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【關鍵詞】 砷中毒
地方性砷中毒是嚴重危害人類身體健康的一種疾病。貴州省是我國地方性砷中毒重病區之一,目前仍然存在眾多的砷中毒病區和砷中毒病患者。迄今為止,砷毒性作用的機制尚未完全闡明。在有關砷中毒的酶學研究中發現,砷中毒時并不是體內所有酶的活性都受到抑制,有些酶的活性反而升高,相關酶活性變化的研究結果也并不一致〔1-4〕。砷進入機體后,主要經血液進入肝臟,并主要分布于肝臟線粒體〔2〕。因此,研究砷中毒時與肝細胞及肝細胞線粒體受損相關的酶顯得甚為重要。此外,在慢性砷中毒時,血液中多種生物學指標的改變可能早于臨床表現,因此,探討血液生化指標,對于臨床慢性砷中毒的早期診斷也具有積極的意義。本文以大鼠為研究對象,探討慢性砷中毒時大鼠肝臟線粒體相關酶及肝臟損傷相關血清酶活性的改變,以便為進一步揭示砷對機體的毒性作用機制并為選擇有意義的慢性砷中毒早期診斷酶學指標提供有價值的資料。
1 材料與方法
11 試劑及物品 脲酶(英國默克公司);瓜氨酸,氨基甲酰二鋰磷酸鹽(美國Fluka公司);其余均為國產分析純試劑。
12 實驗動物分組及處理 1~2月齡Wistar大鼠48只,雌雄各半。隨機分為2組:實驗組28只,飲用含75mg/L三氧化二砷(As2O3)的蒸餾水,常規大鼠飼料喂養。對照組20只,飲用蒸餾水,以同樣的飼料喂養。2組均于染毒前、染毒3個月及6個月時測定大鼠毛砷含量。染毒3個月時,隨機抽取實驗組及對照組大鼠各10只,股動脈放血處死;6個月時,處死全部動物,取肝臟及血液進行檢查。
13 毛砷含量測定 采用二乙氨基二硫代甲酸銀法〔5〕。
14 大鼠線粒體制備 取大鼠肝2g。采用差速離心法制備〔6〕。按考馬斯亮藍法〔7〕,以牛血清白蛋白為標準,定量線粒體蛋白。
15 線粒體酶活性測定 細胞色素C氧化酶(COX)活性測定及線粒體ATP酶活性測定參照文獻〔8〕進行,COX比活力=K×min/mg線粒體蛋白。ATP酶活性單位以μmol/(mg pro·min)表示。
16 大鼠血清酶活性測定 鳥氨酸氨基甲酰轉移酶(OCT)測定,血清谷氨酸脫氫酶(GDH)活性測定及血清精氨酸酶(Arginase)活性測定參照文獻〔9〕進行。OCT活力國際單位為:每升血清每分鐘在37℃時,由OCT的作用產生1μmol瓜氨酸定為一個國際單位。谷氨酸脫氫酶活性(毫國際單位GDH=吸光度×2×05×1000。精氨酸酶單位=鳥氨酸的微克數×0505。血清腺苷脫氨酸(ADA)活力測定參照文獻〔10〕進行,其活力單位指1ml血清使腺苷產生1μg氨氮為一個活力單位。血清谷胱甘肽硫轉酶(GST)活力測定參照文獻〔11〕進行,一個GST酶單位活性,相當于在37℃條件下1min催化1μmol CDNB與GSH結合的能力。
17 統計分析 應用SPSS 110軟件進行分析。毛砷含量呈偏態分布,結果以G±SG表示。結果均采用t檢驗進行差異的統計學檢驗。
2 結果
21 大鼠毛砷含量測定(表1) 在飼養過程中,由于大鼠死亡,在染毒6個月時,大鼠數量為16只。砷染毒3個月后大鼠毛砷含量即顯著升高,與實驗前及正常對照組相比,差異有統計學意義(P
表1 各組大鼠毛砷含量測定結果比較(略)
22 大鼠肝臟線粒體酶活性變化(表2) 與正常對照組比較,大鼠染毒3個月后其肝臟線粒體COX活力顯著降低(P005)。表明砷中毒時,大鼠肝臟線粒體細胞色素C氧化酶活性已較早并持續地受到抑制。同時染毒3個月及6個月組大鼠肝臟線粒體ATP酶活力均顯著降低(P
轉貼于
表2 各組大鼠肝臟線粒體酶活性變化(略)
23 大鼠血清酶活性變化(表3) 砷中毒3個月及6個月大鼠血清谷氨酸脫氫酶及鳥氨酸氨基甲酰轉移酶活力均有顯著升高(P01),染毒6個月時才出現該酶活力的顯著升高(P
表3 各組大鼠血清酶活性變化(略)
3 討論
本研究采用飲水加三氧化二砷復制慢性砷中毒大鼠模型,輔以毛砷含量檢測觀察大鼠的砷中毒狀況。鐘復光等〔5〕對燃煤型砷中毒病區砷毒接觸者發砷含量的研究結果表明,發砷含量對慢性砷中毒診斷有重要意義。本文測定結果表明,染毒組大鼠毛砷含量與對照組及染毒前大鼠比較明顯升高,說明實驗動物已經處于嚴重的砷中毒狀態。本文研究結果表明,砷可顯著抑制肝臟線粒體細胞色素C氧化酶及ATP酶的活性。這2種酶的活性受到抑制,必然引起氧化磷酸化過程受阻,能量產生障礙,導致線粒體功能的損害,嚴重影響機體細胞功能〔12〕。這可能是慢性砷中毒時,砷毒性作用的重要機制之一。本實驗研究還發現,砷中毒大鼠血清GDH及OCT活性均顯著升高。由于這2種酶均定位于肝臟線粒體基質,是肝臟線粒體的特異性酶類。其血清酶活性增高,反映了砷中毒不僅可使肝細胞,而且可使其線粒體受到嚴重損傷,以至酶自線粒體和細胞內滲出到血液中增加其活性。精氨酸酶、ADA及GST都是存在于肝細胞的特異酶類。血清精氨酸酶及GST活性升高,可能是肝細胞受損后肝細胞內酶釋出到血清中引起。ADA屬于一種巰基酶,每個分子至少含2個活性巰基〔13〕。大鼠染毒3個月時血清ADA活性升高,其原因可能是因為肝細胞膜受到砷中毒的影響而通透性增高,使ADA泄漏到血液中所致。而隨著砷中毒時間的延長,體內積蓄的砷可能與肝細胞內和血液中的部分ADA的活性巰基結合,而抑制其活性,這可能是其血清中酶活性回降的原因之一。本實驗共檢測了5個血清酶在大鼠持續砷中毒時的酶活性變化,從尋找慢性砷中毒早期診斷酶學指標的角度看,血清谷氨酸脫氫酶、精氨酸酶在大鼠砷中毒期間一直升高,其活性變化持續的時間較久,可能更適宜作為一種臨床診斷的參考指標。
【參考文獻】
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〔12〕 沈同,王鏡巖.生物化學[M].2版.北京:高等教育出版社,1998:56-73.
