization, rabbits were immunized with E. coli, Sheep red blood cells and yolk antigen instantly for 5 times with small dose, then the serum was picked up to obtain the r-globulin. The titer of antibody was checked up, and were compared with the traditional anti-serum preparation methods. Reslults: The titer of antiserum from E. coli antigen, Sheep red blood cells antigen and yolk antigen reached high up to 1:10240 ,1:1200 and 1:10240 separately . Conclusion: The antiserum prepared by shortterm immunization has high-titer and high-affinity, is applicable to experimental teaching.
Key words:antiserum; shortterm immunization; preparation of samples; immunological tests; titer
抗血清是經(jīng)過抗原免疫的動(dòng)物血清,含有特異性免疫球蛋白(Ig),可直接應(yīng)用于病原體的診斷或感染性疾病的緊急預(yù)防和治療,也可通過進(jìn)一步純化血清中的Ig,用于多種疾病的診斷和治療,是一種非常重要的生物制品。鑒于抗血清在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)中的廣泛應(yīng)用,如何制備抗血清成為學(xué)生必需具備的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。在以往的抗血清制備實(shí)驗(yàn)課中,制備高效價(jià)抗血清基本采用大劑量長(zhǎng)程免疫法,該方法具有產(chǎn)物效價(jià)高、親和力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),但耗時(shí)過長(zhǎng),給研究造成一定的影響。為了探索快速制備抗血清的新方法 ,本研究選取大腸桿菌抗原和綿羊紅細(xì)胞(SRBC)抗原代表顆粒性抗原,選取雞蛋黃抗原代表可溶性抗原[1],采用小劑量短程免疫法制備抗血清 ,以探討該方法的可行性。
1 材料與方法
1.1 試劑與器材
1.1.1 抗原 大腸桿菌(泰山醫(yī)學(xué)院臨床微生物學(xué)教研室保存);綿羊紅細(xì)胞(SRBC);新鮮雞蛋。
1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康家兔32只,雄性,體重2.0~2.5 kg,無免疫史,由泰山醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,隨機(jī)分成4組。
1.1.3 器材與試劑 紫外分光光度計(jì);搖床恒溫水浴箱;離心機(jī);振蕩器;滅菌大試管;LB液體培養(yǎng)基或肉湯培養(yǎng)基;麥?zhǔn)媳葷峁埽?.5%石炭酸溶液;磷酸鹽緩沖液;鹽酸溶液;HRPAb等。實(shí)驗(yàn)用材料均需滅菌處理。
1.2 抗原的制備
1.2.1 大腸桿菌抗原的制備 將大腸桿菌接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)皿上,37 ℃培養(yǎng)18~24 h,取單菌落接種于LB液體培養(yǎng)基或肉湯培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)18~24 h,按照1%的比例轉(zhuǎn)種于LB液體培養(yǎng)基或肉湯培養(yǎng)基中,37 ℃培養(yǎng)18~24 h,收集培養(yǎng)液。沸水浴1 h后3000 r/min離心10 min,棄去上清。麥?zhǔn)媳葷岱ǎ檬克嵘睇}水稀釋至109個(gè)/ml,取少許做無菌實(shí)驗(yàn),其余菌懸液放冰箱保存。
1.2.2 SRBC抗原的制備 無菌抗凝綿羊血2000 r/min離心5 min,吸去上清,加入等量無菌生理鹽水混勻,2000 r/min離心5 min,吸去上清,如此連續(xù)洗3次,最后一次可離心10 min以使紅細(xì)胞密集管底,直至上清液透明無色再吸去上清液,留密集紅細(xì)胞備用。用無菌生理鹽水將紅細(xì)胞配成20 %SRBC懸液,即為試驗(yàn)用的SRBC懸液。
