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[關鍵詞]氧化應激;心肌細胞;prohibitin;表達;分布變化
[中圖分類號]R329
[文獻標識碼]A
[文章編號]1674-0742(2013)06(b)―0186-02
當生物體受到損傷時,細胞內的代謝產物會增多,或者在細胞的抗氧化能力不足時,也會造成細胞內的活性氧堆積。這種情況會毒害細胞,造成細胞損傷。這種不平衡現象叫做氧化應激。經過醫學界多年研究,統計得知,激烈運動,缺血,缺氧等都會造成襲擊細胞損傷,從而產生氧化應激反應。通過仔細研究,發現線粒體是氧化應激的主要攻擊目標,細胞內的氧份不平衡會使線粒體的結構和功能受損,目前醫學界還不能確定損傷原理。該研究主要對大鼠的心肌細胞核線粒體做了嚴謹的實驗,發現慢性束縛應激大鼠心肌細胞線粒體prohibitin表達水平明顯升高,從而分析應激心肌細胞prohibitin被氧化過程中的表達與分布變化,及其生物學意義。現報道如下。
1資料與方法
1.1一般資料
本實驗動物采用Wistar大鼠,體重約為11―15g,實驗共用50只大鼠,乳酸脫氫酶試劑盒從上海科華東菱診斷用品有限公司選購。prohibitin單克隆抗體從上海新肽生物科技有限公司購進,兔抗人環氧化物酶一2單克隆抗體從上海億欣生物科技有限公司購進,辣根過氧化物酶標記羊抗鼠二抗則從上海史瑞可生物科技有限公司購進,其他實驗材料全部從美國Sigma公司購進。
1.2方法
①心肌細胞的培養。首先將大鼠心臟取出,并磨碎,用濃度為0.25的胰酶消化液來講心肌細胞分離,并將細胞放于濃度為10的胎牛血清MEM培養液中培養,經混合液放于溫度為37℃,C02濃度為5的環境中進行培養。最后選取自律性搏動>100b/min的心肌細胞用于實驗。 ②細胞死亡檢查方法。將心肌細胞放置于含有濃度為0.1%的多聚賴氨酸的玻璃板上,按照上述建立模型的方法對細胞進行處理。并將其中加入濃度為鋤的多聚甲醛固定液,并放置30rain,然后將固定液清除,振蕩15min。加入Hoechst33258染色液,并再次振蕩15min。最后放在顯微鏡下觀察。并記錄細胞死亡的數量,計算死亡率。 ③乳酸脫氫酶活躍性檢測。采用先進的試驗方法,按照采買的乳酸脫氫酶試劑盒的要求進行檢測。將體積為1mL的實驗液和200μL的心肌細胞培養溶液按照規格加入1cm的光程比色杯中,并攪拌均勻。并將其放置在溫度為37℃的環境下3s,記錄初始時期的吸光度,在防止1分,2分,3分時分別記錄吸光度,并以每分鐘為單位計算出吸光度的變化程度。 ④心肌細胞活力檢測。運用MTT實驗來檢測心肌細胞的活力。首先將大鼠心肌細胞放置于96孔板之上,并根據研究的實際情況來確定培養時間。將原來的培養溶液換成沒有血清MEN培養基,并在96孔板的每個孔中加入MTY溶液,將其放置在溫度為37℃,CO2密度為5%的環境下4h,停止培養,將孔內的培養液上層溶液消息提取出來,再向每個孔中加入150μL的DM-SO,充分振蕩,時間為10min,使后加入的液體充分溶解,并用專業儀器檢測各孔的吸光度,并將其記錄。
⑤通過ATPase實驗類測定線粒體的活性從而推斷出線粒體氧化磷酸化的作用。 ⑥最后運用流式細胞技術來判定線粒體的跨膜電勢。 ⑦利用蛋白質印跡試驗檢測氧化應激心肌細胞及線粒體中prohibitin表達變化情況,并做好記錄。
1.3統計方法 使用SPSPSSll.0軟件對所得數據進行統計,計量資料以(x±s)表示,進行t檢驗,計數資料進行x2檢驗。
2結果
2.1氧化應激致心肌細胞損傷情況 研究組與對照組相比,乳酸脫氫酶的含量明顯升高且經統計學原理檢測,結果差異有統計學意義(P