學校實習邀請函
同學們:
為規范我院08級學生第二學期的實習申請及審批手續,學院特擬定了標準格式的實習申請及安全保證書,請需要的學生自行下載、打印之后按要求填寫。在接到企業的實習邀請函之后,外出實習的申請流程為(按次序依次辦理):
1、申請人將實習申請書(1份)、安全保證書(2份)填寫完整,由本人及監護人簽字確認。
2、在實習申請書上 請 本人畢業設計指導老師 簽字同意。
3、在實習申請書上 請 系主任老師 簽字同意。
4、將 企業實習邀請函、簽字后的實習申請書(1份)、安全保證書(2份)在12月29日前以班為單位統一交至輔導員處,由輔導員請教學副院長、學院副書記/院長助理簽字同意后,整個審批流程完畢,方可離校實習。
20xx年x月x日
學校實習邀請函范文
學院領導:
我單位已審核通過 同學關于來我單位實習的申請,因此邀請藥學院 專業 同學(學號:)來我單位實習。
實習期: 年 月 日 至 年 月 日
實習期間我單位承擔代管責任,同時會指導該同學完成合格論文,隨時接受貴校對校外實習同學現場進行中期檢查,并保證該同學能在20xx年5月15日前按時回校完成有關的畢業論文和畢業答辯,請院領導予以方便。
實習指導教師(經理、組長):
畢業論文題目:
單位地址:
單位聯系人:
單位聯系電話:
單位(簽章):
20xx年x月x日
學校實習邀請函范例
____________學院:
我公司為使高校范文大全盡快了解和熟悉公司及工作情況,使畢業生更快適應工作崗位的要求,誠摯邀請 專業 20xx級 學生
1. 實習時間:20xx年 3 月 1 日 至20xx 年 4 月 30 日。
2. 實習內容:
熟悉工作環境,學習 的有關知識,記錄常遇到的情況以及應對措施,積累經驗,建立良好的人脈關系;初步利用大學中所學到的知識解決一些實際問題,在實踐過程中摸索并不斷總結不足。
3. 在實習期間,我公司將負責學生的日常管理,同時保障學生在我公司實習期間的人身安全,按照《勞動法》和相關法規保證參加實習學生的合法權益,具體措施由學生本人和公司商定。
4. 學生因參加實習所產生的一切費用與學校無關,由學生和公司約定解決。
5. 參加實習的學生如與公司產生糾紛,應通過雙方友好協商或者法律途徑解決。
6. 實習期滿,公司應要求實習學生盡快返回學校參加畢業答辯。
公司電話:
在這個高速發展的時代,我們會經常使用申請書,利用申請書我們可以表達自己的愿望和訴求。但是你知道怎樣才能寫的好嗎?為了讓您在寫的過程中更加簡單方便,一起來參考是怎么寫的吧!下面給大家分享關于學生自主實習申請書,歡迎閱讀!
學生自主實習申請書1本人已自行聯系對口實習單位,且實習單位也提供了接收實習的相關證明,故申請在年月日至月日,到單位進行實習。(單位地址:__,單位聯系人:__,單位電話:__,本人聯系電話:__,家長聯系電話:__)。請予批準。
本人將嚴格按照以下要求進行實習:
1、嚴格按照學校規定的實習要求完成實習任務。
2、實習期間,必須通過職教新干線與輔導員聯系,每月上交實習報告到輔導員的空間。
若實習單位變動,在變動次日報告輔導員。
3、實習期間,自覺遵守實習單位的有關規章制度,并自覺遵守學校制定的教學管理條例,注意實習安全和人身安全,并對自己在實習期間的行為和安全負責。
如違反有關規定,一切后果責任自負。
家長簽字:
學生簽字:
輔導員意見:
系(部)意見(蓋章):
20__年__月__日
學生自主實習申請書2尊敬的__:
您好!我是__級水電系的學生,經過三年學校對我的培養,我已經完成了在校的學習,初步掌握了所學專業的理論和基本的實踐能力,由于求知的欲望和自己將來走向社會能夠更廣泛的掌握工作技能,現申請到院就業處實習。為以后的就業打好堅實的基礎。
大學畢業生是學校按照黨的教育方針精心培養的、適應國家建設需要的優秀人才資源,是高層次人才隊伍的后備力量。為做好黃岡職業技術學院畢業生就業工作,提高畢業生的就業率和就業質量,維護畢業生、用人單位和學校的合法權益,更好地為經濟建設和社會發展服務,院領導和就業工作處的老師不辭辛苦,日夜操勞。
我希望院領導能夠接受我的自主申請,也希望我在實習時的'工作能夠為站在一線的老師分憂,做一些力所能及的事情,雖然,在一些工作技能和經驗上我有些欠缺,但我相信自己會努力做好一切,做好畢業生的服務工作。
在實習中我保證做到一下幾點:
1、嚴格遵守學校實習要求和學校規章制度。
2、努力學習,虛心向就業處老師請教有關專業技能知識,服從就業處老師安排,遵守紀律。
3、積極做好簡章,通知等資料的張貼工作。
4、在老師忙的時候,做好前來咨詢同學的登記以及一些蓋章工作。
5、及時向老師反饋實習工作進展情況及所遇到的問題。
想到就能作到,努力就會有回報,相信所學能使用于社會需要,并為社會作出貢獻,為校爭光。望院領導能夠接受我的申請。
此致
敬禮!