1.2.3 雞蛋黃抗原的制備 取新鮮雞蛋一個(gè),用75 %酒精消毒,在無菌條件下,于氣室一端擊一小孔,用無菌吸管將蛋清吸出后,將蛋黃倒入一裝有玻璃珠的無菌錐形瓶?jī)?nèi)搖勻,用生理鹽水進(jìn)行1∶5稀釋,置4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
1.3 免疫方案表1 短程免疫方案
1.4 試血
末次免疫后第3天,耳動(dòng)脈采血2 ml,37 ℃溫育1 h后,2000 r/m離心10 min,吸取離心后上清液0.2 ml于無菌試管中,再加入0.8 ml生理鹽水,作 1∶5 稀釋。
1.4.1 初步測(cè)定大腸桿菌抗原抗血清效價(jià) 采用試管凝集試驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定。
1.4.2 初步測(cè)定SRBC抗原抗血清效價(jià) 采用試管凝集試驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定。
1.4.3 初步測(cè)定蛋黃抗原抗血清效價(jià) 采用瓊脂凝膠雙向擴(kuò)散試驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定。
1.5 采集抗血清
末次免疫后第六天,心臟采血法[2]采取20 ml血液于離心管中,放37 ℃溫箱自然凝固,出現(xiàn)血凝塊后3000 r/m離心20 min,將上清液轉(zhuǎn)移到潔凈試管中,-20 ℃冰箱保存。
1.6 鑒定抗血清終效價(jià)
1.6.1 ELISA法鑒定大腸桿菌、蛋黃抗血清終效價(jià)[1,3]
1.6.2 補(bǔ)體溶血試驗(yàn)鑒定SRBC抗血清終效價(jià)
2 結(jié) 果
2.1 抗血清效價(jià)的初步檢測(cè)結(jié)果
經(jīng)大腸桿菌抗原、SRBC抗原、雞蛋黃抗原免疫后的抗血清效價(jià)分別達(dá)1∶1280、1∶640、1∶32。
2.2 抗血清終效價(jià)結(jié)果
經(jīng)大腸桿菌抗原、雞蛋黃抗原、SRBC抗原免疫后的抗血清效價(jià)分別達(dá)1∶10240、1∶10240和1∶1200。
3 討 論
目前,高效價(jià)抗血清的制備基本采用長(zhǎng)程免疫法,抗血清的制備過程耗時(shí)一個(gè)多月。雖然長(zhǎng)程免疫法制備的抗血清效價(jià)高、親和力強(qiáng),但是其操作過程較長(zhǎng) ,期間可能有動(dòng)物死亡等不利因素。短程免疫法在文獻(xiàn)中尚不多見,將免疫時(shí)間縮短來制備抗血清的方法和效果是值得探討的。
本研究選擇大腸桿菌抗原和SRBC抗原代表顆粒性抗原,選擇蛋黃抗原代表可溶性抗原,采用短程免疫法,5天內(nèi)分組連續(xù)免疫家兔,末次免疫后第3天試血,抗大腸桿菌抗原和綿羊紅細(xì)胞抗原抗血清的效價(jià)已分別達(dá)到1∶1280和1∶640,而抗蛋黃抗原抗血清的效價(jià)僅達(dá)到 1∶32,這與抗原的種類及物理性狀對(duì)免疫原性的影響有關(guān)[4],大腸桿菌抗原SRBC抗原為顆粒性抗原,蛋黃抗原為可溶性抗原;顆粒性抗原的免疫原性較可溶性抗原強(qiáng),故試血時(shí)效價(jià)前者高于后者。但是末次免疫后第6天采血,用補(bǔ)體溶血試驗(yàn)測(cè)得綿羊紅細(xì)胞免疫動(dòng)物的抗血清(溶血素) 效價(jià)達(dá)1∶1200,用特異性和靈敏度均較高的 ELISA 間接法測(cè)定,大腸桿菌抗原和雞蛋黃抗原抗血清的效價(jià)均達(dá)到1∶10240。因此可見,短程免疫法不僅縮短了免疫期限,而且具有較好的免疫效果,可制備出高效價(jià)、高親和力的抗血清。
通過本次實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)過程和結(jié)果來看,整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程的操作簡(jiǎn)單易行, 效果高,用時(shí)短。更重要的是,本實(shí)驗(yàn)包含了抗原的制備、免疫動(dòng)物、抗血清的采集、抗體的鑒定、分離提純、抗體的效價(jià)檢測(cè)等內(nèi)容,是一項(xiàng)綜合性系統(tǒng)性實(shí)驗(yàn),是免疫學(xué)及免疫學(xué)技術(shù)的濃縮[5]。該實(shí)驗(yàn)既提高了學(xué)生的理論水平,又培養(yǎng)了學(xué)生運(yùn)用理論指導(dǎo)實(shí)踐,在實(shí)踐過程中發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力。因此,我們認(rèn)為這種系統(tǒng)性實(shí)驗(yàn)包括了免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,且實(shí)驗(yàn)期限較短,適用于實(shí)驗(yàn)教學(xué)。