2.2線粒體情況
【關鍵詞】化工產品檢測技術 課程 改革
《化工產品檢測技術》是高職工業分析與檢驗專業的專業必修課,先行課程有《化學分析檢測技術》和《儀器分析檢測技術》,此階段學生具備基本的分析檢測技能,掌握了常規的定量和定性分析方法,熟悉了常用分析儀器的操作,而《化工產品檢測技術》是綜合培養學生崗位能力的進階課程。關于分析類課程改革的研究成果較多,主要集中在課程整合、開放性實驗和考核制度等方面[1]~[3]。筆者在《化工產品檢測技術》課程教學改革中做了一些嘗試,取得了良好的效果,具體做法如下:
一、教學改革特點
(一)注重學生自學能力的培養。
授課之初就要求學生在后繼的課程學習中獨立開展文獻檢索,獲取各項任務所需的產品檢測標準及相關知識,并逐步培養良好的文獻檢索習慣,即廣泛獲取資料,分類整理,做好文獻來源記錄,形成文獻摘要筆記,甄別各類資料,做到因需取舍,提高學生自學的能力。
(二)通過角色扮演,提高學生的學習興趣。
把整個班級假想為一個分析測試中心,分析測試中心下設若干項目組。授課教師在機構中是中心主任的角色,負責任務布置、項目組織和解疑答惑的工作,主要起到引導的作用。班級學生被分成若干項目組,具體去完成下達的任務。根據各組完成任務的質量,發放虛擬的獎勵薪酬,并開展優秀項目組活動,激發了學生的積極性。
(三) 以項目為載體,任務驅動。
選擇四個典型化工生產企業(氯堿企業、水泥生產企業、磷肥生產企業和石油產品生產企業),設計四個綜合分析檢測項目,每個項目下設若干個任務。任務按照由簡單到復雜的梯度設計,在每個任務中又有若干平行的子任務提供給各項目組,有效杜絕項目組之間互相抄襲的問題。
(四)真實企業環境與學校模擬環境交替。
每個項目開展前,授課教師將組織各項目組前往真實企業去了解具體的產品生產工藝,各產品質量監控點的分布,企業質量檢測中心的工作流程以及常規的檢測情況。以此為基礎,在學校模擬企業環境開展分析檢測。同時,將企業文化融入到具體的任務中,比如安全要求、審批制度等。
二、課程的具體組織形式
(一)教師布置任務,學生開展初步方案設計。
首先,教師引出工作項目和對應的任務,并為各項目組布置平行的子任務。各項目組根據下達的子任務,在組長的帶領下開展組內討論,并進行組內分工開展資料的搜集和整理,并初步形成分析測試方案。
(二)學生匯報方案設計,教師審定。
在課堂上,項目組針對方案設計進行闡述和匯報,教師現場答疑。同時將該任務的知識點進行剖析,指出方案的不足,并與項目組議定實施方案。在這個環節,有效鍛煉學生的團隊協作能力和表達能力。
(三)方案具體實施。
各項目組依照確定的方案開展分析測試前的試劑準備工作,并進行具體的樣品分析測試,并形成產品測試報告。與傳統的實驗形式的區別在于,以往由教師準備的試劑工作轉變成由學生自主準備試劑,增強學生的對手能力,并提高了學生對任務的整體認識,有利于培養學生獨立自主開展分析測試的能力。
(四)結果點評及知識拓展。
任務實施后,教師組織項目組對方案實施過程中的問題進行梳理,并對結果進行點評。通過點評,與學生一起找出分析測試結果不理想的原因。同時,進一步為學生介紹與任務相關的前沿知識,拓寬學生的視野。
三、輔助手段和措施
(一)融入綠色化學的理念。
綠色化學即用化學的技術和方法去減少或杜絕那些對人類健康、社會安全、生態環境有害的原料、催化劑、溶劑和試劑、產物、副產物等的使用和產生, 遵循“ 減量( reduction)、重復使用( reuse )、拒用( rejection)、回收( recycling )、再生( regeneration) ” 5R原則[4]。要求學生在具體的分析測試方案設計時,要充分考慮環保問題。
(二)提供課程網絡平臺。