申請人:___
20__年__月__日
學生自主實習申請書3尊敬的__:
我是___院___專業___班級的學生,我自主聯系好實習單位,實習期間我將到___單位實習實習,在自主實習期間,我會遵守以下幾點:
1、不再需要學校推薦就業單位;
2、嚴格按照學校制定的實習管理條例完成實習任務;
3、與輔導員保持聯系,匯報實習情況,若實習單位變動,在變動次日報告輔導員,如需我返校參加活動,保證按時返校;
4、按時到實習單位報到,實習結束按時歸校,逾期將自覺接受學院有關規定處理;
5、實習期間,自覺遵守實習單位的有關規章制度,注意實習安全和人身安全,并對自己在實習期間的行為和安全負責。
如違反有關規定,一切后果責任自負。
此致
敬禮!
申請人:___
20__年__月__日
學生自主實習申請書4尊敬的系領導:
本人是機電學院__專業__班學生,現申請自主實習,并已與家長商量,取得家長同意。現特向學院申請自主實習。在實習期間,本人保證做到以下幾點:
1、實習期間遵守單位的規章制度,信守合同,力爭得到用人單位良好評價;
2、實習期間遵紀守法,維護學院的形象,決不做違紀違法的事情,并注意個人安全;
3、實習期間按要求完成系里布置的教學內容,定期與畢業設計指導教師溝通,按進度完成畢業設計各項內容,上交畢業設計作業;
4、嚴格按照我系安排的時間回校參加考試及其他有關的工作,在離校期間保證與輔導員保持通訊暢通,更換聯系電話時能及時
告知,并做到及時向輔導員匯報有關學習、生活及實習情況。
特此申請,懇請學院領導批準。
此致
敬禮!
申請人簽名:___
聯系電話:____
20__年__ 月 __日
學生自主實習申請書5我叫__,是_____系____專業__班學生,我應聘于____公司實習。
實習期從__年__月__日到____年___月__日,經家長同意,特向學院申請從____年___月__日離校前往該公司實習,并保證做到以下幾點:
1、保證實習期間遵守單位規章制度,信守合同;
2、保證實習期間遵紀守法,維護學院形象;
3、保證實習期間注意人身安全,如出現安全事故,后果自負;
4、畢業設計及答辯前及時返校,完成學業。
5、實習期間,如學校因教學工作需要返校,本人保證及時返校。
請審核批準為盼。
申請人簽名:___
勞動仲裁延期開庭申請書1
申請人:賈___,男,______歲,漢族,______省______市人,私營企業業主,現住______市______區______路______號。
請求事項:
對于申請人與______對外經濟貿易公司鮮蘑公司購銷合同糾紛已向你會提起仲裁申請,并已被受理。現因申請人無法按期出庭,請求你會延期審理。
事實和理由:
申請人與___對外經濟貿易公司間鮮蘑購銷合糾紛,你會定于______年______月______日上午開庭審理。申請人于______年______月______日至______月______日在___省___市考察,原定于______月______日返回。
因______省______市至______省______市的部分鐵路塌陷,火車無法正常運行,使申請人無法按時返回______市參加開庭,為保障申請人出庭參加仲裁活動,行使權利,特向你會申請推遲本案開庭審理時間。
此致
______市仲裁委員會
申請人:賈________
____年____月____日
勞動仲裁延期開庭申請書2
申請人:______,女,______歲,______族,______省______市人,______民營企業經理,現住______市______區______路______號。
xx
請求事項:對于申請人與______經貿公司貨物購銷合同糾紛已向你會提起仲裁申請,并已被受理。現因申請人無法按期出庭,請求你會延期審理。
事實和理由:
(應祥述事實與理由,此略。)為保障申請人出庭參加仲裁活動,行使權利,特向你會申請推遲本案開庭審理時間。
此致
______市仲裁委員會
申請人:______
______年______月______日
相關知識:開庭通知與延期開庭
(一)開庭通知
仲裁庭應當在開庭五日前,將開庭日期、地點書面通知雙方當事人。根據一案一庭的原則,此時針對該案件的仲裁庭已經成立,具體承擔對案件的仲裁工作。仲裁庭成員應當認真審閱申訴、答辯材料,調查、收集證據,查明爭議事實。遇有需要勘驗或鑒定的問題,應交由法定部門勘驗或鑒定;沒有法定部門的,由勞動爭議仲裁委員會委托有關部門勘驗或鑒定。仲裁庭成員應當根據調查的事實,擬定處理方案,并根據法律對勞動爭議仲裁案件仲裁期限的規定,合理確定開庭日期。在確定開庭日期后,仲裁庭應當在開庭五日前,將開庭日期、地點書面通知雙方當事人。明確規定仲裁庭應當在開庭五日前通知當事人開庭日期、地點,一方面有利于當事人調查收集有關證據、資料,為開庭辯論、質證做準備,另一方面也便于當事人適當安排個人事務,以便按時出庭,體現了法律規定的人性化。關于通知的方式,本條明確規定為書面通知。
(二)延期開庭
第一條根據《中華人民共和國行政復議法》和《中華人民共和國行政訴訟法》及其他有關法律、法規和規章的規定,制定本規則。
第二條我局按照《中華人民共和國行政復議法》及時接受上級財政部門和昆山市人民政府的行政復議。
第三條有下列情形之一的,各級財政部門應當依法應訴:
(一)公民、法人或者其他組織因不服本級財政部門具體行政行為提起行政訴訟的;
(二)公民、法人或者其他組織因不服本級財政部門改變原具體行政行為的行政復議決定提起行,政訴訟的;
(三)其他應當依法應訴的情形。