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關(guān)鍵詞 卵黃免疫球蛋白 免疫 藥理
1893年Klemperer提出母雞血清中的抗體可通過產(chǎn)卵方式傳給后代,在胚胎發(fā)育早期作為主要的免疫球蛋白為雛雞提供被動(dòng)的免疫保護(hù)。因該抗體蛋白與哺乳動(dòng)物IgG分子類似,故稱其為鳥類IgG。而1969年Leslie等[1]的實(shí)驗(yàn)證明,鳥類IgG與哺乳動(dòng)物IgG的分子不同,所以又提出了卵黃免疫球蛋白(IgY)這個(gè)概念。由于當(dāng)時(shí)IgY提取困難,故未受到重視。直到1990年后,Akita等[2]建立了水稀釋法,使IgY的提取變得簡(jiǎn)單易行,從而掀起了IgY制備和應(yīng)用的熱潮。鑒于IgY具有產(chǎn)量高、穩(wěn)定性好、免疫學(xué)特性獨(dú)特等優(yōu)點(diǎn),該蛋白被稱為最具潛力的哺乳動(dòng)物抗體替代品。1996年歐洲實(shí)驗(yàn)方法替換確認(rèn)中心(EC-VAM)推薦使用IgY替代哺乳動(dòng)物IgG。1999年出于對(duì)動(dòng)物保護(hù)的考慮,IgY技術(shù)被瑞士聯(lián)邦政府接受。德國(guó)、日本、瑞典和南非等國(guó)家對(duì)IgY的研究也明顯領(lǐng)先,這些研究進(jìn)展將使多克隆抗體的生產(chǎn)進(jìn)入無害化、易操作的新時(shí)代,雞也被稱作新一代的抗體“加工廠”[3]。
IgY的來源和產(chǎn)量
IgY來源于雞卵黃。與哺乳動(dòng)物(兔、牛等)相比,產(chǎn)蛋母雞成本低,是有效的多克隆抗體生產(chǎn)者。Li等[4]研究證實(shí),卵黃的重量與母雞產(chǎn)蛋天數(shù)的百分比是IgY產(chǎn)量的2個(gè)重要因素。母雞初次免疫10天后,即可獲得高濃度的抗體,且效價(jià)穩(wěn)定,可持續(xù)6~28周。另外,免疫雞的飼養(yǎng)簡(jiǎn)單,花費(fèi)少,且符合3R[替代(replacing)、減少(reducing)、改善(refining)]的動(dòng)物保護(hù)原則[5]。IgY在雞卵黃中的濃度約為5~20 mg/ml,每枚雞卵黃中可提純100~150mg,12枚雞卵黃約可提純1g的IgY,與100 ml血清中所含IgG的含量相當(dāng)。每只母雞每年可產(chǎn)卵280枚,即可生產(chǎn)約40 g的IgY;而每只兔每2~3周抽血1次,一年僅可生產(chǎn)1.3 g抗體,所以1只雞的年產(chǎn)蛋量所獲得的IgY可相當(dāng)于40只兔的年產(chǎn)抗體量。
理化性質(zhì)
IgY為可溶性蛋白,親水性比IgG好,且等電點(diǎn)較IgG低,約為5.2。IgY化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定:①耐酸性好,pH值
免疫學(xué)特性
Kronvall等[7]和Akerstrom等[8]分別證明,IgY不與蛋白A和蛋白G結(jié)合,是單克隆抗體和多克隆抗體檢測(cè)的有力工具。20世紀(jì)90年代,研究者又發(fā)現(xiàn)IgY的其他免疫學(xué)特性:①不與類風(fēng)濕因子結(jié)合。類風(fēng)濕因子是一種自身抗體,可與IgG的Fc片段結(jié)合,產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。類風(fēng)濕因子的干擾使免疫測(cè)定中易產(chǎn)生交叉反應(yīng)。Larsson等[4]利用夾心ELSIA證明,類風(fēng)濕因子不與IgY結(jié)合,使用IgY作免疫檢測(cè)可避免假陽性。②不激活補(bǔ)體系統(tǒng)。新鮮的血清樣品均含未激活的補(bǔ)體系統(tǒng),通常IgG會(huì)激活補(bǔ)體系統(tǒng),激活的補(bǔ)體組分與抗體結(jié)合,阻礙了抗體結(jié)合表位。而IgY則不激活補(bǔ)體系統(tǒng),使用IgY可避免補(bǔ)體系統(tǒng)對(duì)固相免疫測(cè)定的干擾[4]。③不結(jié)合細(xì)菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面Fc受體,使得IgY在雙重免疫組化方面比IgG更具優(yōu)勢(shì)[9]。④與IgG幾乎無交叉反應(yīng),常用于循環(huán)復(fù)合物的測(cè)定[10]。⑤使用少量抗原即可產(chǎn)生大量抗體。高度保守的哺乳動(dòng)物蛋白在兔中不能引起免疫應(yīng)答,但在鳥類中卻很容易獲得抗這些蛋白的抗體。對(duì)各種哺乳動(dòng)物的抗原均有效,如總量30~475μg增殖細(xì)胞核抗原可產(chǎn)生雞抗弱免疫原性RNA多聚酶Ⅱ的抗體[11]。