教師開發課程網絡平臺供學生課外學習。學生可以在平臺上在線學習相關的知識拓展的內容,以及最新的研究咨詢,同時可以通過網絡平臺實現師生即時溝通。
(三)開放實驗室。
以學生為中心,通過開放實驗室為學生提供課外開展拓展實驗的便利條件,使學有所長的學生可以通過開放實驗室鍛煉個人的科研能力和創新能力,同時為學生提供互相學習和交流的平臺。
(四)充分利用學生科技類社團的作用。
在校內學生社團化學化工科技協會中安排指導教師,有針對性地在學生中培養分析測試能手,為各級各類分析檢驗賽事儲備人才。
總而言之,通過對《化工產品檢測技術》課程的教學改革, 實現了學生為主體的課程改造,提高了學生的自學能力、溝通能力和分析測試能力,綜合素質獲得有效提升,為未來崗位實踐打下了良好的基礎。
本文系2011年廣西新世紀教改工程重點項目(項目編號:2011JGZ096)。
參考文獻:
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[關鍵詞] 地方高校 化工類專業 實踐教學 改革
中圖分類號: G642.0 基金項目:院級重點教學質量工程項目(化學化工應用型人才培養創新實驗區)。
引 言
化工行業是我國社會經濟發展的重要支柱。化工類專業主要有應用化學、化學工程與工藝、應用化工技術等專業,都是技術性、綜合性、通用性很強的專業。化工類專業畢業生必須能夠把理論應用于實踐,具有較強的分析和解決專業問題的能力,具備工程意識、創新能力和創新精神,動手能力強,勇于實踐,善于實踐。因此,化工類專業教育必須加強對學生動手能力的培養,也就是要加強實踐性環節的教學改革 [1-5] 。此外,社會經濟的發展對化工行業應用型技術人才質量提出了更高的標準和要求,人才需求重心已由專業化人才向應用型人才轉移,化工類專業實踐教學越來越具有其他教學環節不可替代的作用。為了滿足社會經濟發展對人才的需求,必須更加注重實踐教學。
地方院校中化工專業實踐性教學存在的問題
1. 實踐教學的軟硬件投入不足
目前,大部分地方院校都處于大發展時期,由于經費有限,往往把大量資金用于基礎建設,忽略了實踐教學的綜合作用,用于實踐教學的資金和人力投入也嚴重不足,主要表現在以下五個方面:
(1)對實踐教學的綜合作用定位不清楚。一些院校僅僅把實踐教學視為培養學生化工技能的手段,忽略了實踐教學對學生知識、能力、素質培養方面的綜合作用,對應用型化工行業的職業特點考慮不足,從而影響實踐教學功能和作用的發揮。
(2)地方院校中青年教師占較大比例,尤其是青年教師對實踐教學認識不深,化工實踐技能薄弱,實際動手能力普遍比較差,具有企業一線工作經驗的教師很少。此外,化工實踐枯燥而單調,部分實踐教學環境較差,年輕教師不愿從事實踐教學,從而導致從事實踐教學的教師數量、質量不高,隊伍不穩定。
(3)實驗室設備老化陳舊,綜合性、設計性實驗開出率較低,實習實訓基地建設緩慢,實訓條件與現代企業的設備技術差距很大。學生在實驗室做的大多是驗證型實驗,在實習實訓基地,大多數企業基于對安全性因素的考慮,不讓學生動手,學生很難接觸先進設備,由于不熟悉操作環境和自動化控制,學生的實際化工技能水平較低,在工廠實習時往往不知所措,難以適應。
(4)經濟發展水平不同地區實踐教學投入差異較大,人才培養質量受地方經濟社會發展水平約束。地方院校往往處于工業落后的地區,大型企業相對較少,如果去發達區域去實習、實訓,經費又不能保證,于是變通了實踐教學計劃,縮短實習實訓時間,最終導致人才培養質量受到較大影響。
(5)隨著工業自動化水平的提升,學生實際操作機會越來越少。現代化生產對生產安全性的高度重視,自動化控制越來越多,學生動手機會很少,實際操作能力得不到有效鍛煉。