第四條財政部門依法應訴應當確定訴訟人。
訴訟人一般由法制機構或者有關機構的工作人員擔任。必要時也可以委托律師擔任。
訴訟人人選由法制機構或者由法制機構與有關機構提出建議,報經部門主要負責人批準后,辦理授權委托書。
第五條財政部門應當依法及時向人民法院提交答辯狀及有關證據和材料。
對不服有關機構以本級財政部門名義作出的具體行政行為提出行政訴訟的,由有關機構在收到狀副本之日起五日內提出答辯狀,連同作出具體行政行為的有關證據和材料送交法制機構。法制機構應當對答辯狀進行審核,報經部門主要負責人批準后提交人民法院。
對不服財政部門改變具體行政行為的行政復議決定提起行政訴訟的,由法制機構提出答辯狀,報經部門主要負責人批準后提交人民法院。
第六條下列行政復議和應訴文書應當加蓋財政部門印章:
(一)不予受理行政復議申請決定書;
(二)行政復議決定書;,
(三)強制執行具體行政行為申請書;
(四)強制執行行政復議決定申請書;
(五)停止執行具體行政行為通知書;
(六)中止審查具體行政行為通知書;
(七)同意撤回行政復議申請通知書:
(八)責令履行行政復議決定通知書;
(九)作為行政復議案件被申請人提出的書面答復;
(十)訴訟人授權委托書;
(十一)行政訴訟、民事訴訟答辯狀;
(十二)其他應當依法加蓋財政部門印章的行政復議或應訴文書。
前款規定以外的其他行政復議和應訴文書,可以加蓋法制機構印章。
第七條行政復議文書應當按照《行政復議法》第四十條的規定送達。送達行政復議文書應當填制《送達回證》。
據統計,到目前為止,全國已有30多個省和副省級市及200多個地市、800多個縣成立了仲裁機構,去年全國共處理了5000多起各類人事爭議案件,保護了個人、單位的合法權益。
仲裁機構的管轄權限,受理仲裁范圍
按照《人事爭議處理暫行規定》,國務院各部委、國務院直屬事業單位以及各部委直屬在京事業單位的人事爭議,跨省(自治區、直轄市)的人事爭議,由人事部人事仲裁公正廳負責處理。省(自治區、直轄市)、副省級市、地(市)、縣(市、區)仲裁委員會的管轄范圍,由省(自治區、直轄市)確定,其各地設立的人事爭議仲裁機構,分別負責處理管轄范圍內的人事爭議。
下列四類情況為人事爭議處理的適用范圍:國家行政機關與工作人員之間因錄用、調動、履行聘任合同發生的爭議;事業單位與工作人員之間因辭職、辭退以及履行聘任合同或聘用合同發生的爭議;企業單位與管理人員和專業技術人員之間因履行聘任合同或聘用合同發生的爭議;依照法律、法規、規章規定可以仲裁的人才流動爭議和其他人事爭議。
怎樣寫仲裁申請書
當事人應當在爭議發生之日起60日內,以書面形式向仲裁委員會申請仲裁。仲裁申請書須載明的事項有:
(一)申請人姓名、性別、年齡、職業、工作單位和住所。如果申請人是單位,則應寫明單位的名稱、住所、法定代表人或者主要負責人的姓名、職務。
被申請人的姓名、性別、年齡、職業、工作單位和住所。如果被申請人是單位,則應寫明單位的名稱、住所、法定代表人或者主要負責人的姓名、職務。
(二)仲裁請求和所根據的事實、理由。
(三)證據和證據來源、證人姓名和住所。
仲裁委員會收到仲裁申請書后,15日內作出受理或者不受理的決定,如果已決定受理的,應在7日內將仲裁申請書副本送達被申請人并組成仲裁庭。被申請人在收到仲裁申請書副本之日起15日內應提交答辯書和有關證據。被申請人沒按時提交或者不提交答辯書,不影響仲裁程序的進行。
仲裁庭和仲裁參加人的組成
仲裁委員會處理人事爭議案件,實行仲裁庭制度。仲裁庭由三名以上(含三名)的單數仲裁員組成,仲裁委員會指定一名仲裁員擔任首席仲裁員;簡單的人事爭議案件,仲裁委員會可以指定一名仲裁員獨任處理。仲裁委員會可以聘任政府有關部門的人員、專家學者和律師為仲裁員。
國家行政機關、事業單位及其工作人員,企業及其經營管理人員和專業技術人員為人事爭議案件的當事人。法人由法定代表人參加仲裁活動,非法人組織由其主要負責人參加仲裁活動。
在仲裁過程中,法定代表人或者主要負責人更換,應由新的法定代表人或者主要負責人繼續參加仲裁活動,原法定代表人或者主要負責人參加仲裁活動的行為有效。
當事人為無行為能力或者是限制行為能力人,由其監護人參加仲裁活動;當事人死亡的,由其法定人或者利害關系人參加仲裁活動。當事人可以委托一到二人參加仲裁活動。委托他人的,必須向仲裁委員會提交有委托人簽名或蓋章的委托書。委托書應當明確委托事項和權限。
仲裁的程序
仲裁處理人事爭議應先行調解,在查明事實,分清責任的基礎上促使當事人雙方在不違反法律、法規的前提下,自愿達成協議。調解達成協議的,仲裁庭根據協議制作調解書。調解書上寫明仲裁請求和當事人協議的結果。調解書由仲裁庭成員簽名,加蓋仲裁委員會印章,送達雙方當事人。調解書經雙方當事人簽收后,即發生效力。如果調解未達成協議,或者在調解書送達前當事人反悔的,仲裁庭應當及時進行仲裁。
仲裁一般是開庭進行的。但當事人協議不開庭或仲裁庭認為不宜開庭的,也可以書面仲裁。決定開庭處理的,仲裁庭應當于開庭前5日內將開庭時間、地點等書面通知當事人。仲裁申請人經書面通知,無正當理由不到庭或者未經仲裁庭許可中途退庭的,可以視為撤回仲裁申請。被申請人經書面通知,無正當理由不到庭或者未經仲裁庭許可中途退庭的,可以缺席仲裁。
當事人應該對自己的主張提供證據。仲裁庭可根據需要自行收集證據。但是仲裁的證據必須是經過質證認定的事實。
當事人在仲裁過程中有權進行辯論。辯論終結時,首席仲裁員或者獨任仲裁員應當征詢當事人的最后意見。