IgY在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用
IgY在人類醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)學(xué)、食品科技和生物制劑等方面應(yīng)用廣泛。IgY可作為特異抗體已成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中新的研究熱點(diǎn)[12~14]。
IgY在疾病相關(guān)蛋白檢測(cè)中的應(yīng)用:血漿白蛋白(HSA)和IgG等10種高濃度蛋白約占血漿總蛋白的90%,由于部分低濃度蛋白很可能是癌癥、心肌梗塞等重大疾病的關(guān)鍵指示分子。如何祛除高濃度蛋白,檢出低濃度蛋白,在疾病的早期診斷和療效考核中具有重要意義。制備抗HSA和IgG的雞卵黃抗體(IgY),金磁微粒載體固定,可特異結(jié)合HSA和IgG,以便除去血漿中大部分的HSA和IgG,使低豐度蛋白富集,有效提高低豐度蛋白的檢出率,這為血漿蛋白質(zhì)組學(xué)研究提供了一種新的方法[15]。Hb Bart’S胎兒水腫綜合征是最嚴(yán)重的一種α型地中海貧血病。從該病患者的紅細(xì)胞溶解液中提取γ鏈四聚體(γ4,Hb Bartt’S),免疫雞獲得特異IgY抗體,該抗體可特異結(jié)合γ球蛋白、Hb Bartt’S和血紅蛋白F,用直接ELISA檢測(cè)336份人紅細(xì)胞溶血產(chǎn)物,其敏感性高達(dá)100%,特異性為96%,比傳統(tǒng)滲透脆性試驗(yàn)法的特異性(約86%)高。該方法的建立有利于在地中海貧血病流行的國(guó)家簡(jiǎn)單快速的檢測(cè)α型地中海貧血病[16]。
IgY在病原體檢測(cè)中的應(yīng)用:療效考核是目前日本血吸蟲病免疫診斷的瓶頸,建立有效的評(píng)價(jià)方法是寄生蟲學(xué)界廣泛關(guān)注的問題[17]。近兩年已有研究者使用IgY以改進(jìn)血吸蟲病免疫診斷方法。即用純化的抗可溶性蟲卵抗原(SEA)的IgY為捕捉抗體,以酶標(biāo)抗SEA單克隆抗體為檢測(cè)抗體的雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(S-ELISA)檢測(cè)急性血吸蟲病患者、慢性血吸蟲病患者和健康人的血清,其中急性血吸蟲病患者和慢性血吸蟲病患者的血清循環(huán)抗原的陽性率分別為100%(9/9)和84.4%(38/45),特異性為96%(48/50)[18]。而常用的間接血清凝集試驗(yàn)(IHA)的敏感性和特異性分別為69.6%和89.4%[19]。可見前者比后者更具敏感性和特異性,為解決血吸蟲病療效考核的問題帶來了希望。
IgY在胃腸道疾病中的應(yīng)用:最新研究顯示,通過口服抗菌抗體或抗病毒抗體可替代抗生素藥物而有效預(yù)防胃腸道感染。但傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)工藝復(fù)雜,價(jià)格昂貴。而IgY因其來源便宜、易制備、穩(wěn)定性好、耐酸和耐胃蛋白酶等優(yōu)點(diǎn)成為制備口服抗體的最佳選擇。如輪狀病毒是致嬰幼兒秋冬季腹瀉的主要病原體,全球每年約有100萬兒童患輪狀病毒性腹瀉,至今尚缺乏有效的治療手段。新藥百貝寧主要成分是抗輪狀病毒抗體(IgY),治愈率高達(dá)88.9%,在臨床應(yīng)用中未發(fā)現(xiàn)有不良反應(yīng)[20]。
IgY在呼吸道傳染病中的應(yīng)用:Nilsson等[21]在瑞典對(duì)17例膽囊纖維癥患者給予口服IgY以預(yù)防銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa),通過長(zhǎng)達(dá)12年的觀察,發(fā)現(xiàn)17人中僅有2人有銅綠假單胞菌慢性植入情況,而對(duì)照組23人中卻有7人。所有試驗(yàn)組患者肺功能均正常,且身體質(zhì)量指數(shù)正常或接近正常。表明抗銅綠假單胞菌的特異IgY能有效預(yù)防銅綠假單胞菌引起的呼吸道傳染病。
IgY在免疫治療中的應(yīng)用:因雞抗體耐酸、耐熱且性能穩(wěn)定,可經(jīng)口服用于預(yù)防或治療年幼動(dòng)物或人類的腸道傳染病,如嬰兒防病食品、齲齒預(yù)防、新生乳豬致死性大腸桿菌感染的預(yù)防以及魚病治療等。特別是抗生素或其他藥物的使用存在問題時(shí),IgY成為首選。在非典流行期間,雞卵黃抗體還被研制用于抑制SARS病毒。