2.實踐教學質量監控體系不完善
目前,很多院校實踐教學中缺乏科學有效的保障與評價體系,對應用型化工專業人才培養的目標、要求和時間無強制性規定,使學生的實際化工技能水平與專業培養目標有較大的差異。以化工實習為例,由于化工生產中存在的諸多不安全因素,生產單位大多顧慮重重,不愿讓學生親臨生產第一線進行生產實踐實習;同時由于沒有完善的質量監控體系,很多院校出于安全考慮,生產實踐實習僅僅是帶領學生參觀見習。因此,化工專業的學生實都屬于“走馬觀花”,不能深入了解問題,更不用說進行工藝參數的調試操控了。
地方院校化工類專業實踐教學改革措施
1.結合人才培養目標,構建合理的實踐教學體系
化工類專業培養目標是使學生具有獨立獲得知識,應用知識的能力;培養學生體察工程實際問題的復雜性,學會處理化工一般工程問題的方法,掌握分析和解決化學、化工實際問題的能力;培養學生化工設計能力、從事實驗研究的能力。安康學院化學化工系積極進行地方院校化工類專業實踐教學改革,在實踐教學中結合專業人才培養目標和陜南地方經濟發展實際,把化工類專業實踐教學分校內實踐教學、校外實踐教學和課外實踐教學三個模塊,遵循教育教學規律,在不同學年度安排不同層次的實踐教學內容,詳見表1。
2.突出專業特點,完善實踐教學方法
安康學院化學化工系為全面提高學生的實驗實踐動手能力,除了不斷改進化工原理等專業課程教學方法之外,重點對實踐教學方法及實踐教學體系進行改進和完善,讓學生在學習理論的同時感受到知識的實用性,對化工生產操作控制技術、分析檢測技術等有初步且直觀的認識。
(1)改革實驗教學模式。采取了傳統實驗計劃和開放式實驗教學相結合的實驗教學模式,加強學生基本技能訓練。在開放實驗教學中,教師引導學生獨立思考,引導其進行觀察、分析和解決問題,這種模式有利于學生進行進一步學習,有利于培養學生有意識地考慮每一個重要實驗步驟所涉及的理論、背景,運用學過的基礎知識解決實際問題。此外針對陜南地方富硒資源和礦產資源特色增加選修實驗,拓展選修實驗課范圍,注重與分析、環境、材料等學科的交叉。
(2)開放實驗室,鼓勵學生參與教師科研,以拓寬實驗時間和空間。教師把科研項目作為開放課題,學生在教師指導下查閱文獻、收集資料、制訂實驗方案,進行較高層次的研究。實驗過程中,通過教師的指導,學生可以較快地熟悉科研一般過程,從中感受科研工作的全部內涵,在獲得知識的同時體會知識的產生過程,掌握科學研究的基本規律和科學的思維方法,也提高了獨立工作的能力。
(3)加強校企、校地合作,探索產學研結合培養實踐能力途徑。通過專家、學者下基層活動,帶領高年級學生走出去,為企業、政府解決實際問題,共同研究產業發展問題,爭取企業的支持和幫助,建立穩定、友好、長期的合作關系,為產學研結合的健康發展提供良好的條件,為學生提供最先進而且適合市場需求的知識結構和技能結構。
3.加大投入,優化實踐教學條件
安康學院化學化工系近年來注重學生工程實踐能力的培養,加大實踐教學投資,逐步完善實踐教學課程體系,優化實踐教學條件,提升了實踐教學質量。
(1)加強實驗室硬件建設。實驗是對學生進行基礎性實踐訓練的重要環節,對培養學生的動手能力,觀察、分析問題的能力,以及創新和科學研究的能力具有重要意義[6]。安康學院化學化工系在近年來累計投入近200萬元用于實驗室的硬件建設,充實了無機化學實驗室、有機化學實驗室、物理化學實驗室、分析化學實驗室、儀器分析實驗室和化工基礎實驗室設施設備,新組建了應用化學綜合實驗室,實驗設備能基本滿足一人一臺,可開出的實驗個數也比以前翻了一番,確保學生的基礎實驗和綜合實驗能力得到有效的鍛煉和提高。此外從實驗課題內容、方法和管理改革入手,強化了實驗的考核,確保實驗教學的質量。