裁決應按多數仲裁員的意見作出,當仲裁庭不能形成多數意見時,裁決按首席仲裁員的意見作出。仲裁庭對重大的或疑難的人事爭議案件的處理,可以提交仲裁委員會討論決定。仲裁庭應當在裁決作出后5日內制作裁決書。裁決書應當寫明仲裁請求、爭議事實、裁決理由、裁決結果、仲裁費用的負擔和裁決日期。裁決書由仲裁庭成員簽名并加蓋仲裁委員會的印章。裁決書一經送達,即發生效力。
仲裁庭處理人事爭議案件,一般應當在仲裁庭組成之日起60日內結案。案件復雜需要延期的,經仲裁委員會批準,可以適當延期,但是延長的期限不得超過30日。
發生效力的調解書、裁決書當事人必須執行。
1通過產學研結合推進農業經濟管理實踐性教學
教育部在《關于深化教學改革,培養21世紀需要的高質量人才的意見》中明確強調“樹立人才培養要更加積極主動地適應社會發展需要,堅定不移地走‘產學研3結合’的人才培養道路的思想”。產學研結合是高等學校培養人才、科學研究和服務社會三大職能的具體要求。世界各國的著名高校在產學研結合這一環節上都做得相當成功,我國在這方面也在逐步加強。改革開放以來,農業企業不斷增多,促進了農業生產的不斷發展和農產品的不斷豐富,但農業的經營思想和農業企業的經營管理觀念還比較落后。這就需要農林高校和企業緊密結合,加強科研和教育的雙向交流。開辦農業經濟管理專業的高等院校應盡量加強教學與生產實際、企業經營管理的結合,使學生走出校園,了解當前農業生產的現狀、農業企業管理和科學技術方面的現狀及缺陷。從而達到理論聯系實際、知行合一的目的。
2007年,在《教育部關于進一步深化本科教學改革全面提高教學質量的若干意見》中明確指出,要進一步加強對本科實驗實踐等教學基本條件的投入。當前農業經濟管理專業的實踐教學基礎仍然比較薄弱,如何加強實踐教學是農業經濟管理課程的重要課題。這就要求高等院校加大專業硬件投入,要求擔任農業經濟管理課程的教師積極改善實踐性教學條件,加強與有關企業聯系及合作,指導學生在實踐中學習、在學習中實踐,通過產學研結合方式發展農業經濟管理教學,培養現代農業經濟管理人才。
2通過社會實踐和科研學術活動提高農業經濟管理專業實踐教學質量
農業經濟管理類本科實踐性教學主要分為課程實驗、專業綜合實訓、科研實踐、情景模擬實驗和社會實踐5個階段。開展社會實踐和科研學術活動能將不同階段所學內容有機結合起來,在教學活動中,做了以下嘗試性研究。
2.1教學活動組織環節
(1)學生自由組成4~5人的團隊,根據自己了解的情況,自由選題,并撰寫申請書。申請書按照自然科學基金申請的格式,分為立項依據、研究內容、研究路線、創新性和經費預算。由于具有社會實踐的功能,申請書中增加了技術可行性和風險性分析這部分內容。
(2)申請書以作業形式交給任課教師。任課教師根據申請書的情況審批后,組織相關學生團隊進行討論。好的項目爭取和相關企業、村委會等部門取得聯系,然后進行類似實習的方式推進該研究活動。
(3)各團隊針對申請書研究內容開展實踐性教學活動,并在期末面向全體同學進行答辯。答辯過程中其他學生每人至少提一個問題,從而達到雙向互動的目的。
2.2教學活動效果分析
從這幾個學期的教學效果來看,此活動收到了良好的效果,對于提高學生的寫作能力、實踐能力、分析能力和領導力均有很大好處。專業與社會實踐是一項重要的模擬實踐活動,由于農業經濟管理學科的交叉性,加上國與國、地區與地區之間的差異,實踐性教學的內容本應是豐富多彩的,但目前由于條件所限,實踐性教學內容比較單一,這就導致老師難教、學生難學的局面出現。因此,農業經濟管理的實踐性教學應當與相關的農業企業、農業生產部門、政府相關職能部門建立廣泛的合作機制,使得學生能夠在學習階段了解企業的經營管理,了解相關部門對農業的宏觀調控。在教學中,可以借鑒東北農業大學的經驗,即“班村共建”的措施。東北農業大學最初是以農林經濟管理專業的一個班級和學校附近的一個村對接,學生通過義務支教、擔任村主任助理、為村委會建網站、辦信息報等形式開展社會實踐,取得了很好的效果。目前已經推廣到全校百余個班級,成為該校學生實踐性教學的重要載體。
3農業經濟管理專業實踐性教學中需要關注的問題
3.1通過實踐性教學提升學生的綜合能力
農業經濟管理是一項復雜的社會活動,當前社會對農業經濟管理人員具有很高的要求。通過實踐性教學增強學生的綜合能力是教學的重要方面,可從如下幾個方面加以培養:(1)增強學生動手能力的培養。學校應重視概率論與統計等基礎課的開設,要求學生必須熟練掌握相關的財務及統計軟件,熟練分析各種規律,迅速生成報表,并撰寫報告。(2)增強學生領導力的培養。通過各種競賽活動、各種創業模擬活動,提高學生的領導能力。(3)增強學生全球化觀念。專門對這方面的能力進行訓練和培養,既可學習國外先進的管理經驗,還能培養學生全球化觀念,把自己放在全球農業經濟中來思考和觀察問題,有助于培養和提升學生的綜合能力。
【關鍵詞】缺血-再灌注損傷;細胞凋亡;TNF-α;IL- 6;Bcl- 2;Fas
缺血-再灌注損傷是導致急性腎損傷(Acute Renal Injury,AKI)的常見原因之一。腎臟缺血再灌損傷早期的細胞死亡在AKI的發生機制有關鍵作用[1-2]。現代醫學已得出結論,Bcl-2、Bax、Fas等凋亡調節蛋白及許多炎癥因子如TNF-α、細胞因子及生長因子會在細胞凋亡過程中發揮重大影響[3-5]。凋亡腎小管上皮細胞在AKI中的病理生理作用及形態學改變尚不完全清楚。本實驗以缺血再灌損傷的動物模型從分子水平進一步探討急性腎損傷中腎小管上皮細胞Bcl-2、Fas蛋白表達及血清中TNF-α、IL-6的變化對細胞凋亡的影響。
1 材料與方法