在人類保健上的應(yīng)用:大量研究結(jié)果顯示,雞IgY對(duì)病原體感染的防御無動(dòng)物的種屬差異,故應(yīng)用雞高免IgY防治嬰幼兒疾病是完全可行的。隨著SPF雞群的使用,用卵黃研制安全可靠的人用抗病(尤其是腸道疾病)生物制品必將獲得廣泛的應(yīng)用。由修正藥業(yè)生產(chǎn)的口服免疫球蛋白——修正修修愛優(yōu)爾膠囊,其主要有效成分即為免疫球蛋白,且含量高,每100g中含有19.8gIgG,,對(duì)提高免疫力低下人群的抵抗力具有很好的效果。
中毒解救:針對(duì)蛇毒、蜘蛛毒等生物毒素的lgY與藥物開發(fā)已開展多年。王桂平等[22]使用嗜硫色譜法提純抗眼鏡蛇王毒素lgY,在小鼠試驗(yàn)中,體外6mglgY中和4LD50毒素(約1.6mg/kg),體內(nèi)可有效中和約3LD50毒素(約1.2mg/kg)。Paul等[23]使用免疫親和層析純化抗蝰蛇毒素lgY,對(duì)小鼠進(jìn)行皮下注射免疫保護(hù)試驗(yàn),可中和2LD50毒素,保護(hù)率為100%。Meenatchisundara等[24]制得純化的抗蝰蛇毒素lgY和鱗狀蝮蛇毒素lgY,能夠中和蝰蛇和鱗狀蝮蛇毒素,同時(shí)有抑制水腫、減少溶血和降低磷脂酶活性的作用。De Almeida等[25]使用抗非洲蝰蛇和眼鏡蛇毒素的lgY,1440μg的lgY能夠中和62.2LD50的毒素,同時(shí)使用抗毒液的lgY幾乎沒有免疫副作用。
結(jié)語和展望
經(jīng)過20多年的發(fā)展,IgY已在世界范圍引起重視。國(guó)內(nèi)外研究文獻(xiàn)數(shù)量不斷增多,IgY的應(yīng)用也日益廣泛。特異IgY的制備為治療和診斷各類疾病提供了新的思路。在免疫診斷方面,IgY是傳統(tǒng)哺乳動(dòng)物抗體最好的替代品,它改進(jìn)了現(xiàn)代免疫診斷檢測(cè)方法,已在蛋白質(zhì)印跡分析、免疫組化、膠體金標(biāo)記和免疫電泳等檢測(cè)方法中廣泛應(yīng)用。在免疫治療方面,IgY是抗生素藥物最好的替代品,在尋找藥物靶位和腫瘤治療中應(yīng)用前景廣闊,但在目前均處于實(shí)驗(yàn)研究階段,距臨床應(yīng)用還較遙遠(yuǎn)。但相信,IgY憑借其自身優(yōu)勢(shì),將會(huì)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中發(fā)揮更大的作用。
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伴隨著世界經(jīng)濟(jì)與學(xué)技術(shù)的蓬勃發(fā)展,醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展在現(xiàn)當(dāng)代取得了一系列舉世矚目的成就,就臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)工作而言,已成為現(xiàn)代醫(yī)院診療工中不可或缺的重要組成部分。隨著現(xiàn)代醫(yī)療診斷技術(shù)的不斷發(fā)展,如何有效地對(duì)臨床免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量進(jìn)行控制已直接影響到臨床的診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性,同時(shí)也間接影響到最終地臨床治療效果。由于在整個(gè)標(biāo)本采集的過程中免疫檢驗(yàn)標(biāo)本從采集到結(jié)果的檢驗(yàn)需經(jīng)歷的環(huán)節(jié)較多,這就對(duì)臨床醫(yī)師對(duì)患者的生理、病理情況以及爭(zhēng)端方法的熟悉程度及綜合技能提出了很高的要求;
2 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)的建立與發(fā)展
臨床醫(yī)學(xué)免疫檢驗(yàn)自建立至今已經(jīng)歷了一百個(gè)春秋。自從19世紀(jì)80年代后期開始,隨著很多學(xué)者專家開始從免疫動(dòng)物或者攜帶有傳染病病毒的患者血清中發(fā)現(xiàn)有能夠治愈患者疾病的特異性結(jié)合病原體或其一系列的衍生產(chǎn)物的物質(zhì),而這些物質(zhì)及為我們現(xiàn)在所熟識(shí)的抗體。就現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理念來講,將能夠引起人體體內(nèi)產(chǎn)生抗體的物質(zhì)統(tǒng)稱為抗原。正是由于抗原以及抗體的發(fā)現(xiàn),才促使現(xiàn)代醫(yī)學(xué)專家學(xué)者開始對(duì)人類或動(dòng)物體外抗原刺激體內(nèi)反應(yīng)產(chǎn)生抗體這一現(xiàn)象進(jìn)行系統(tǒng)深入的研究。隨著免疫學(xué)理論以及分子生物學(xué)還有其它以現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)為依托的新興臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)繼能夠有日新月異的發(fā)展。