(2)大力實施校內實訓基地和化工仿真實踐基地建設[7]。安康學院化學化工系已建成化工原理實訓室、化工仿真實訓室、分析檢測實訓室、分離提取實訓室。通過實訓室的學習和鍛煉,使學生在校內就能熟練掌控先進的化工生產過程自動化控制系統,學會快速、迅捷地調整實際生產過程中的工藝參數,提高對實際生產時間過程中動態運行的分析和決策能力。
(3)積極開展校外各種實踐基地建設。生產實習和畢業實習基地建設,主要目的在于提高學生實踐能力、社會適應能力,努力拓寬就業渠道。安康學院化學化工系與重慶長壽化工有限公司和地方化工企業合作建立了十余個實習基地。實踐基地的建立一方面加深了學生對基礎理論基本操作等方面的綜合認識和運用;另一方面又可以展示學生自身良好的素質形象,增強就業心理預期,從而博得生產單位的青睞,提高自身的就業競爭力。
(4)積極開展大學生課外科技創新活動。安康學院化學化工系積極開展大學生科技創新大賽等活動。加大科研經費的投入,實施相應的考核和獎勵制度,激勵教師帶領學生開展科研的積極性和主動性,為培養學生的動手能力和創新性提供鍛煉平臺。通過對兩屆學生的教學改革實踐,學生的實踐能力得到了較大提升,畢業生在人才招聘市場中普遍受到用人單位的歡迎;學生的創新精神也得到了鍛煉,在首次參加的陜西省大學生課外作品大賽和陜西省大學生創業大賽中分別獲得 “第二名”和“銀獎”。
4.完善實踐教學考核方式
考核與評估是教學系統中最敏感的環節,它對教學雙方都起著指揮棒作用,影響教學的全過程。主要措施是:
(1)重視考核內容選擇。根據教學大綱要求結合實際生產條件,組織教學經驗豐富的教師編寫教材,如基礎實驗教材、課程設計教材等,使實踐教學環節規范化、程序化,如實驗、設計及實習的具體學時數的確定、課堂講授內容、現場實習,以及對指導教師的要求等。
(2)重視考核方式選擇。根據教學內容,采取分項考核記分的方式,筆試與實驗操作相結合,綜合評定學生各個實踐環節的成績。考核方式還根據課程不同特點采取了實驗筆記、實驗操作、實驗設計、論文報告等考核形式。
(3)建立實踐教學評價機制。根據學生實踐能力考核成績和學生、教師、督導網上評教對指導教師進行綜合考核。通過進一步細化實踐教學評估體系,全面、真實、合理地評價實踐教學效果,建立良好的激勵機制,促使教師開展創造性的實踐教學工作,促使學生的特長和潛能在實踐教學中得以充分發揮,促進學生個性與共性的共同成長。
結束語
安康學院化學化工系通過長期的實踐教學探索,根據地方高校和區域經濟的特點,形成了地方高校化工類專業實踐教學的特有方式:一方面通過科研訓練、課程設計、仿真實訓等校內實踐環節逐步學習和參與到教師的科研項目、校企之間的合作項目中來,使學生的化工設計能力、實驗研究能力得到鍛煉和提高;另一方面通過課程見習、化工見習和實習等校外實踐環節的進行,不斷增強學生學習和體察工程實際問題的復雜性,使學生工程意識和解決實際工程問題的能力得到不斷提高。
毋庸置疑,高校實踐教學質量關系著學生實踐能力、思維能力和創造能力諸多方面,更直接地影響著學生從事實踐生產的適應能力。因此,為加強工程實踐能力的培養,參與區域經濟建設,增強自身競爭力,地方院校更應注重實踐教學內容與模式,緊密結合區域產業,密切產學研合作,創建具有區域經濟特色的化工類應用型本科人才培養模式。同時要轉變教育理念,改革傳統的教育模式,不斷加強化工類專業實踐教學改革,積極探索具有中國特色的地方性高校實踐教學的途徑和方法,培養具有創新能力、創新思維、知識全面、動手能力強,符合企業要求的新型應用型化工類專業人才,以適應社會對人才培養的需要。
參考文獻:
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