1.1 材料 SD大鼠,雌雄不拘,體重100~120g,細胞凋亡檢測試劑盒,Fas免疫組化染色試劑盒、Bcl- 2免疫組化染色試劑盒,大鼠TNF-αELISA試劑盒, 大鼠IL- 6 ELISA試劑盒(美國BPB Biomedical)。
1.2 方法
1.2.1 腎缺血再灌注(IR)動物模型制備SD大鼠放在室溫為18~22℃的環境下按日常標準喂養。2%戊巴比妥鈉30~40mg/kg腹腔內注射,腹部正中線切口,用無損傷動脈夾鉗夾雙側腎蒂40min造成缺血-再灌注損傷動物模型,松開后觀察到大鼠腎臟由顏色變成鮮紅,即灌注成功。處理好傷口之后照常標準喂養。依次在模型建立之后2小時、6小時、12小時、24小時、48小時分批處死動物,心臟采血檢測TNF-α、IL-6、SCr。采集血樣后馬上將左側腎臟摘下來,用4%多聚甲醛固定后作常規石蠟包埋切片。假手術組(Sham組)僅暴露雙側腎臟,不鉗夾腎蒂,其余處理方式相同。
1.2.2 實驗分組48只健康、雄性SD大鼠,隨機分為6組(每組8例):_ Sham組;_ IR2h組;_IR6h組;_IR12h組;_ IR24h組;_IR48h組;實驗方法同上。
1.2.3 腎小管上皮細胞凋亡的檢測取HE染色切片相鄰的切片常規脫蠟入水,并按試劑盒流程處理,用顯微鏡觀察。腎小管上皮細胞核中出現的棕黃色顆粒就是陽性細胞,即凋亡細胞。檢測結果分析:隨機選取5個200倍清晰視野,并采用圖像分析儀計數視野中的細胞總數及陽性細胞數,然后得出每張切片的陽性細胞百分率。
1.2.4 采用SABC免疫組化法檢測腎小管上皮細胞中Fas及Bcl-2表達水平腎小管上皮細胞膜或胞漿著色呈棕黃色者為Fas陽性細胞;腎小管上皮細胞漿著色呈棕黃色者為Bcl-2陽性細胞。檢測分析同上。
1.2.5 腎功能采用Beckman全自動生化分析儀檢測SCr,苦味酸法。
1.2.6 血清TNF-α、IL-6測定每個標準品和標本的OD值減去零孔的OD值;標準品濃度作為橫坐標,OD值作為縱坐標,用線連接個標點,通過標本的OD值就可查出其濃度。
1.3 統計學處理
應用SPSS 11.0統計軟件包處理數據,計量資料進行t檢驗,計數資料采用χ2檢驗,P0.05認為有統計學意義。
2 結果
2.1 形態學改變
2.1.1 HE染色
Sham組:一切正常;IR2h組:腎小管上皮細胞呈不規則形狀排列,腎小球一切正常,間質之間存在淤血現象;IR6h組:腎小管上皮細胞瓦解并脫落,管腔呈現蛋白管型,紅細胞管型,細胞碎片,腎小球腫脹變形,炎性細胞浸潤;IR12h組:腎小管上皮細胞瓦解較為顯著,可觀測到灶性壞死區和裸基底膜,結構模糊不清,蛋白管型大量出現,紅細胞管型及細胞管型,腎小球腫脹,腎小囊腔變得狹窄,并且可以觀察到白色滲出物質,炎性細胞浸潤;IR24h組:腎小管上皮細胞仍有脫落,細胞扁平,管腔擴張,不規則,腎小球的灌注較好,間質淤血減輕;IR48h組:腎小管上皮細胞腫脹,管型少見,細胞核大小不等,損傷較前減輕,腎小球基本正常,灌注較好,間質淤血減輕。
2.1.2 腎小管上皮細胞凋亡 Sham組凋亡細胞百分率明顯低于IR12h 組,陽性率分別為2.03±0.82%,77.74±5.00%(P0.01)(見表1),以皮髓交界區為甚,見圖1
2.2 Fas及Bcl- 2免疫組化結果
2.2.1 Sham組Fas少量分布于腎小管上皮細胞,而IR12h組表達明顯增強,見圖2,其陽性細胞百分率分別為:3.02±0.82%,83.23±2.22%(P0.01)見表1
2.2.2 Sham組Bcl-2少量分布于腎小管上皮細胞,以遠端小管為甚,而IR12h組腎小管上皮細胞表達更為減少,見圖3,其陽性細胞百分率分別為:2.00±0.90%,0.40±0.05%(P0.01)見表1
2.3 腎功能
IR后2h SCr水平逐漸升高,以IR后12h最為明顯,IR后24h SCr水平逐漸恢復。Sham組及IR12h組SCr分別為:29.04±9.59(μmol/l),196.97±19.94(μmol/l)見表2(每組8例,χ±s)(P0.01)
2.4 清TNF-α、IL-6含量血清TNF-α、IL-6變化趨勢與SCr一致,Sham組及IR12h組血清TNF-α含量分別為:19.54±3.00(pg/ ml),130.58±36.57(pg/ml),Sham組及IR12h組血清IL-6含量分別為:65.72±16.45(pg/ ml),352.70±58.32(pg/ml)見表2(每組8例,χ±s)(P0.01)。
表1 腎缺血再灌注后12小時腎小管上皮細胞凋亡、Fas、Bcl-2蛋白表達的比較 [陽性細胞百分率(%)]
組別
例數(n)
凋亡細胞(%)
Fas(%)
Bcl-2(%)
Sham組
8
2.03±0. 82
3.02±0.82
2.00±0.90
IR12h組
8
77.74±5.00(1)
83.23±2.22(1)
0.40±0.05(1)
注:與Sham組比較,(1)P0.01
表2 腎缺血再灌注后12小時血清中SCr(μmol/l)、TNF-α、IL-6(pg/ml)水平(χ±s)
組別
例數(n)
SCr(μmol/l)
TNF-α(pg/ml)
IL-6(pg/ml)
Sham組
8
29.04±9.59
19.54±3.00
65.72±16.45
IR12h組
8
196.97±19.94(1)
130.5±36.57(1)
352.70±58.32 (1)
注:與Sham組比較,(1)P0.01
3 討論