3 提高臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量的方法
3.1標(biāo)本采集與設(shè)備管理的優(yōu)化
作為檢驗(yàn)分析前對(duì)質(zhì)量控制的要求來說,檢驗(yàn)人員首先需要做到對(duì)標(biāo)本的采集和保存工作;密切注意整個(gè)樣本采集過程中的樣本采集的時(shí)間、止血帶的使用時(shí)間和方法、采血的姿勢(shì)、抗凝劑和穩(wěn)定劑的選用情況。免疫檢驗(yàn)工作,首先要求檢驗(yàn)人員注意對(duì)整個(gè)標(biāo)本的采集和處理工作。不同的采樣試驗(yàn)對(duì)所采集的標(biāo)本的要求有所不同。對(duì)于大多數(shù)以病人血清為標(biāo)本的免疫檢驗(yàn)而言,采集血清的時(shí)間應(yīng)在清晨被采集者未進(jìn)食前為宜,保持針筒的干燥性,抽血完成后需要馬上除去針頭并將所采集到的血液注入到干燥的試管內(nèi),注意在整個(gè)注血過程中采樣人員的注血速度不宜過快,不能對(duì)所采樣本進(jìn)行振搖等一系列不允許的動(dòng)作,以防溶血。在將整個(gè)血清分離完成后,應(yīng)及時(shí)送往檢測(cè),如需要求對(duì)所采試樣進(jìn)行保存的話,可將試樣置于冰箱內(nèi)冷藏,不宜速凍,以防止因?yàn)榉磸?fù)凍融而對(duì)整個(gè)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生不良的影響。作為對(duì)測(cè)定的血清標(biāo)本的收集過程來說,激素類和治療藥物的使用要特別注意收集時(shí)間的變化以及檢驗(yàn)人員的變化對(duì)整個(gè)測(cè)定結(jié)果的影響;其次,在采購(gòu)人員對(duì)于相關(guān)儀器設(shè)備及試劑的選擇方面也同樣對(duì)整個(gè)測(cè)量結(jié)果有著十分大的影響;作為整個(gè)檢驗(yàn)的執(zhí)行者來說儀器設(shè)備性能的好壞將直接對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的精確度造成非常大的影響。在整個(gè)檢測(cè)結(jié)束后要注意地成套儀器的保養(yǎng)和維護(hù)工作,工作人員要經(jīng)常對(duì)溫度計(jì)、水浴箱、酶標(biāo)儀、稀釋棒、恒溫箱、吸量管、分光光度計(jì)等臨床免疫檢驗(yàn)的儀器設(shè)備進(jìn)行核定、校正以及檢查等工作,從而確保儀器設(shè)備的使用性能,減少實(shí)驗(yàn)過程中因?yàn)閮x器所引起的誤差,繼而來保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的目的,最終為意識(shí)的治療及患者的康復(fù)提供最有用的保障。對(duì)于當(dāng)今品魚龍混雜,質(zhì)量不一的試劑市場(chǎng)來說,慎重選擇且經(jīng)常對(duì)試劑性能進(jìn)行有關(guān)試劑的檢定工作是保證檢驗(yàn)成功的重要因素。
3.2 提高技術(shù)人員的素質(zhì)
人是整個(gè)免疫檢驗(yàn)過程中的主體,是整個(gè)免疫檢驗(yàn)過程中最積極、表現(xiàn)最為活躍的因素。在免疫檢驗(yàn)過程工作的所有環(huán)節(jié),都需要靠人來對(duì)整個(gè)試驗(yàn)進(jìn)行操作和把握,最終實(shí)現(xiàn)對(duì)整個(gè)臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制的目標(biāo)。因此,在整個(gè)臨床免疫檢測(cè)過程中檢驗(yàn)技術(shù)人員的綜合素質(zhì)與業(yè)務(wù)能力會(huì)對(duì)整個(gè)免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量和結(jié)果產(chǎn)生重大的影響。因此,就要求臨床免疫檢驗(yàn)的工作人員要每天按時(shí)對(duì)相關(guān)檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行消毒、搞好實(shí)驗(yàn)室的衛(wèi)生;做好相關(guān)實(shí)驗(yàn)儀器的定期檢查工作:如冰箱、恒溫箱、水浴箱、酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡等,做好對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)儀器的記錄使用情況,并如實(shí)填寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告,按規(guī)定進(jìn)行免疫檢驗(yàn)的質(zhì)控工作,并分析情況做好記錄,簽字等工作。