隨著現代醫學飛速發展,IRI機制在AKI的發生中備受關注。此實驗表明,IR所致的AKI中存在腎小管上皮細胞凋亡的情況,尤其以皮髓交界區最為常見,此現象極有可能跟腎缺血再灌注后腎皮髓質的能量差異有密切關系;除此之外還可能由于缺血再灌注后細胞內鈣超載、氧自由基增多、炎性介質釋放等多種因共同作用下而導致,確切機制仍未完全清楚。本實驗表明,細胞凋亡是缺血再灌注所致AKI中腎小管上皮細胞死亡的重要方式,在腎功能損害最嚴重時細胞凋亡數目逐漸遞增,由此可見細胞凋亡在腎功能損害中起著相當重要的作用。HE染色提示缺血再灌注后12h腎小管上皮細胞結構不清、排列紊亂、脫落、灶性壞死、管型形成、炎性細胞浸潤等改變相對于其他各組織損害最為嚴重,由此可分析出在急性腎損傷的極期壞死與凋亡可共存于同一模型中,嚴重影響了腎功能。
急性腎損傷的得病人群很廣泛,任何一個年齡段的人都會發生,但是最容易得的急性腎損傷的應該是老年人。年紀大的人,可以理解,它的腎臟老化了,那么血管病變高血壓器官老化比較明顯,這樣腎臟耐受打擊的能力下降。所以他們容易得急性腎損傷;通過持續性腎臟替代治療清除血清TNF-α、IL-6能改善AKI患者預后。TNF-α是一種單核細胞來源的致死性因子。本實驗中血清TNF-α、IL-6在缺血再灌注后12h相對較高,比假手術組有高度顯著性(P0.01),且與SCr變化程度相一致,此現象表明缺血性急性腎損傷也可能由于炎癥而引起。腎缺血再灌注可能會引起全身或者局部炎癥,釋放了包括TNF-α、IL-6在內的多種炎癥介質,這些炎癥因子的產生將啟動腎IRI的炎癥級聯反應。TNF-α和FasL可能通過炎性腎小球漏出到達腎小管上皮細胞或者局部分泌增加,來發揮其對腎小管的生物學作用。當前醫學界公認的是IL-6是AKI炎癥因子之一,可由內皮細胞在缺氧和TNF-α刺激下合成[8]。次試驗表明TNF-α可能是腎缺血再灌注的損傷因子,可能介導AKI極期的細胞凋亡。
此實驗研究顯示腎缺血再灌注后12h Fas蛋白顯著增高,并且以皮髓交界區明顯,假手術組Fas蛋白僅少量表達,表明Fas可能介導缺血性急性腎損傷極期腎小管上皮細胞凋亡過程, 認為Fas的上調與局部TNF-α增高有關,但TNF-α與Fas結合后信號傳遞的確切機制仍不清楚,需要進行進一步探討。
本實驗發現Bcl-2蛋白在假手術組中可呈少量陽性表達,而在缺血再灌注后12小時下調,缺血再灌注所致急性腎損傷極期,Bcl-2蛋白的下調與TNF-α大量釋放有關。TNF-α可通過抑制 Bcl-2及Bcl-xl的mRNA的表達,導致Bcl-2/Bax和Bcl-xl/Bax比值下降而發生細胞凋亡[9];另一方面缺血性急性腎損傷中Bcl-2的下調也可能與某些生存因子的相對缺乏有關[10]。
綜上所述,此實驗結果表明腎缺血再灌注損傷動物模型中確實存在細胞凋亡現象。凋亡調控蛋白表達的改變極有可能是炎癥引起,TNF-α大量釋放后通過上調Fas和下調Bcl-2蛋白來參與。本研究提示,促進抗損傷機制而抑制腎臟損傷,延緩細胞凋亡,誘導再生,對組織損傷后解剖生理及功能的恢復將有重要意義。
參考文獻
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第一條 為加強我市城鎮房屋管理,及時處理房屋糾紛,保護當事人的合法權益,根據有關法律、法規,結合我市實際,制定本辦法。
第二條 本辦法適用于平等主體的公民之間、法人之間、其他組織之間以及他們相互之間在本市城鎮發生的房屋糾紛。
第三條 本辦法所指房屋包括其附屬物。
第四條 貴陽市人民政府設立貴陽市房屋糾紛仲裁委員會(以下簡稱仲裁委員會),負責本市城鎮房屋糾紛的仲裁。
第五條 仲裁委員會受理的房屋糾紛案件,必須是當事人在合同中訂有仲裁條款或者事后達成書面仲裁協議的。在處理中,必須堅持調查研究,以事實為依據,以法律為準繩,保障當事人平等地行使權利。
第六條 仲裁委員會仲裁房屋糾紛案件,實行一次仲裁制度。
第七條 當事人向仲裁委員會申請仲裁,應從其知道或者應當知道權利被侵害之日起二年內提出。法律另有規定的除外。
第八條 當事人、法定代表人可以委托一至二人為人。人必須向仲裁委員會提交當事人載明委托事項和權限的授權委托書。
第二章 仲裁組織
第九條 仲裁委員會由主任委員、副主任委員、委員組成。
仲裁委員會的組成人員經市人民政府批準。
仲裁委員會下設辦公室,辦理日常工作。
第十條 仲裁委員會設專職仲裁員若干人,由仲裁委員會任命,并可聘請若干兼職仲裁員,兼職仲裁員與專職仲裁員在履行職務時享有同等權利。
仲裁員由具有專業知識、法律知識和實際工作經驗的人擔任。
第十一條 仲裁委員會辦理房屋糾紛案件,由仲裁員二人和仲裁委員會指定的首席仲裁員一人組成仲裁庭進行。
第十二條 仲裁庭評議案件,實行少數服從多數的原則。評議應當制作筆錄,由仲裁庭成員簽名。評議中的不同意見,應當如實記入筆錄。
疑難、復雜的案件以及仲裁庭分歧較大的案件,應當提交仲裁委員會討論決定。仲裁委員會討論決定案件,實行少數服從多數的原則。仲裁委員會的決定,仲裁庭必須執行。
第十三條 仲裁員、記錄員、鑒定人有下列情形之一的,應當回避:
(一)是本案當事人;
(二)是本案當事人的近親屬;
(三)與本案有利害關系;
(四)與本案當事人有其他關系,可能影響對案件公正處理。
當事人發現仲裁員、記錄員、鑒定人有上述情形之一的,有權申請其回避。
第十四條 首席仲裁員的回避由仲裁委員會決定;仲裁員的回避由仲裁委員會主任委員或副主任委員決定。記錄員、鑒定人的回避由首席仲裁員決定。對申請回避作出的決定,可以采取口頭或書面方式告訴當事人。