4 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)與生物技術(shù)
以現(xiàn)代新型科學(xué)技術(shù)為依托的臨床醫(yī)學(xué)免疫檢驗(yàn)技術(shù)的廣泛應(yīng)用,對(duì)現(xiàn)代免疫學(xué)研究的發(fā)展起了非常大的推動(dòng)作用飛,其結(jié)果又在更深的層次以及更為廣范的領(lǐng)域內(nèi)促進(jìn)了現(xiàn)代高新生物醫(yī)療技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,能夠使諸如細(xì)胞工程技術(shù)以及基因工程技術(shù)為代表的現(xiàn)代高科技技術(shù)得到更廣泛應(yīng)用。近年來伴隨著疫苗、基因工程抗體治療以及重組細(xì)胞因子研制為主的生物工程制品產(chǎn)業(yè)有了蓬勃的發(fā)展,極大地推動(dòng)了現(xiàn)代免疫學(xué)防治的開展,對(duì)許多傳染性疾病的傳播起到了強(qiáng)有力的遏制作用,從而為挽救更多的生命做出了巨大的貢獻(xiàn)。
1 素質(zhì)教育應(yīng)用在免疫檢驗(yàn)學(xué)中的目的
現(xiàn)階段,把素質(zhì)教育應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)教學(xué)的過程中,可以有效的對(duì)僅重視培養(yǎng)學(xué)生專業(yè)技能,而忽略學(xué)生創(chuàng)新能力培養(yǎng)等情況進(jìn)行改善,從而把學(xué)生培養(yǎng)成為具備豐富的自然科學(xué)素養(yǎng)、良好醫(yī)德以及寬厚人文素養(yǎng)的綜合型人才,以此確保學(xué)生可以靈活的對(duì)所學(xué)知識(shí)進(jìn)行應(yīng)用,通過所學(xué)知識(shí),有效的對(duì)臨床校驗(yàn)中所遇到的難題進(jìn)行分析與解決[1]。與此同時(shí),還應(yīng)該對(duì)學(xué)生的社會(huì)適應(yīng)能力進(jìn)行培養(yǎng),確保學(xué)生具備較強(qiáng)的與他人溝通與交流的能力,并且具備更高的綜合素質(zhì)以及良好的社會(huì)價(jià)值觀。
2 素質(zhì)教育在免疫檢驗(yàn)學(xué)中的具體應(yīng)用
2.1培養(yǎng)學(xué)生的辯證思維模式 對(duì)醫(yī)學(xué)上的辯證思維模式進(jìn)行培養(yǎng),即讓學(xué)生可以以哲學(xué)的角度出發(fā),辯證的對(duì)問題進(jìn)行思考與認(rèn)識(shí),從而使學(xué)生更加充分的對(duì)其自身的創(chuàng)造力與想象力進(jìn)行發(fā)揮。比如,在正常的情況下,免疫自穩(wěn)功能以及免疫防御功能具備著對(duì)外來病原微生物進(jìn)行抵御以及對(duì)自身衰老細(xì)胞進(jìn)行清除的作用,還其還可以導(dǎo)致出現(xiàn)自身免疫病以及超敏反應(yīng)[2]。同時(shí),異種動(dòng)物血清,不僅可以當(dāng)作抗體,還可以當(dāng)作抗原。教師通過舉例說明,則可以使學(xué)生更加充分的對(duì)事物的對(duì)立統(tǒng)一原則以及雙重性進(jìn)行了解。除此之外,教師還應(yīng)該在應(yīng)用教材進(jìn)行教學(xué)的前提下,把辯證的哲學(xué)理論與免疫學(xué)教學(xué)有機(jī)的融合在一起,從而引導(dǎo)學(xué)生形成完全滿足醫(yī)學(xué)發(fā)展的思維模式。
2.2培養(yǎng)學(xué)生的職業(yè)精神與職業(yè)道德 醫(yī)生的最基本的職業(yè)素養(yǎng)則是醫(yī)德高尚。利用專業(yè)課進(jìn)行醫(yī)德教育,則能夠有效的對(duì)以往傳統(tǒng)的德育說教具有的弊端進(jìn)行克服,從而使其自身具備的重要作用得到充分的發(fā)揮[3]。在免疫學(xué)不斷發(fā)展的過程中,有著大量的感人事例,比如,英國(guó)醫(yī)生琴納,20多年一直堅(jiān)持不懈的努力,最終研發(fā)出了預(yù)防天花的接種牛痘苗,從而成功的挽救了無數(shù)的生命,從而使學(xué)生可以更加充分的意識(shí)到從事醫(yī)學(xué)工作的職業(yè)風(fēng)險(xiǎn)以及職業(yè)榮譽(yù),并正確的對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作人員所具備的重要職責(zé)進(jìn)行認(rèn)識(shí)。