第十五條 仲裁人員應當依法秉公辦案,不得接受當事人及其人請客送禮。
仲裁人員有貪污受賄,徇私舞弊,枉法裁決行為的,應當追究行政責任和法律責任;構成犯罪的,依法追究刑事責任。
第三章 仲裁范圍
第十六條 仲裁委員會受理下列房屋糾紛案件:
(一)因房屋的買賣、贈與、分割、典當、抵押等發生的糾紛;
(二)因房屋租賃、使用、互換、修繕等發生的糾紛;
(三)有關法律、法規、規章規定受理的房屋糾紛;
(四)仲裁委員會認為應當受理的其他房屋糾紛。
第十七條 仲裁委員會不受理下列房屋糾紛:
(一)人民法院已經受理或審理辦結了的房屋糾紛;
(二)因離婚、繼承、析產發生的房屋糾紛;
(三)涉及尚未落實政策的房屋糾紛;
(四)涉及外國人和華僑、港、澳、臺同胞的房屋糾紛;
(五)單位內部分配、調整房屋發生的房屋糾紛。
第四章 仲裁程序
第十八條 當事人向仲裁委員會申請仲裁房屋糾紛,應按照本辦法的規定遞交申請書和有關證據,并按照被申請人數提交副本。申請書應當寫明以下事項:
(一)申請人名稱(姓名)、住所、法定代表人姓名、職務;
(二)被申請人名稱(姓名)、住所、法定代表人姓名、職務;
(三)申請的要求及其理由;
(四)證人姓名和住址。
第十九條 仲裁委員會接到申請書后,經審查符合法律、法規規定的,應當在七日內立案;不符合規定的,應在七日內通知申請人不予受理并說明理由。
案件受理后,應在五日內將申請書副本送達被申請人。被申請人收到申請書副本后,應在十五日內提交答辯書和有關證據。被申請人沒有按時提交或不提交答辯書的,不影響案件的處理。
案件受理后,仲裁庭應當在自立案之日起三個月內辦結,確需延長的,經仲裁委員會批準,可以適當延長,但最長不得超過六個月。
第二十條 仲裁庭對受理的案件,應當進行調查,收集和審查有關證據。各種證據經驗證核實后,方能作為認定事實和仲裁的依據。
仲裁委員會有權自行調查取證,可向有關單位或個人查閱有關案件的檔案、資料和原始憑證,有關單位或個人應如實提供材料,協助進行調查;需要時,應出具證明。
第二十一條 現場勘驗或者對物證進行技術鑒定,可通知當事人及有關人員到場,必要時可邀請有關單位派人協助。勘驗筆錄和技術鑒定書,應寫明時間、地點、勘驗鑒定結論,由參加勘驗、鑒定的人員簽字或者蓋章。
仲裁委員會委托有關單位進行技術鑒定時,受托單位應按照委托鑒定的項目、標準認真辦理。
第二十二條 仲裁委員會認為有必要時,可以在作出仲裁決定之前,通知有關部門對有爭議的房屋停辦過戶、轉讓和改擴建等手續。有關部門接到通知后,應予以執行。
第二十三條 仲裁委員會處理案件期間,有關單位和有關人員在接到仲裁委員會的協助通知書后,應積極協助,不得拖延。
第二十四條 仲裁委員會在處理案件時,應先行調解。調解可以由仲裁庭主持,也可由仲裁員一人主持。
第二十五條 仲裁庭應當在查清事實,分清責任的基礎上進行調解,促使當事人互相諒解,達成協議。
調解達成協議,必須出于雙方當事人自愿,協議內容不得損害國家利益、公共利益和他人的合法權益,不得違背法律、法規、規章和政策。
第二十六條 調解達成協議后應制作調解書。調解書應寫明當事人基本情況,主要事實,協議內容和仲裁費承擔;調解書應由當事人簽名,仲裁員、記錄員署名,并加蓋仲裁委員會印章。
調解書經雙方當事人簽收并履行后生效。
第二十七條 調解未達成協議,或調解書送達后不履行的,應當由仲裁庭進行仲裁。
需要開庭仲裁的,由仲裁庭在三日前將開庭時間、地點,以書面方式通知當事人。
申請人經兩次通知,無正當理由拒不到庭的,或未經仲裁庭許可中途退庭的,可按撤回申請處理。
被申請人經兩次通知,無正當理由拒不到庭的,或未經仲裁庭許可中途退庭的,可作缺席仲裁。
第二十八條 仲裁庭仲裁案件按下列順序進行:
(一)宣布案由和仲裁人員名單,告知當事人的權利和義務;
(二)詢問當事人,出示和宣讀有關證據;
(三)申請人及其人發言;
(四)被申請人或其人答辯;
(五)雙方辯論。
雙方辯論終結,仲裁庭按申請人、被申請人順序征詢最后意見,并可再行調解,調解未達成協議的,由仲裁庭評議后裁決。
第二十九條 仲裁決定書應當寫明:
(一)申請人和被申請人的名稱(姓名)、地址及其法定代表人或者人姓名、職務;
(二)申請的理由、爭議的事實和要求;
(三)仲裁決定認定的事實、理由和適用的法律、法規、規章和政策;
(四)仲裁決定的結果和仲裁費用的承擔;
(五)不服仲裁決定的起訴期限。
仲裁決定書由仲裁員、記錄員署名,加蓋仲裁委員會的印章。
第三十條 當事人不服仲裁決定,可在收到仲裁決定書之日起十五日內,向房屋所在地的人民法院起訴;逾期不起訴的,仲裁決定書即發生法律效力。
第三十一條 對已經發生法律效力的仲裁決定,發現確有錯誤,認為需要重新處理的,由主任委員、副主任委員提交仲裁委員會討論決定。
第三十二條 已經發生法律效力的裁決,當事人應當履行,一方逾期不履行,另一方可向人民法院申請強制執行。
第三十三條 參加仲裁活動的當事人和有關人員,應遵守仲裁秩序。阻礙仲裁員執行公務的,給予批評教育;情節嚴重的,由公安機關依照《中華人民共和國治安管理處罰條例》處理;構成犯罪的,由司法機關依法追究刑事責任。
第五章 附 則
第三十四條 當事人應繳納仲裁費。仲裁費包括案件受理費和案件處理費。
仲裁費標準由市房屋糾紛仲裁委員會會同市物價局另行制定。
仲裁費由申請人預交。
經仲裁終結的案件,仲裁費由敗訴人承擔;當事人部分勝訴,部分敗訴的,按比例分擔。
第三十五條 調解書和仲裁決定書發生法律效力后,權屬關系需要變更的,房地產管理部門和土地管理部門應分別辦理手續。