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)是面向病人的,其檢驗(yàn)結(jié)果的正確與否,將會(huì)對(duì)患者產(chǎn)生很大的影響,所以,醫(yī)學(xué)工作人員必須具備嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)以及細(xì)致認(rèn)真的職業(yè)精神。例如,在進(jìn)行實(shí)訓(xùn)教學(xué)的過程中,間接凝聚與直接凝聚都會(huì)出現(xiàn)凝聚結(jié)果,但是在進(jìn)行臨床診斷的過程中,卻具備著完全不同的意義,引導(dǎo)學(xué)生積極的進(jìn)行討論,既可以幫助學(xué)生更加深入的對(duì)專業(yè)知識(shí)進(jìn)行理解與掌握,還可以有效的對(duì)學(xué)生認(rèn)真嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牧?xí)慣進(jìn)行培養(yǎng)[4]。
2.3完善課程考核方案 在進(jìn)行免疫檢驗(yàn)課程教學(xué)的過程中,考核方案應(yīng)該選擇實(shí)訓(xùn)成績(jī)與平時(shí)成績(jī)以及期末閉卷考試等結(jié)合的形式,考試的總分?jǐn)?shù)為100分,其中實(shí)訓(xùn)成績(jī)的分?jǐn)?shù)應(yīng)占總分?jǐn)?shù)的40%,其主要包含單項(xiàng)考核與實(shí)訓(xùn)報(bào)告等;平時(shí)成績(jī)的分?jǐn)?shù)應(yīng)占總分?jǐn)?shù)的10%,其主要包含答問、出勤與練習(xí)等;期末考試成績(jī)的分?jǐn)?shù)應(yīng)占總分?jǐn)?shù)的50%。同時(shí),理論考試的時(shí)間應(yīng)設(shè)置為100min,其主要對(duì)學(xué)生掌握基礎(chǔ)知識(shí)的程度進(jìn)行檢驗(yàn),所以應(yīng)該盡可能的設(shè)置一些綜合性的問題,從而有效的對(duì)學(xué)生解決實(shí)際問題以及具體分析的能力進(jìn)行培養(yǎng)[5]。除此之外,還應(yīng)該對(duì)臨床檢驗(yàn)進(jìn)行模擬,其考核應(yīng)該通過臨床檢驗(yàn)技師依照相關(guān)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)來進(jìn)行,主要對(duì)學(xué)生的溝通交流能力、解決問題能力以及實(shí)際操作能力等進(jìn)行檢查。
2.4完善實(shí)訓(xùn)教學(xué)模式 免疫學(xué)檢驗(yàn)具備著非常強(qiáng)的實(shí)踐性,而實(shí)訓(xùn)教學(xué)不僅可以有效的對(duì)學(xué)生創(chuàng)新能力進(jìn)行培養(yǎng),還可以有效的對(duì)學(xué)生的實(shí)事求是、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)以及一絲不茍的科學(xué)作風(fēng)進(jìn)行培養(yǎng)。通過頂崗實(shí)習(xí)以及院校結(jié)合等教學(xué)模式,定期的組織學(xué)生到相關(guān)的醫(yī)院檢驗(yàn)科進(jìn)行參觀學(xué)習(xí),以此讓學(xué)生更加充分的對(duì)檢驗(yàn)工作環(huán)境以及工作流程等進(jìn)行了解。在進(jìn)行實(shí)訓(xùn)教學(xué)的過程中,應(yīng)該選擇項(xiàng)目導(dǎo)向與任務(wù)引領(lǐng)相結(jié)合的教學(xué)法,利用實(shí)訓(xùn)教學(xué),有效的對(duì)學(xué)生職業(yè)能力進(jìn)行培養(yǎng)。在進(jìn)行實(shí)訓(xùn)教學(xué)的過程中,應(yīng)該對(duì)探索性試驗(yàn)進(jìn)行重視,比如,制備動(dòng)物免疫血清,則要求學(xué)生完成對(duì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行設(shè)計(jì),以此制備出免疫佐劑,并對(duì)試血效價(jià)測(cè)定進(jìn)行設(shè)計(jì),最后對(duì)血清進(jìn)行收集等。
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